忌酸顆粒的藥效學實驗研究

馬旭冉，王彥禮，劉佳星，宋紅新，楊偉鵬

(中國中醫(yī)科學院中藥研究所，北京 100700)

稽延性戒斷癥狀是毒品急性戒斷綜合征階段之后，持續(xù)存在且強度較弱的一組綜合征。在經(jīng)過急性戒斷綜合征的治療后，患者的神經(jīng)生理功能仍未復原，尚處于再調整階段，如不進行藥物干預或治療，稽延性戒斷癥狀很難自行消除。稽延性戒斷癥狀是導致復吸的主要原因之一[1]。忌酸丸記載于清代醫(yī)家何書田著《救迷良方》[2]，經(jīng)現(xiàn)代考證，忌酸丸組成為東洋參15 g，炒白術9 g，白當歸7.5 g，真川柏12 g，川黃連12 g，炙甘草9 g，廣陳皮7.5 g，生柴胡10.5 g，明天麻9 g，廣木香7.5 g，炙黃芪9 g，綠升麻0.5 g，沉水香7.5 g，生附子2.1 g，鴉片膏16.8 g組成，各藥以面糊為丸服用，具有溫補脾腎，益氣升陽，滋陰平肝，制癮戒毒的功效。

忌酸顆粒是根據(jù)戒毒古方忌酸丸進行組方優(yōu)化而成，在忌酸丸原方基礎上，去鴉片膏，用西洋參等量替代東洋參，加洋金花0.5 g,酸棗仁12 g,延胡索12 g，制成顆粒制劑后，成人日用量為生藥27 g/天，用于治療阿片類毒品急性戒斷之后稽延性癥狀的治療，本研究通過鎮(zhèn)痛、鎮(zhèn)靜、抗疲勞等試驗來考察忌酸顆粒的藥效作用。

1 實驗材料

1.1 動物

KM小鼠，SPF級，中國人民解放軍軍事醫(yī)學科學院實驗動物中心提供，許可證號SCXK(軍)2012-0004。

1.2 藥品及試劑

忌酸顆粒，由中國中醫(yī)科學院中藥研究所中藥制劑研究中心提供；阿司匹林，sigma進口分裝，批號20120928001；戊巴比妥鈉，北京化學試劑公司，批號020919；佐匹克隆片，北京益民藥業(yè)有限公司，批號20140810；人參皂苷片，吉林省白山市茂竹保健品有限責任公司，批號20170501；鹽酸小檗堿，廣西天天樂藥業(yè)股份有限公司，批號170902；冰醋酸，國藥集團化學試劑有限公司，批號20140829。

1.3 儀器

HH-1恒溫水浴鍋，常州國華電器有限公司；YLS-1A多功能小鼠自主活動記錄儀，濟南益延科技發(fā)展有限公司。

2 實驗方法與結果

2.1 小鼠熱刺激甩尾實驗

KM小鼠50只，體質量18～20 g，雄性，按體質量隨機分為5組，對照組、陽性藥阿司匹林組、忌酸顆粒高、中、低劑量組(20、10、5 g/kg)，每組10只，測定各組小鼠痛閾(小鼠自尾尖浸入50℃溫水中至尾部甩起的時間，以下稱甩尾潛伏期)，忌酸顆粒各劑量組連續(xù)給藥3 d，對照組給同體積蒸餾水，阿司匹林100 mg/kg(實驗當日給1次)，末次給藥后1 h，以50℃溫水浸燙鼠尾2 cm，分別記錄給藥30 min、60 min、120 min、240 min、360 min后5個時間點入水至甩尾出水的潛伏期[3]，進行組間t檢驗。

結果顯示，忌酸顆粒各劑量組在30 min～360 min各時間點均能明顯提高小鼠痛閾，與對照組相比有顯著性差異。結果見表1。

表1 忌酸顆粒對小鼠熱刺激甩尾的影響

注：與對照組相比，*P<0.05，**P<0.01

2.2 小鼠醋酸扭體實驗

KM小鼠50只，體質量18～20 g，雄性，按體質量隨機分為5組，對照組、陽性藥阿司匹林組、忌酸顆粒高、中、低劑量組(20、10、5 g/kg)，每組10只，忌酸顆粒各劑量組連續(xù)給藥3 d，對照組給同體積蒸餾水，阿司匹林100 mg/kg(實驗當日給1次)，末次給藥后1 h，腹腔注射0.6%醋酸溶液0.2 mL/只，觀察給醋酸后15 min內出現(xiàn)的扭體反應(腹部內凹、伸展后肢、臀部抬高)，記錄扭體次數(shù)和第一次扭體的時間[3]，進行組間t檢驗。

結果顯示，忌酸顆粒各劑量組均能減少醋酸所致小鼠扭體次數(shù)，延長扭體潛伏期，其中高劑量組與對照組相比有顯著性差異。結果見表2。

表2 忌酸顆粒組合物對小鼠醋酸所致扭體的影響

注：與對照組相比，*P<0.05，**P<0.01

2.3 小鼠自主活動實驗

KM小鼠50只，體質量18～20 g，雄性，按體質量隨機分為5組，對照組、陽性藥佐匹克隆組、忌酸顆粒高、中、低劑量組(20、10、5 g/kg)，每組10只，忌酸顆粒各劑量組連續(xù)給藥3 d，對照組給同體積蒸餾水，佐匹克隆片100 mg/kg(實驗當日給1次)，末次給藥后1 h，將小鼠放入自主活動箱內，適應3 min，分別測定5 min和10 min內活動次數(shù)[4]，進行組間t檢驗。

結果顯示，忌酸顆粒各劑量組均能減少小鼠5 min和10 min的自主活動次數(shù)，但與對照組相比，無統(tǒng)計學意義。結果見表3。

表3 忌酸顆粒對小鼠自主活動的影響

2.4 小鼠戊巴比妥鈉協(xié)同睡眠實驗

KM小鼠50只，體質量18～20 g，雄性，按體質量隨機分為5組，對照組、陽性藥佐匹克隆片組、忌酸顆粒高、中、低劑量組(20、10、5 g/kg)，每組10只，忌酸顆粒各劑量組連續(xù)給藥3天，對照組給同體積蒸餾水，佐匹克隆片100 mg/kg(實驗當日給1次)，末次給藥后1 h，ip戊巴比妥鈉50 mg/kg，以翻正反射消失為入睡時間，從翻正反射消失至恢復為睡眠持續(xù)時間并記錄[3]，進行組間t檢驗。

結果顯示，忌酸顆粒各劑量組對于睡眠潛伏期無明顯影響，但各劑量組均能明顯延長睡眠時間，與對照組相比具有顯著性差異。結果見表4。

表4 忌酸顆粒對小鼠戊巴比妥鈉協(xié)同睡眠的影響

注：與對照組相比，*P<0.05，**P<0.01

2.5 小鼠游泳實驗

KM小鼠50只，體質量18～20 g，雄性，按體質量隨機分為5組，對照組、陽性藥人參皂苷片組、忌酸顆粒高、中、低劑量組(20、10、5 g/kg)，每組10只，忌酸顆粒各劑量組連續(xù)給藥5 d，對照組給同體積蒸餾水，人參皂苷片2 g/kg(實驗當日給1次)，末次給藥后30 min后將小鼠放入容器內游泳，水深20 cm，水溫20℃左右，尾部負重2 g，當小鼠頭部沉入水中10 s不能浮起者即為體力耗竭，計時為游泳時間[5]，進行組間t檢驗。

結果顯示，忌酸顆粒各劑量組可延長負重小鼠的游泳時間，其中低劑量組與對照組相比具有顯著性差異。結果見表5。

表5 忌酸顆粒對小鼠負重游泳的影響

注：與對照組相比，*P<0.05，**P<0.01

2.6 止瀉實驗

KM小鼠50只，體質量18～20 g，雄性，按體質量隨機分為5組，對照組、陽性藥鹽酸小檗堿組、忌酸顆粒高、中、低劑量組(20、10、5 g/kg)，每組10只，用0.3 g/mL的番瀉葉煎劑給小鼠灌胃，每次0.5 mL/只，連續(xù)6 d，各組同時給藥，對照組給同體積蒸餾水，鹽酸小檗堿30 mg/kg，末次給藥后，小鼠單籠飼養(yǎng)，籠下鋪置濾紙，每1 h換濾紙1次。連續(xù)觀察5 h，統(tǒng)計數(shù)據(jù)計算小鼠腹瀉指數(shù)[3]。

腹瀉指數(shù)=稀便率 ×稀便級

稀便率=每只動物的稀便次數(shù)/大便的總次數(shù)(稀便以濾紙上有無污跡為標準)

稀便級根據(jù)濾紙上污跡范圍的大小分為4級：1級：污跡直徑<1 cm；2級：污跡直徑<1～1.9 cm；3級：污跡直徑<2～3 cm；4級：污跡直徑>3 cm。

統(tǒng)計時先逐個統(tǒng)計每堆稀便的級數(shù)，然后將該鼠所有稀便級數(shù)相加除以稀便次數(shù)得稀便的平均級數(shù)。

結果顯示，忌酸顆粒各劑量組在2～4 h內能降低小鼠的腹瀉指數(shù)，與模型組相比具有顯著性差異(中、低劑量組4 h除外，無統(tǒng)計學意義)。見表6。

表6 忌酸顆粒對番瀉葉致瀉小鼠腹瀉指數(shù)的影響

注：與模型組相比，*P<0.05，**P<0.01

3 討論

海洛因依賴者稽延性戒斷癥狀主要表現(xiàn)在三個方面：一是睡眠障礙，包括入睡難、易醒、早醒；二是軀體癥狀，包括肌肉關節(jié)疼痛、全身難受、四肢不適、全身乏力；三是焦慮情緒，包括心慌、煩躁不安、納差等[6]。

忌酸丸原方用于久吸阿片成癮之脾腎不足，氣虛陽陷，而見倦怠乏力，食少嘔惡，大便溏瀉，萎黃羸瘦，心煩頭痛，周身痠疼，頭暈目眩，盜汗遺精，脈虛無力者，符合稽延性癥狀的各個癥候群的表現(xiàn)。綜觀忌酸顆粒的組方配伍，實以附子補火助陽、溫運脾土、行經(jīng)止痛，通行十二經(jīng)脈，黃芪補中益氣、升陽舉陷，合用溫補脾腎，益氣升陽，先天后天并調為主藥。白術健脾益氣，柴胡、升麻升舉陽氣；木香行氣止痛、健脾消食；陳皮燥濕健脾、調中快膈，均可增強主藥健脾升陽，理氣和胃，快膈消食之功，共固中州之本，同為輔藥。當歸、黃連、黃柏養(yǎng)血滋陰、清熱瀉火、涼血除蒸，既可泄妄動之相火，以止夢遺滑精，又合附子以陰合陽，陰陽并調，且可抑附子辛熱溫燥之毒性；元胡活血行氣止痛、酸棗仁養(yǎng)心安神、天麻平肝潛陽，以制陰虛陽亢、風陽上擾之勢，平眩止暈、共為佐藥。甘草消解煙毒、調和藥性為使藥。洋金花以制癮志、止諸痛。諸藥合用，共奏溫補脾腎，益氣升陽，滋陰平肝，制癮戒毒之效。本方寒熱并用，陰陽氣血并調，攻補兼施，扶正戒毒，相行不悖，實為戒斷之妙方也。

本研究針對稽延性癥狀的不同表現(xiàn)，通過鎮(zhèn)靜、鎮(zhèn)痛、抗疲勞、止瀉等實驗來驗證忌酸丸制劑的藥效，結果顯示，忌酸丸制劑具有較好的鎮(zhèn)痛和鎮(zhèn)靜作用，具有一定的抗疲勞和止瀉作用。對于稽延性癥狀所表現(xiàn)的睡眠障礙、軀體疼痛、乏力以及泄瀉等均有較好的治療作用。