宮頸組織中P-Akt的表達(dá)與HPV感染的相關(guān)性研究

周莉 秦娟 陸安偉

(貴陽市婦幼保健院，貴州 貴陽 550001)

宮頸癌發(fā)病率很高，給病人生命帶去嚴(yán)重威脅，其成為目前少數(shù)可經(jīng)早期篩查的一種惡性腫瘤。宮頸癌在臨床上是一種常見的婦科惡性腫瘤，為患者的生命安全造成直接威脅。相關(guān)研究顯示：晚期宮頸癌患者的發(fā)生率有一定下降趨勢，晚期宮頸癌患者與癌前病變的發(fā)生率呈上升的發(fā)展趨勢。宮頸患者容易出現(xiàn)合并HPV感染的情況，宮頸炎合并人乳頭瘤病毒(HPV)感染是引發(fā)宮頸癌變的獨(dú)立危險(xiǎn)因素，而及時(shí)有效的診治方案以消除HPV感染是保證患者健康的關(guān)鍵。本次研究中，隨機(jī)納入本院20例宮頸癌和30例慢性宮頸炎患者作為觀察對象，患者入院接受診治的時(shí)間段為2015年1月至2018年1月，通過對比分析來探究宮頸組織中P-Akt的表達(dá)與HPV感染的相關(guān)性。報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1一般資料 本次實(shí)驗(yàn)研究中，隨機(jī)納入本院20例宮頸癌和30例慢性宮頸炎患者作為觀察對象，患者入院接受診治的時(shí)間段為2015年1月至2018年1月，根據(jù)患者的病理類型進(jìn)行分組，宮頸癌患者為觀察組(n=20)，慢性宮頸炎患者為對照組(n=30)。觀察組中，年齡最小的24歲，年齡最大的68歲，平均(45.2±5.56)歲；最短病程3個(gè)月，最長病程2年，平均病程(1.06±0.26)年。對照組中，年齡最小的23歲，年齡最大的66歲，平均(45.1±6.21)歲；最短病程5個(gè)月，最長病程2年，平均病程(1.26±0.35)年。兩組患者平均病程等基本資料的對比差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，實(shí)驗(yàn)可行。

1.2方法 取兩組患者的宮頸組織，采用免疫組化SP法來進(jìn)行檢測并采用PCR技術(shù)檢測HPV感染情況。免疫組化SP：烤片，68 ℃，20分鐘，常規(guī)二甲苯脫蠟，梯度酒精脫水；二甲苯Ⅰ 20 min二甲苯Ⅱ 20 min～100%酒精Ⅰ 10 min～100% Ⅱ 10 min-95% 5 min-～80% 5 min～70% 5 min；滅活內(nèi)源性過氧化物酶：3%H2O237 ℃孵育10 min，PBS沖洗3X 5 min；使用DAB/ H2O2反應(yīng)染色，觀察P-Akt的表達(dá)情況。PCR檢測：所有標(biāo)本接受病毒核酸檢測，遵循試劑盒說明執(zhí)行RNA提取與反莊體系，運(yùn)用SDS軟件操作實(shí)時(shí)熒光PCR系統(tǒng)，設(shè)立陽性與陰性對照，反應(yīng)程序分為以下：(1)5個(gè)循環(huán)：50 ℃定為30 min、95 ℃定為3 min、95 ℃定為15 s、50 ℃定為30 min、72 ℃定為1 min；(2)40個(gè)循環(huán)：95 ℃定為10 s、55 ℃定為40 s。設(shè)定熒光素為FAM，當(dāng)55 ℃時(shí)，收集熒光信號，觀察P-Akt的表達(dá)情況。觀察指標(biāo)：(1)觀察宮頸癌和宮頸炎患者的P-Akt的表達(dá)情況，(2)觀察對比P-Akt在HPV陽性與陰性中的表達(dá)情況。

2 結(jié) 果

2.1宮頸癌與慢性宮頸炎患者的P-Akt的表達(dá)率比較 觀察組中，P-Akt的表達(dá)率為90.0%(18/20)，對照組患者的P-Akt的表達(dá)率為20.0%(6/30)觀察組患者的P-Akt表達(dá)率明顯高于對照組，組間比較的結(jié)果差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=12.3654；P<0.05)。

2.2HPV陽性與HPV陰性患者的P-Akt的表達(dá)率比較 經(jīng)檢測，HPV陽性患者30例，P-Akt的表達(dá)率為80.0%(24/30)，HPV陰性患者20例，P-Akt的表達(dá)率為15.0%(3/20)，HPV陽性患者的P-Akt表達(dá)率要顯著高于陰性患者，二者之間進(jìn)行比較的差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=10.2658；P<0.05)。

表1 兩組的P-Akt表達(dá)

注：與對照組比較*P<0.05

3 討 論

近年來，宮頸病變組織的檢驗(yàn)受到越來越多的關(guān)注，由于自身生理因素的影響，女性其宮頸黏膜多呈皺襞狀，如果有病原體侵入皺壁裝粘膜，將會增加疾病根治的難度，導(dǎo)致病情遷延難愈，從而誘發(fā)慢性的宮頸炎癥疾病。這種疾病具有諸多致病因素，多由于手術(shù)操作、分娩等因素對女性宮頸造成損傷，而傷口極易被葡萄球菌、鏈球菌等諸多細(xì)菌侵襲，從而誘發(fā)感染。近年來眾多醫(yī)學(xué)研究表明，宮頸疾病與HPV存在密切的關(guān)系。HPV感染屬于臨床上比較常見的傳染性疾病，而HPV病毒具有很高的特異性，導(dǎo)致這類病毒對于人體上皮黏膜感染的病程較長，且在人體中具有較長時(shí)間的潛伏期，如果女性免疫力下降，將會引發(fā)諸多類型婦科疾病。本次研究中，隨機(jī)納入本院20例宮頸癌和30例慢性宮頸炎患者作為觀察對象，通過對比分析來探究宮頸組織中P-Akt的表達(dá)與HPV感染的相關(guān)性，結(jié)合實(shí)驗(yàn)觀察的結(jié)果，宮頸癌患者的P-Akt表達(dá)率明顯高于宮頸炎患者，組間比較的結(jié)果，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；同時(shí)，HPV陽性患者的P-Akt表達(dá)率要顯著高于陰性患者，二者之間進(jìn)行比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。

綜上所述，P-Akt的表達(dá)與HPV感染有著密切關(guān)系，HPV感染者的P-Akt表達(dá)率更高，并且宮頸癌患者的P-Akt表達(dá)率顯著高于宮頸炎患者，P-Akt表達(dá)在宮頸癌發(fā)展中起著重要作用。