46%硝磺·異甲·莠可分散油懸浮劑的高效液相色譜分析

郭菲菲

（天津綠源生物藥業有限公司，天津300270）

硝磺草酮是一種能夠抑制羥基苯基丙酮酸酯雙氧化酶(HPPD)的芽前和苗后廣譜選擇性除草劑，可有效防治主要的闊葉草和一些禾本科雜草。其分析條件可以采用液相色譜分析[1]。異丙甲草胺是一種廣譜性播后苗前除草劑。可有效的防除一年生禾本科雜草及部分雙子葉雜草。其分析條件可以采用液相色譜分析。莠去津是玉米田中使用多年的三氯苯類除草劑，可防除多種一年生闊葉雜草[2]。其分析條件可以采用液相色譜分析。硝磺草酮、異丙甲草胺和莠去津復配制劑防效明顯高于單劑，可有效防治玉米田中一年生闊葉雜草雜草和禾本科雜草，具有速度快、殺草譜廣等特點[2]，目前關于46%硝磺·異甲·莠可分散油懸浮劑產品的高效液相色譜的分析方法還未見文獻報道。本文采用高效液相色譜法對其進行分析，方法操作簡便、分析速度快，精密度和準確度均符合分析要求，可以滿足常規分析和生產中的質量控制。

1 試驗部分

1.1 試劑和儀器

乙腈：色譜級；冰乙酸：分析純；水：新蒸二次蒸餾水；硝磺草酮標準品：已知含量≥95.0%，沈陽化工研究院；異丙甲草胺標準品：已知含量≥96.0%，上海農藥研究所；莠去津標準品：已知含量≥97.0%，北京勤誠亦信科技開發有限公司。

高效液相色譜儀（P-1010）：具有可變波長紫外檢測器；色譜數據處理機；色譜柱：250 mm×4.6 mm（i.d.）不銹鋼；內裝C18、5μm填充物，超聲波清洗器；分析天平（梅特勒ME204E）；過濾器：為0.45μm；微量注射器：50μL；定量進樣器：20μL。

1.2 色譜操作條件

流動相為（乙腈）：（水）：（冰乙酸）=60：40：0.1經濾膜過濾，并進行脫氣；流速：0.8 mL/min；柱溫：室溫；檢測波長：208 nm；進樣體積：20 μL；保留時間：硝磺草酮約為3.8 min，莠去津約為6.2 min，異丙甲草胺約為13.8 min。硝磺草酮、莠去津和異丙甲草胺的高效液相色譜圖見圖1、2。外標法計算。

1.3 測定步驟

1.3.1 標樣溶液的配制

a）準確稱取硝磺草酮標樣0.06 g（精確至0.0002 g）置于100 mL容量瓶中，用流動相溶解并稀釋至刻度，搖勻備用。

b）莠去津標樣0.1 g（精確至0.0002 g），異丙甲草胺標樣0.1 g（精確至0.0002 g），置于50 mL容量瓶中，用流動相溶解并稀釋至刻度，搖勻。用移液管各移取上述兩種溶液5mL置于另一個50mL容量瓶中，用流動相稀釋至刻度，搖勻。進樣前用0.45μm過濾器過濾。

圖1 硝磺草酮、莠去津和異丙甲草胺標樣高效液相色譜圖

圖2 46%硝磺·異甲·莠可分散油懸浮劑的典型高效液相色譜圖

1.3.2 試樣溶液的制備

準確稱取試樣約0.5 g（精確至0.0002 g），置于50mL容量瓶中，用流動相溶解并稀釋至刻度，搖勻。用移液管移取此溶液5mL置于另一個50mL容量瓶中，用流動相稀釋至刻度，搖勻。進樣前用0.45μm過濾器過濾。

1.3.3 測定

在上述操作條件下，待儀器基線穩定后，連續注入數針標樣溶液，計算各針相對響應值的重復性，待相鄰兩針的相對響應值變化不大于1.5%時，按照標樣溶液、試樣溶液、試樣溶液、標樣溶液的順序測定。

1.3.4 計算

試樣中莠去津或異丙甲草胺的質量分數w1（%）計算，硝磺草酮的質量分數w2（%）計算：

式中：

A1——標樣溶液中異丙甲草胺（或莠去津）的峰面積的平均值；

A2——試樣溶液中異丙甲草胺（或莠去津）的峰面積的平均值；

A3——標樣溶液中硝磺草酮峰面積的平均值；

A4——試樣溶液中硝磺草酮峰面積的平均值；

m1——標樣的質量，單位為g；

m2——試樣的質量，單位為g；

w——標樣中硝磺草酮（或異丙甲草胺或莠去津）的質量分數，以%表示；

2 結果與討論

2.1 流動相比例的選擇

為了實現硝磺草酮、莠去津、異丙甲草胺的有效分離，先后試驗了（乙腈）：（水）：（冰乙酸）=60：40：0.1、（乙腈）：（水）：（冰乙酸）=80：20：0.1、（甲醇）：（水）：（冰乙酸）=60：40：0.1的多種流動相配比進行反復試驗，最后確定（乙腈）：（水）：（冰乙酸）=60：40：0.1、為試驗的流動相。硝磺草酮、莠去津和異丙甲草胺分離效果好，峰型對稱，保留時間適中，可以滿足分析要求[3]。

2.2 波長的選擇

在190～310nm波長范圍內對試樣進行紫外掃描，發現208nm作為檢測波長時，硝磺草酮、莠去津和異丙甲草胺具有較強吸收，最終選擇208nm作為檢測波長[3]。

2.3 方法的線性關系測定

圖3 46%硝磺·異甲·莠可分散油懸浮濟中硝磺草酮線性關系曲線

線性關系是稱取不同量的標樣（5組）稀釋至相同的體積進行分析，得到響應值，以質量濃度為橫坐標，與其相應的峰面積為縱坐標，繪制線性關系曲線（見圖3、4、5）。得到硝磺草酮在0.63～5.47mg/50 mL的質量濃度內有良好的線性關系，其回歸方程為y=5.4131x-0.1817，R2=0.9999；莠去津在2.15～17.90 mg/50 mL的質量濃度內有良好的線性關系，其回歸方程為y=6.4982x-0.7514，R2=0.9999；異丙甲草胺在2.08～18.12 mg/50 mL的質量濃度內有良好的線性關系，其回歸方程為y=1.6316x-0.1066，R2=0.9998[4]。

圖4 46%硝磺·異甲·莠可分散油懸浮濟中莠去津線性關系曲線

圖5 46%硝磺·異甲·莠可分散油懸浮濟中異丙草胺線性關系曲線

2.4 方法精密度測定

選取一批46%硝磺·異甲·莠可分散油懸浮劑樣品，從稱樣開始，按上述色譜操作條件獨立平行測定8次，考察方法的精密度（見表1）3種成分的變異系數分別為1.44,0.83,0.83，可見該方法精密度較好。

2.5 方法準確度測定

稱取5個已知質量分數的46%硝磺·異甲·莠可分散油懸浮劑試樣，分別加入一定量的硝磺草酮、異丙甲草胺和莠去津標準品，按上述色譜操作條件的分析方法分別測定其中的硝磺草酮、異丙甲草胺和莠去津質量并計算回收率，試驗數據見表2、3、4。

3 結論

通過實驗表明：本方法可以同時測定46%硝磺·異甲·莠可分散油懸浮劑的3種有效成分，方法操作簡單、快速、分離效果好，精密度和準確度高，符合定量分析要求，可以滿足生產企業中的質量控制分析。

表1 46%硝磺·異甲·莠可分散油懸浮劑有效成分測定方法精密度試驗數據

表2 46%硝磺·異甲·莠可分散油懸浮劑中硝磺草酮測定方法準確度試驗數據（硝磺草酮標樣質量分數98.6%，試樣中硝磺草酮質量分數6.2%）

表3 46%硝磺·異甲·莠可分散油懸浮劑中異丙甲草胺測定方法準確度試驗數據（異丙甲草胺標樣質量分數98.8%，試樣中異丙甲草胺質量分數20.1%)

表4 46%硝磺·異甲·莠可分散油懸浮劑中莠去津測定方法準確度試驗數據（莠去津標樣質量分數98.5%，試樣中莠去津質量分數20.2%）