miRNA-210-3p對缺氧誘導(dǎo)海馬神經(jīng)細胞HT22凋亡的影響

丁 娜，黃 月，田 龍

1)鄭州人民醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科 鄭州 450003 2)河南省人民醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科 鄭州 450003

缺血誘發(fā)的腦組織功能損傷是臨床上常見的病理過程，腦缺血能夠誘發(fā)神經(jīng)功能障礙，而神經(jīng)細胞凋亡是神經(jīng)功能障礙發(fā)生的重要原因之一[1]。miRNA是一種非編碼的小RNA，在人體的多種組織中均有表達，不僅參與調(diào)控正常細胞的生理功能，還參與多種疾病的發(fā)生[2-3]。miRNA-210-3p在阿爾茨海默病、腫瘤、缺氧腦水腫等疾病中均有重要作用，還能夠調(diào)控細胞凋亡等；大鼠腦組織缺氧缺血后miRNA-210-3p表達下調(diào)，miRNA-210-3p過表達可以減輕缺氧缺血誘發(fā)的腦組織水腫程度；過表達miRNA-210-3p具有抗神經(jīng)細胞凋亡的作用[4-7]。本實驗通過體外構(gòu)建缺氧海馬神經(jīng)元HT22細胞損傷模型，探討miRNA-210-3p對缺氧條件下海馬神經(jīng)細胞凋亡的影響及機制，為明確腦缺氧神經(jīng)損傷發(fā)生機制及miRNA-210-3p在海馬神經(jīng)元損傷中的作用提供參考。

1 材料與方法

1.1細胞及主要試劑海馬神經(jīng)元HT22細胞購自湖南豐暉生物科技有限公司，以含有100 U/mL青霉素、100 mg/L鏈霉素的高糖DMEM培養(yǎng)液培養(yǎng)，同時在培養(yǎng)液中添加體積分數(shù)10%的胎牛血清，置于37 ℃、體積分數(shù)5% CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。活化型Caspase-3(Cleaved Caspase-3)抗體購自美國BD公司；miRNA-210-3p模擬物和陰性對照模擬物購自美國Cellecta公司；超氧化物歧化酶(SOD)活性檢測試劑盒、谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-Px)活性檢測試劑盒和丙二醛(MDA)含量檢測試劑盒均購自南京建成生物研究所；活化型Caspase-9(Cleaved Caspase-9)抗體購自美國Abbkine公司；所用引物均由生工生物工程(上海)股份有限公司合成；cDNA合成試劑盒購自寶生物工程(大連)有限公司。……