MTA2、MMP-7蛋白在結腸癌與癌旁組織中的表達及意義

趙嶺嶺 李景光 劉艷彩 吳春平 劉學剛

隨著人們對結腸癌的深入研究，人們發現腫瘤轉移相關基因MTA家族參與腫瘤侵襲轉移過程，所以對MTA基因的研究十分關鍵。MMP-7在惡性腫瘤侵襲和轉移中起著重要作用，且其表達水平與淋巴結轉移等存在緊密聯系。本文研究為探討MMP-7、MTA2在結腸癌組織中的表達情況，特對醫院收治患者進行研究，同時選擇患者癌旁組織進行比較，如下。

1 材料與方法

1.1 一般資料

選取2015年1月至2017年8月于我院收治的結腸癌100例患者組織標本作為觀察組，其中男性65例、女性35例；年齡52～75歲，平均為(66.5±6.1)歲；高-中分化50例、低分化50例；40例無淋巴結轉移、60例淋巴結轉移；90例未伴遠處轉移、10例遠處轉移；TNM分期：Ⅰ～Ⅱ期42例、Ⅲ～Ⅳ期58例。另選取結腸癌癌旁組織100例作為對照組。術前未進行化療等治療，患者知情且簽署知情同意書。

1.2 方法

采用免疫組化SP法分別檢測2組MTA2、MMP-7表達情況。染色步驟：先對組織標本進行切片、脫蠟和水化處理，并采用自來水沖洗；然后行抗原修復，滴加過氧化酶阻斷劑，切片上滴加動物非免疫血清，于室溫下孵育10 min，然后將血清去除，并滴加第一抗體，將切片放置于4 ℃環境下過夜，將PBS去除，再次滴加生物標記的第二抗體，于室溫下孵育10 min，采用PBS沖洗3次，每次沖洗3 min。再次滴加新鮮配制的DAB顯色劑，用水沖洗，并采用蘇木精復染，應用梯度乙醇脫水，二甲苯透明，中性樹膠封固。

1.3 判斷標準

陽性：細胞質中出現棕黃色顆粒；選取陽性細胞較為集中的區域10個(400倍)，然后計算陽性細胞百分比，如陽性細胞≥10%則判斷為陽性，否則為陰性。

1.4 統計學方法

采用SPSS 17.0軟件處理，計數資料采用率表示，采用χ2檢驗，P<0.05為差異具有統計學意義。

2 結果

2.1 觀察組與對照組MTA2、MMP-7陽性表達情況

觀察組中MTA2陽性表達率60.0%(60/100)，對照組中MTA2陽性表達率10.0%(10/100)，2組相比較，差異有統計學意義(χ2=54.945，P=0.000)。觀察組中MMP-7陽性表達率53.0%(53/100)，對照組中MMP-7陽性表達率17.0%(17/100)，2組相比較，差異有統計學意義(χ2=28.484，P=0.000)。

2.2 觀察組癌組織中MTA2陽性表達情況

50例高-中分化結腸癌患者中，MTA2陽性表達率為40.0%(20/50)，明顯低于低分化結腸癌中MTA2陽性表達率80.0%(40/50)，χ2=16.667，P=0.000。40例無淋巴結轉移結腸癌組織中MTA2陽性表達率為32.5%(13/40)，明顯低于伴淋巴結轉移結腸癌組織MTA2陽性表達率78.3%(47/60)，χ2=21.007，P=0.000；90例未伴遠處轉移結腸癌組織中MTA2陽性表達率為58.9%(53/90)與伴遠處轉移結腸癌組織中MTA2陽性表達率70.0%(7/10)比較，χ2=0.463，P=0.496；TNM分期Ⅰ～Ⅱ期結腸癌組織中MTA2陽性表達率28.6%(12/42)，明顯低于TNM分期Ⅲ～Ⅳ期82.8%(48/58)，χ2=29.803，P=0.000。50例高-中分化結腸癌患者中，MMP-7陽性表達率為32.0%(16/50)明顯低于低分化結腸癌中MMP-7陽性表達率74.0%(37/50)，χ2=16.026，P=0.000。40例無淋巴結轉移結腸癌組織中MMP-7陽性表達率為25.0%(10/40)，明顯低于伴淋巴結轉移結腸癌組織MMP-7陽性表達率71.7%(43/60)，χ2=20.982，P=0.000；90例未伴遠處轉移結腸癌組織中MMP-7陽性表達率為53.3%(48/90)與伴遠處轉移結腸癌組織中MMP-7陽性表達率50.0%(5/10)比較，χ2=0.072，P=0.789；TNM分期Ⅰ～Ⅱ期結腸癌組織中MMP-7陽性表達率19.0%(8/42)，明顯低于TNM分期Ⅲ～Ⅳ期77.6%(45/58)，χ2=33.511，P=0.000。見表1。

3 討論

結腸癌是一種常見的消化系統惡性腫瘤疾病，目前尚未完全清楚其發病機制，隨著人們生活飲食習慣和結構的變化，結腸癌發病率逐漸升高，給人們生命健康造成極大威脅[1]。腫瘤發生和生長及浸潤、轉移是一個較為復雜的變化過程，與較多因素有關，因此了解腫瘤發生和轉移等誘發因子具有重要價值[2]。MTA2是腫瘤轉移相關基因家族中的一員，其陽性表達率與腫瘤惡變程度等存在緊密聯系[3]。本文研究結果顯示，MTA2與結腸癌分化程度、臨床病理分期等存在緊密聯系，且在腫瘤侵襲中起著重要作用，該研究結果與當前各文獻報道結論相似。但因本文研究樣本數量有限，為進一步探討MTA2與結腸癌間的關系，還有待進一步深入研究以探討其作用機制，為臨床疾病預測和治療提供參考。

表1 觀察組癌組織中MTA2、MMP-7陽性表達情況 (例，%)

基質金屬蛋白酶家族是一類作用于基底膜和細胞外基質的肽鏈內切酶，其幾乎可降解除多糖以外的細胞外基質所有成分[4]。人體細胞遷移和細胞外基質重建的動態平衡主要由基質金屬蛋白酶共同來維持，然一旦當其動態平衡失常則會致腫瘤細胞侵襲和轉移；所以了解MMP-7與結腸癌間的關系具有重要意義[5]。有相關研究發現[6]，MMP-7異常表達與多種腫瘤發展存在緊密聯系；有學者[7]曾對食管癌患者進行研究，研究發現MMP-7在食管癌中具有較高表達水平，且與患者臨床病理分期存在緊密聯系。本文研究結果顯示，結腸癌組織中MMP-7與淋巴結轉移、臨床病理分期、浸潤程度等存在緊密聯系，且分化程度越高、淋巴結轉移等，患者陽性表達率越高。由此說明通過檢測MMP-7可有助于臨床判斷患者病情程度，為臨床評估患者預后及制訂治療方案提供有力參考[8]。

綜上所述，結腸癌組織中MMP-7、MTA2表達水平明顯高于癌旁組織，同時其表達水平與腫瘤臨床分期和分化程度及淋巴結轉移等存在緊密關系，所以通過檢測MMP-7、MTA2表達水平可有助于臨床判斷患者預后，對醫師制訂治療方案有極大的指導價值。