豬孤雌激活胚胎和卵母細胞體外成熟過程中的甲基化檢測

宋尚橋，曾素先，馬圍圍，王睿敏，嚴 瑾， 孫翠翠，李 鑫，黎宗強*

(1. 廣西大學動物科學技術學院，廣西 南寧 530004；2. 南寧市江南區沙井街道辦事處水產畜牧獸醫站，廣西 南寧 530045)

【研究意義】DNA甲基化是調節核重編程的眾多重要因素之一，其與一系列生命過程不可分割，例如基因激活、細胞分化與發育、以及衰老等等。因此，對于DNA甲基化的探索成為近年來的熱點的研究話題。在近些年的研究報道中發現DNA甲基化異常現象存在于很多種動物的體細胞克隆胚中[1-3]。開展豬孤雌激活胚胎甲基化水平的研究，有助于了解早期胚胎的基因組甲基化的進程和發展，對于胚胎發育具體的機制的研究以及深度探討胚胎發育失敗的原因具有深遠的影響和重要的意義。【前人研究進展】DNA甲基化異常現象存在于很多種動物的體細胞克隆胚中[1-3]。若想要將克隆有效的進行下去，對于甲基化被反轉而又能重新被建立這方面是不可或缺的[4]，然而，對于甲基化的再一次形成以及去甲基化的具體機制尚不明確。有關報道表明，在發育成熟后的卵母細胞以及精細胞中存在多個CpG位點被甲基化，這個階段的甲基化水平雖然低于精子的甲基化成熟，但是，就總體而言，受精前配子的甲基化呈現出一個較高的水平[5]。而大范圍的脫甲基化是在胚胎植入前期進行。如果在卵子成熟期，卵子的甲基化水平低或者是不正常，會引起受精卵的甲基化異常，進而導致胚胎的發育異常。目前普遍認為為了使核再程序化進行得更完全，MⅡ期卵母細胞質是適宜的受體，而處于G0期或G1期的體細胞核是合適的核供體，檢測卵母細胞發育的情況為核移植，克隆等技術打下堅實的基礎，提高核移植和克隆等技術的效率。……