老年AMI患者血漿microRNA-30a的表達水平及診斷效能分析

楊曉偉　閆泱錦

【摘要】目的分析老年急性心肌梗死（AMI）患者血漿microRNA-30a的表達水平及診斷效能。方法選取本院65例老年AMI患者為觀察組，另同期選取40例于本院體檢健康的老年人群為對照組。采用實時熒光定量聚合酶鏈式反應法（RT-PCR）對兩組血漿mieroRNA-30a的表達水平進行檢測，并通過繪制受試者工作特征（ROC）曲線分析microRNA-30a在老年AMI患者中的診斷效能，并計算診斷敏感度、特異度及準確性。結果RT-PCR檢測結果發現，與對照組比較，觀察組血漿microRNA-30a的表達水平顯著上調（P<0.05）。ROC曲線結果顯示，microRNA-30a對預測老年AMI的ROC曲線下面積為0.82，其診斷最佳閾值為0.10，約登指數取得最大值為0.53，此時microRNA-30a的診斷敏感度為83.08%，特異度為70.00%，準確性為78.10%。結論microRNA-30a在老年AMI患者血漿中的表達水平顯著升高，且其對老年AMI的預測具有一定的臨床診斷效能。

【關鍵詞】急性心肌梗死;老年;microRNA-30a;診斷效能.

中圖分類號：R542.2+2

文獻標識碼：A

文章編號：1009-816X（2019）06-0528-03

doi：10.3969/j.issn.1009-816x.2019.06.013

急性心肌梗死（acute myocardial infarction，AMI）是因冠狀動脈急性、持續性缺血缺氧而導致心肌壞死，該病在我國近年來的發病率及死亡率均逐年增高，并其在歐美發達國家的死亡率居于各類疾病之首【1，2】。AMI可因冠狀動脈斑塊破裂而促使人體凝血系統激活，使得冠狀動脈緊急閉塞，造成血流受阻及心肌壞死;患者在發生胸痛、心力衰竭或休克等癥狀后，容易引發心律失常、心臟驟停及猝死，對患者的生命安全極為不利【3】。AMI仍是目前引起心源性死亡的主要原因之一，據報道，此類患者在院內死亡率仍高達17%【4】。因此，快速、準確、有效診斷AMI對及時挽救患者生命，改善患者預后狀況具有重要意義。已有研究表明，目前超出20個miRNA對AMI具有一定的臨床診斷價值【5】。另有研究報道，microR-NA-30a高表達于先天性心臟病患兒血漿中，且與患兒心功能密切相關【6】，但有關其在老年AMI血漿中表達水平及其對AMI診斷效能的研究報道并不多見。為此，本研究采用實時熒光定量聚合酶鏈式反應法，通過檢測老年AMI患者血漿microRNA-30a的表達水平，旨在分析其對老年AMI的診斷效能。

1資料與方法

1.1一般資料：選取本院2017年1月至2018年6月

65例老年AMI患者為觀察組，另同期選取40例在本院體檢健康的老年人群為對照組。入選標準：（1）觀察組均符合AMI的診斷標準【7】;（2年齡≥65歲;（3）觀察組均于AMI相關癥狀發生后12h內采血;（4）對照組均于本院行常規體檢，結果未見異常。排除標準：（1）伴有心腦血管疾病史;（2）伴有肝、腎功能不全;（3）伴有重癥感染、惡性腫瘤、血液系統疾病、自身免疫系統疾病;.（4）伴有精神性疾病，依從性差;（5）臨床資料不全。

1.2檢測方法：采集兩組靜脈血3mL通過miRNeasyRNA isolation試劑盒（美國Qiagen公司）對其血漿總RNA進行提取，嚴格按照試劑盒說明書指示進行操作;采用實時熒光定量聚合酶鏈式反應法對兩組受試者血漿microRNA-30a的表達水平進行檢測，在實時熒光定量PCR儀（購自美國ABI公司，型號為7500）.上進行檢測，采用2-ACt對microRNA-30a相對表達量進行計算。

1.3統計學處理：將數據錄人SPSS23.0版統計學軟.件，計量資料用（x±s）表示并采用t檢驗，計數資料.的比較則用x2檢驗，通過繪制受試者工作特征（receiver operating characteristie，ROC）曲線分析microRNA-30a在老年AMI患者中的診斷效能，并計算診斷敏感度、特異度及準確性，P<0.05為差異有統計學意義。

2結果

2.1兩組臨床基本資料的比較：兩組性別、年齡及體質量指數（body mass index，BMI）等一般資料的比較，均無統計學意義（均P>0.05），見表1。

2.2兩組血漿microRNA-30a表達水平的比較：RT-PCR檢測結果發現，觀察組患者血漿microRNA-30a的表達水平為（0.17±0.04），對照組健康人群血漿m1-CroRNA-30a的表達水平為（0.09+0.02）。結果顯示與對照組比較，觀察組患者血漿microRNA-30a的表達水平顯著_上調（P<0.05）。

2.3血漿microRNA-30a對預測老年AMI的診斷效能：ROC曲線結果顯示，microRNA-30a對預測老年AMI的ROC曲線下面積為0.82，其診斷最佳閾值為0.10，約登指數取得最大值為0.53，此時microRNA-30a的診斷敏感度為83.08%，特異度為70.00%，準確性為78.10%，見圖1。

3討論

AMI是臨床常見的心肌壞死性疾病之一，是因冠狀動脈血供明顯減少或中斷而出現急性、持續性、嚴重缺血缺氧而致，使得心肌細胞出現不可逆性壞死【8】。該病具有起病急、死亡率高等特點，仍是目前導致患者死亡的一種主要疾病。心肌肌鈣蛋白等多種心肌相關酶是目前臨床診斷AMI的主要參數，但在各種心臟性疾病中，肌鈣蛋白的表達均可出現不同程度的差異，使之在臨床中的誤診率較高【9】，使其在臨床應用中存在一定局限性。因此，探索一種更為有效、準確的血清標志物以提高對AMI的診斷效能顯得尤為重要。

microRNA為一段非編碼小分子RNA單鏈，其具有高度保守性，是由21～25個核糖核苷酸組成，可通過干擾mRNA的翻譯及穩定性而起到調控多細胞生物體中基因表達轉錄的作用，并且其在疾病發生、發展的病理過程及生物進化等方面起到重要的調控作用【10】。microRNA可特異性結合靶信使RNA，通過阻滯或降解其翻譯而在人體內各種生理病理過程（如細胞增殖、分化、凋亡等方面）中起到重要作用【11】。同時，內源性microRNA可抵抗核糖核酸酶的降解，即便在不同室溫、凍融條件或pH值等各種情況下仍可穩定分布于血清中，其含量變化極小，因此有利于臨床檢測。因microRNA在血液中具有良好的穩定性，且在不同病理生理狀態下的表達存在明顯變化，故此可作為理想的血清學生物標志物【12】。已有研究指出，microRNA與多種心血管疾病（如心律失常、心力衰竭.或心肌梗死等）均存在一定關系【13】。另有研究顯示【14】，microRNA通過調控其靶基因表達而起到調節心肌細胞壞死與凋亡、改善心肌功能的重要作用，同時其在AMI的發生和發展的病理過程中起到重要作用，其在心肌梗死患者血漿中的水平顯著上升，可作為臨床診斷AMI的潛在血清標志物。另有研究指出，microRNA30a高表達于心力衰竭患者中，同時其與先天性心臟病患兒的心功能密切相關，可作為臨床.診斷先天性心臟病的一種潛在外周血生物標志物【15】。上述研究提示，microRNA30a異常表達與機體血清中，可能是臨床診斷老年AMI的潛在血清學標志物。

本研究結果表明，microRNA30a在老年AMI患者血漿中的表達水平顯著升高。此外，microRNA-30a對老年AMI的預測具有一定的臨床診斷效能，因此可作為臨床診斷老年AMI的潛在生物標志物。但在本文中未涉及與其它micRNA診斷心血管疾病的比較。

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（收稿日期：2019-2-25 ）