一種茶樹害蟲新記錄
——蕾宙尺蛾

王志博，姜 楠，殷坤山，唐美君，李 紅，肖 強*

（1.中國農業科學院 茶葉研究所，農業農村部茶葉質量安全控制重點實驗室，浙江 杭州 310008；2.中國科學院 動物研究所 動物進化與系統學院重點實驗室，北京 100101）

蕾宙尺蛾Coremecis leukohyperythra(Wehrli,1925)又名蕾佧尺蛾，屬鱗翅目（Lepidoptera）、尺蛾科（Geometridae）、灰尺蛾亞科（Ennominae）、宙尺蛾屬（Coremecis），分布于我國浙江、湖南、福建、廣東、江西等省（區）[1-2]，目前尚無寄主信息記錄。2018年5月，筆者在中國農業科學院茶葉研究所（浙江杭州）茶園中調查時發現了一種取食茶樹葉片的尺蠖幼蟲。室內飼養后，經形態學和分子生物學鑒定為蕾宙尺蛾（Coremecis leukohyperythra），是茶樹害蟲新紀錄[3-6]。本研究進一步觀察描述了形態及生物學特征，以期為田間防治工作奠定基礎。

1 材料與方法

1.1 供試蟲源

供試蟲源分別于5月和7月從浙江省杭州市中國農業科學院茶葉研究所茶園采集，置于室內養蟲籠中用茶樹嫩葉飼養至化蛹、羽化。飼養條件：溫度（25±1）℃，光周期為13 h/11 h（L/D）；相對濕度為75%～80%[7]。成蟲展翅制作成干制針插標本保存在中國農業科學院茶葉研究所標本室。成蟲分別檢視了中國科學院動物研究所動物標本館以及德國波恩動物學博物館的標本。

1.2 形態特征觀察

1.2.1 形態學觀察

田間采集的幼蟲進行室內飼養，使用Olympus SZ11 解剖鏡觀察幼蟲、蛹及成蟲的形態特征并進行記錄描述。

1.2.2 外生殖器解剖

成蟲外生殖器解剖方法參照姜楠[1]的方法。成蟲生殖器玻片使用OLYMPUS 顯微成像系統進行拍照。成蟲外生殖器結構術語參照《中國動物志》[8]。

1.3 生物學特性觀察

室內飼養觀察幼蟲取食為害茶葉特點，記錄發生時間及歷期。

1.4 DNA 條形碼鑒定

1.4.1 DNA 提取及CO Ⅰ基因擴增

飼養羽化的成蟲，取中足和后足各一個作為供試樣品編號為la151，通過測定線粒體細胞色素氧化酶亞基Ⅰ（CO Ⅰ）序列進行DNA 條形碼鑒定。具體方法如下，使用天根試劑盒提取基因組DNA, 擴增及測序使用的引物為LepF1（5'-ATTCAACCAATCATAAAGATATT GG-3'）和Enh_LepR1（5'-CTCCWCCAGCAGG ATCAAAA-3'）。PCR使用浙江擎科生物公司的MIX試劑，PCR 反應條件為 95℃預變性2 min；95℃變性30 s，46℃退火1 min，72℃延伸30 s，5個循環；95℃變性30 s，51℃退火1 min，72℃延伸30 s，35個循環，最后72℃終延伸10 min。PCR 產物用1%的瓊脂糖凝膠檢測，之后由尚亞公司的ABI 3730 測序儀進行雙向測序[9]。

1.4.2 序列分析和聚類樹構建

通過軟件Seqman 5.01（DNASTAR，Inc.1996）進行雙向測序結果的拼接。獲得長度為636 bp 的DNA 條形碼序列。將序列在GenBank數據庫中進行 BLAST 序列比對，根據序列一致性確定對應的物種。進一步選取其他茶樹尺蛾類害蟲序列使用Clustal 1.83 軟件進行序列比對[10]。使用MEGA 5.0 軟件基于K2P 模型（Kimura-2-parameter distance）計算種間遺傳距離。使用MEGA 5.0 軟件基于K2P 模型構建 NJ 樹[9]。

2 結果與分析

2.1 形態特征

成蟲：雄蟲前翅長16～20 mm，雌蟲前翅長20～22 mm。翅面淺褐色；外線外側顏色略深。前翅內線為黑色雙線，向內傾斜，僅下半段清楚；中點淺灰色，模糊；外線黑色，弱鋸齒狀，在M 脈間向外凸出；亞緣線灰白色，鋸齒狀；亞緣線與外線之間在M 3 和CuA 2 之間具1 黑褐色斑；緣線在脈間呈黑褐色短條狀；緣毛褐色摻雜黑褐色。后翅基部黑色；中線黑色，平直；外線黑色，弱鋸齒狀；亞緣線會白色，后半部分較清楚且內側具深色帶；其余斑紋與前翅相似。雌蟲翅面斑紋與雄蟲區別：前翅內線近弧形；前翅外線內側和后翅中線內側顏色淺；前翅頂角和亞緣線外側在CuA1 和CuA2 之間具灰白色斑（圖1A，圖1B）。

雄性外生殖器：鉤形突半圓形，端部中央具1 細突；顎形突中突發達，近三角形；抱器瓣端部窄且鈍圓；抱器背近中部向外凸出；抱器腹端部骨化條僅端半部具短刺，基部不具指狀突。陽端基環基半部半圓形，端半部窄；囊端部圓；陽莖后半端形成1 對端部漸細的骨化突；角狀器為1 橢圓形刺狀斑（圖1C）。

雌性外生殖器：前陰片為長三角形；后陰片近方形，長度較前陰片短；囊導管短，具骨環；囊體長，后端弱骨化；囊片新月狀。（圖1D）。

幼蟲：老熟幼蟲體長23～25 mm，頭頂平，尾端也較平，著生灰白色短毛。體土黃色，胸節背面中央各有兩條小縱紋，腹部各節背面有大的菱形斑塊，以前面三節上的較明顯，后漸模糊；各節有兩對黑點，其中后面一對較大而明顯，兩點間相距稍遠（圖2A、圖2B）。

蛹：長10～14mm，赭褐色，形狀與茶尺蠖蛹相似（圖2C、圖2D）。

2.2 生活史及習性

蕾宙尺蛾以何蟲態越冬不詳。在浙江杭州，每年4月中、下旬第1 代幼蟲發生，5月中、下旬化蛹，5月下旬至6月上旬成蟲羽化。第2、3 代幼蟲分別發生在6月中旬和7月下旬。據推算，一年可發生4、5 代。低齡幼蟲取食嫩葉，成長后取食成葉和老葉，一般分布在茶叢上層。幼蟲老熟后在茶叢根際附近淺土中作一土室，化蛹于其中。

2.3 分子鑒定

將測序結果上傳GenBank 數據庫進行BLAST 比對。結果顯示，該蟲與數據庫中蕾宙尺蛾（Coremecis leukohyperythra）的CO I 基因（GenBank: KX951551.1）序列相似度高達100%。參考張漢鵠[10]茶樹尺蛾類害蟲名錄結合NCBI數據庫已有序列，篩選20種茶樹尺蛾類害蟲進行系統發育樹分析（表1）。結果顯示，實驗 樣 品la151 與Coremecis leukohyperythra聚類在一起（圖3），兩者遺傳距離為0。DNA barcoing 技術鑒定結果支持實驗樣品為蕾宙尺蛾（Coremecis leukohyperythra）。

圖1 蕾宙尺蛾成蟲及外生殖器形態特征Fig.1 The morphological characters of adult and genitalia of Coremecis leukohyperythra

圖2 蕾宙尺蛾幼蟲及蛹形態特征Fig.2 The morphological characters of adult and genitalia

表1 系統發育樹中尺蛾科茶樹害蟲名稱及CO I 基因GenBank 登錄號Table 1 Name and GenBank number of Geometrid moth tea pest in phylogenetic tree

3 討論

宙尺蛾屬（Coremecis）全世界共有6種，主要分布在中國、印度及東南亞等地區[1,11-12]。其中有兩個種分布在中國，分別為黑斑宙尺蛾（Coremecis nigrovittata）(Moore, 1868) 和蕾宙尺蛾（Coremecis leukohyperythra）。蕾宙尺蛾分布范圍比黑斑宙尺蛾要小，僅分布中國的浙江、湖南、廣東、福建等地區；而黑斑宙尺蛾除了中國湖南、湖北、福建、廣東、云南和西藏等省區外，在印度、尼泊爾、泰國和越南也有分布[1]。目前，黑斑宙尺蛾并無寄主記錄，按照其分布及與蕾宙尺蛾的親緣關系推測，黑斑宙尺蛾存在為茶樹害蟲的可能性，仍需進一步研究驗證。

在此之前，蕾宙尺蛾的寄主和食性尚無記錄。本研究明確了蕾宙尺蛾為一種茶樹害蟲，主要通過幼蟲取食茶樹葉片進行為害。該尺蛾分布的四個省均為我國主要的產茶區，因此，應該引起茶樹植保工作者的關注。

圖3 基于CO I 序列和K2P 模型構建的NJ 樹Fig.3 Neighbour-Joining (NJ) tree based on CO I sequences and Kimura-2-parameter model with bootstrap percentages shown on the clades