脊柱結核不同技術與病理標本結核分枝桿菌培養及藥敏試驗對比

梁利斌

[摘要] 目的 比較研究脊柱結核BacT/ALERT3D法、改良羅氏培養法等不同技術與病理標本膿液、病灶壁等結核分枝桿菌培養及藥敏試驗結果，探討應用價值較高的技術和標本。 方法 2016年2月—2018年2月期間，方便選擇該院脊柱結核患者的病理標本作為資料，共96例，包含膿液、病灶壁，并進行結核分枝桿菌培養，分別采用BacT/ALERT3D法、改良羅氏培養法，并針對培養陽性細菌進行藥敏試驗，分析不同培養方法、不同病理組織標本的陽性率，并進行比較。結果 在BacT/ALERT3D法中，病理標本病灶壁培養結果陽性率45.09%顯著高于膿液陽性率28.98%（χ2=16.41，P<0.05），在改良羅氏培養法中，病理標本病灶壁培養結果陽性率31.27%顯著高于膿液陽性率16.24%（χ2=18.55，P<0.05），即不同病理標本培養結果均存在差異，且均以病灶壁陽性率最高（P<0.05）。 結論 與改良羅氏培養法相比，BacT/ALERT3D法檢出率更高，利于結核病的早期診治，其中病灶壁標本培養陽性率更高，應用價值相對更高，值得推廣應用。

[關鍵詞] 脊柱結核;病理標本;結核分枝桿菌;BacT/ALERT3D法、改良羅氏培養法

[中圖分類號] R5? ? ? ? ? [文獻標識碼] A? ? ? ? ? [文章編號] 1674-0742（2019）01（a）-0026-03

當前對結核病診斷以結核分枝桿菌培養為主，但脊柱結核病理標本行結核分枝桿菌培養陽性率存在差異，因此需加強對最佳結果脊柱結核病理標本的研究，常見的脊柱結核病理標本包含膿液、肉芽組織及病灶壁[1]。此外不同結合桿菌培養方法也屬于影響陽性率的因素，如BacT/ALERT3D法、改良羅氏培養法的結果存在一定的差異，也需進行比較研究[2]。為此，該次研究對脊柱結核不同技術與病理標本結核分枝桿菌培養及藥敏試驗結果進行了探討，以2016年2月—2018年2月期間收治的96例為對象，報道如下。

1? 資料與方法

1.1? 一般資料

方便選擇該院行不同手術方式獲取的脊柱結核患者的病理標本作為資料，共96例，均經臨床、影像學、組織病理學及實驗室相關檢查確診。96例患者中男性52例，女性44例，年齡在15～72歲之間，平均年齡為（38.61±2.45）歲，包含頸椎結核3例，胸椎結核34例，胸腰段結核26例，腰椎結核17例，腰骶部結核16例。患者均知情且同意，研究經過倫理委員會批準。

1.2? 方法

96例患者采用不同手術方式獲取標本，采用無菌注射液吸取膿液，骨刀切取骨病灶，置于無菌平皿密封。

BacT/ALERT3D法：采用油酸、甘油、紫色燃料及1%牛血清蛋白組成10 mL復合溶液，在處理培養瓶中加入0.5 mL抗生素，接種經中和或離心沉淀后標本0.5 mL，經掃描確認后，置入BacT/ALERT3D全自動分支桿菌培養儀中，由儀器自動監測，提示陽性后取出，陰性在儀器報告陰性后取出。改良羅氏培養法嚴格依據《結核病診斷細菌學檢驗規程》[3]操作。

將培養結果陽性的病灶組織依據《結核分枝桿菌藥物敏感試驗標準化操作程序及質量保證手冊》[4]進行操作。

1.3? 統計方法

采用SPSS 20.0 統計學軟件進行數據處理分析，計量數據采用平均數±標準差（x±s）表示，進行t檢驗，計數資料采用[n（%）]表示，進行χ2檢驗，P<0.05為差異有統計學意義。

2? 結果

2.1? 不同培養方法檢出陽性率比較

BacT/ALERT3D法檢出陽性率36.50%顯著高于改良羅氏培養法23.26%（χ2=24.67，P<0.05）。

2.2? 不同病理標本培養結果分析

在BacT/ALERT3D法中，病理標本病灶壁培養結果陽性率45.09%顯著高于膿液陽性率28.98%，在改良羅氏培養法中，病理標本病灶壁培養結果陽性率31.27%顯著高于膿液陽性率16.24%，即不同病理標本培養結果均存在差異，且均以病灶壁陽性率最高（P<0.05）。

3? 討論

目前在脊柱結核診斷中可采用BacT/ALERT3D法和改良羅氏培養法進行結核分枝桿菌培養，其中羅氏培養法培養基含有谷氨酸鈉，可為細菌提供多種營養物質，且具有毒性低，補充無機鹽等優勢，利于細菌的生長，可為大多數分支桿菌提供良好的環境[5-6]。改良羅氏培養法將丙酮酸鈉代替丙三醇，進一步促進牛分至桿菌和非洲分至桿菌的生長，利于進一步提高標本陽性率[7]。BacT/ALERT3D法屬于全自動非放射性的快速細菌培養系統，培養基中含有肉湯、油酸、甘油等成分，且其將牛血清代謝結合游離脂肪酸，起到保護結核分至桿菌的作用[8]。BacT/ALERT3D法主要是利用二氧化碳比色對結核分枝桿菌的生長情況進行顯示，當分支桿菌生長時，二氧化碳滲透至感應器，并改變感應器的酸堿度值，顏色會由深綠色變為黃色，且可實現自動連續檢測[9]。該次研究結果顯示BacT/ALERT3D法檢出陽性率36.50%顯著高于改良羅氏培養法23.26%（P<0.05）;表明BacT/ALERT3D法檢出檢出價值更高，與改良羅氏培養法易受到標本采集、保存條件及實驗操作等因素影響相比，其具有操作簡單、結果準確等優勢，利于為結核病的早期診治提供可靠依據。脊柱結核存在菌量多、毒力強等特征，會表現出漿液性或漿液纖維蛋白性炎，并經過一系列病理變化形成結核性肉芽及干酪樣壞死物，伴隨大量的結核桿菌。該次研究結果顯示在BacT/ALERT3D法中，病理標該病灶壁培養結果陽性率45.09%顯著高于膿液陽性率28.98%（χ2=16.41，P<0.05），在改良羅氏培養法中，病理標本病灶壁培養結果陽性率31.27%顯著高于膿液陽性率16.24%（χ2=18.55， P<0.05），即不同病理標本培養結果均存在差異，且均以病灶壁陽性率最高（P<0.05），表明膿液是壞死組織，里面的結核桿菌較少，而病灶壁則具有一定的優勢。與孫宇航等[12]《脊柱結核不同技術與病理標本結核分枝桿菌培養及藥敏試驗的比較》結果，Bac T/ALERT 3D法和改良羅氏培養法培養結核分枝桿菌的陽性率分別為32.82%和20.99%。兩者比較差異有統計學意義（P<0.05）;Bac T/ALERT3D法中膿液、肉芽組織、病灶壁3種標本的陽性率分別為34.17%、23.08%、15.58%，差異有統計學意義（P<0.05）;改良羅氏培養法中上述3種標本的陽性率分別為26.13%、12.43%、5.84%，差異有統計學意義（P<0.05）”基本一致。

綜上所述，為實現結核病的早期應選擇病灶壁標本培養，并采用BacT/ALERT3D法，具有陽性率高的優勢，值得推廣。

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（收稿日期：2018-10-13）