婦糜康陰道栓長期給藥對家兔血液生理生化指標的影響

孟 莉 向紹杰 劉小虎 宋達夫 張慧穎 賈天柱

(1.遼寧省中醫藥研究院，沈陽 110034)(2. 遼寧中醫藥大學藥學院，大連 116600)

婦糜康陰道栓是由川椒、白癬皮、地骨皮等幾味中藥組成，具有清熱解毒，燥濕、殺蟲止癢功效。用于治療濕熱下注所致的帶下量多、外陰瘙癢，灼熱疼痛等陰道炎。前期藥理實驗表明，婦糜康陰道栓對白色念球菌、金黃色葡萄球菌、大腸桿菌、綠膿桿菌有抑制作用，能提高磷酸組織胺所致豚鼠瘙癢反應的致癢閾。為進一步考察其安全性，以便更好地應用于臨床，本實驗根據《中藥、天然藥物長期毒性研究技術指導原則》對婦糜康陰道栓進行家兔長期毒性實驗研究[1]，觀察其對血液生理生化指標的影響，為臨床安全用藥提供參考。

1 材料與方法

1.1 實驗動物

白色家兔48只，雌性，體質量1.5～2.0 kg，由沈陽藥科大學實驗動物中心購進，許可證號：SCXK(遼)2009-0002。實驗動物飼養于遼寧省中醫藥研究院實驗動物中心，許可證號： SYXK(遼) 2012-0003；實驗溫度20～23 ℃，濕度55%～60%。照明時間采用為10 h(明)/14 h(暗)交替，顆粒飼料由北京科澳協力飼料有限公司提供，許可證號: SCXK(京) 2009-0012。

1.2 受試藥物與試劑

婦糜康陰道栓浸膏粉，每克浸膏粉含9.52 g生藥，批號：20120701-0。賦形劑為PEG400和PEG4000按重量比1∶1混合。婦糜康陰道栓浸膏粉、賦形劑均由遼寧中醫研究院提供。血細胞分析儀用稀釋液，批號：120911H18；丙氨酸轉氨酶試劑盒，批號12-1023P；天門冬氨酸轉氨酶試劑盒，批號12-1024P；堿性磷酸酶試劑盒，批號12-0912P；白蛋白試劑盒，批號11-0926；總蛋白試劑盒，批號11-0510；谷氨酰轉移酶試劑盒，批號12-1114P；血清總膽紅素測定通用試劑盒，批號12-0915P；總膽固醇試劑盒，批號12-1015P；甘油三酯試劑盒，批號12-0828P；尿素氮試劑盒，批號12-0922P；肌酐液體試劑，批號12-1015；血糖試劑盒，批號12-0926P；肌酸磷酸激酶試劑盒，批號12-0905P，均由金斯爾提供；凝血酶原試劑盒，批號STG20101，由北京世帝公司提供。

1.3 儀器

ABX Pentra 60血細胞分析儀，上?？迫A卓越；330全自動生化分析儀，北京世帝科學儀器公司；LG-PABER型血小板聚集凝血因子分析儀，美國雙杰兄弟集團有限公司。

1.4 方法[2-7]

1.4.1分組與給藥:健康雌性家兔48只，按體質量隨機分成4組，賦形劑對照組及婦糜康陰道栓浸膏粉低、中、高3個劑量組，每組12只。婦糜康陰道栓浸膏粉按0.952 g/kg、2.856 g/kg、8.586 g/kg體質量(相當于臨床擬給藥劑量的6、20、60倍)陰道給藥，每天1次，連續給藥6個月。

1.4.2觀察指標: 試驗期間，每日觀察受試家兔的行為體征、外觀形態及藥物可能產生的不良反應等。每周稱家兔體質量1次，觀察其體質量最快的變化情況。分別于給藥6個月及停藥4周后，各組分別取6只家兔，禁食不禁水18 h，麻醉，腹總動脈采血，檢測血液學及血液生化學指標。

1.5 統計學方法

2 結果

2.1 對家兔一般狀況、體質量的影響

給藥期間，各組受試家兔被毛光澤、口周、鼻黏膜無破潰、活動正常，攝食、飲水、大小便均未見異常，亦未發現因藥物中毒引起的受試動物死亡或其它毒副反應發生。各給藥組受試家兔體質量與賦形劑對照組比差異無顯著性(P>0.05)。

2.2 對血液生理指標的影響

給藥6個月及停藥4周后，各組受試家兔血液生理指標測試，結果見表1、2。由結果可知，婦糜康陰道栓浸膏粉低、中劑量組家兔血液生理指標與賦形劑對照組比差異無顯著性(P>0.05)。婦糜康陰道栓浸膏粉高劑量組家兔紅細胞數、血紅蛋白含量及紅細胞壓積與賦形劑對照組比均明顯增多(P<0.05)，其它血液生理指標與賦形劑對照組比差異無顯著性(P>0.05)。停藥4周后，恢復正常。給藥組對血液其它生理指標無明顯影響(P>0.05)。

表1 婦糜康陰道栓浸膏粉陰道給藥6個月對家兔血液生理指標的影響Table 1 Effect of Administration of Bomixiao Vaginal Suppository on blood hematology indexes in rabbits after six

注:賦形劑與對照組比較：*P<0.05

Note:vs.normal control group：*P<0.05

2.3 對血液生化指標的影響

給藥6個月及停藥4周后，各組受試家兔血液生化學指標測試結果見表3、4。由結果可知，各給藥組受試家兔血液生化學指標與空白對照組比，差異無顯著性(P>0.05)。

表2 婦糜康陰道栓浸膏粉陰道給藥對停藥4周后家兔血液生化指標的影響Table 2 Effect of Administration of Bomixiao Vaginal Suppository on blood hematology indexes in rabbits after drug withdrawal for 4

表3 婦糜康陰道栓浸膏粉陰道給藥6個月對家兔血液生化指標的影響Table 3 Effect of Administration of Bomixiao Vaginal Suppository on blood biochemical indexes in rabbits after six

表4 婦糜康陰道栓浸膏粉陰道給藥停藥4周后對家兔血液生化學的影響Table 4 Effect of Administration of Bomixiao Vaginal Suppository on blood biochemical indexes in rabbits after drug withdrawal for 4

3 討論

長期毒性試驗是指試驗動物連續多日接觸較大劑量的藥物所引起的中毒效應。它是藥物非臨床安全性研究的有機組成部分，是藥物非臨床毒理學研究中綜合性最強、獲得信息最多和對臨床指導意義最大的一項毒理學研究，而血液學和血液生化檢測是長期毒性試驗重要的檢測指標之一，對于判定毒性的劑量和靶器官都有重要意義[8-9]。

本課題組前期進行了婦糜康陰道栓的急性毒性實驗研究，未測得LD50，最大耐受量(MTD)8.568 g生藥/kg，相當于擬臨床日用量的60倍。為進一步探討婦糜康陰道栓的安全性，本文考察了婦糜康陰道栓長期給藥對家兔血液學及血液生化學的影響。按照《中藥、天然藥物長期毒性研究技術指導原則》[1]，本實驗設低、中、高(0.952 g/kg、2.856 g/kg、8.586 g/kg)3個劑量組，分別相當于人臨床擬用量的6倍、20倍和60倍。給藥6個月及停藥4周后，各給藥組受試動物一般行為狀態及體質量增長與賦形劑對照組相比差異無顯著性(P>0.05)，婦糜康陰道栓浸膏粉高劑量組(8.568 g/kg)受試家兔比賦形劑對照組家兔的紅細胞數、血紅蛋白含量及紅細胞壓積增加(P<0.05)，停藥4周后，恢復正常。說明婦糜康陰道栓浸膏粉高劑量組對受試家兔組紅細胞數、血紅蛋白含量及紅細胞壓積的影響是可逆的，至于高劑量組為何引起這3個指標變化，還有待今后進一步研究。。給藥6個月及恢復4周后，各給藥組受試家兔血液生化學指標與賦形劑對照組比差異均無顯著性(P>0.05)。

綜上所述，家兔陰道給予婦糜康陰道栓浸膏粉2.856 g/kg，相當于臨床擬用量的20倍，對家兔血液學及血液生理生化指標沒有影響。提示婦糜康陰道栓家兔陰道給藥安全劑量應低于2.865 g/kg。