氯苯胺靈原藥高效液相色譜分析方法研究

(國家危險化學品質量監督檢驗中心，四川成都，610021)

氯苯胺靈 (中文別名：3-氯氨基甲酸異丙基酯；間氯苯氨基甲酸異丙酯，分子式：C10H12ClNO2分子量：213.66)，純品為晶體，具有輕微的特殊氣味，熔點41°C，25°C時蒸氣壓0.000173mmHg。25℃時在水中的溶解度為89mg/L，在石油中熔解度中等(在煤油中l0%)，可與低級醇、芳烴和大多數有機溶劑混溶。氯苯胺靈是除草劑也是植物生長調節劑，氯苯胺靈用作一種高度選擇性苗前或苗后早期除草劑，藥劑被禾本科雜草芽鞘吸收，以植物的根部吸收為主，也可被葉片吸收，在體內向上、向下雙向傳導，作為植物生長調節劑用來抑制馬鈴薯發芽等。

隨著氯苯胺靈的日益推廣，急需研究出一種簡便、快速、分離效果好的分析方法，筆者經過大量實驗后，采用反相高效液相色譜法分離，外標法測定氯苯胺靈原藥含量，滿足企業的產品質量控制，檢測效率高，結果重現性好，是理想的檢驗方法。

1 實驗部分

1.1 試劑和溶液

標準品：99.0%；甲醇：(色譜純，美國Mreda Technologyinc Inc)；水：(二次蒸餾水，自制)。

1.2 儀器

Agilent1260：(具有二極管陣列紫外檢測器和自動進樣器，安捷倫)；色譜柱：(150mm×4.6mm(i.d.)不銹鋼柱，內裝ZORBAXC18、5μm填充物，安捷倫)。

1.3 操作條件

流動相：ψ(甲醇：水)=80：20(V：V)；流速：1.0mL/min；柱溫：30℃±1℃；檢測波長：235nm；進樣體積：20μL；保留時間：約3.5min。

典型的氯苯胺靈原藥液相色譜圖(見圖1)。

圖1 氯苯胺靈原藥液相色譜圖

1.4 測定步驟

1.4.1 標樣溶液的制備

稱取0.05g(精確至0.0002g)氯苯胺靈標準品，置于50mL容量瓶中，用甲醇溶解，稀釋到刻度，吸5mL于50mL容量瓶中，用甲醇溶解，稀釋到刻度,冷卻，備用。

1.4.2 試樣溶液的制備

稱取約含0.05g(精確至0.0002g)氯苯胺靈原藥的樣品，置于50mL容量瓶中，用甲醇溶解，稀釋到刻度，吸5mL于50mL容量瓶中，用甲醇溶解，稀釋到刻度,冷卻，備用。

1.4.3 測定

在上述操作條件下，儀器穩定后，連續進入氯苯胺靈標品溶液，至相鄰2針氯苯胺靈標品溶液的峰面積相對變化<1.0%后，按照標樣、試樣、試樣和標樣的順序測定。

1.5 計算

樣品中氯苯胺靈的質量分數x(%)，按下式計算：

式中：A1——標樣溶液中，氯苯胺靈峰面積的平均值；

A2——試樣溶液中，氯苯胺靈峰面積的平均值；

m1——標樣的質量，單位為克(g)；

m2——試樣的質量，單位為克(g)；

ω——標準品中氯苯胺靈的質量分數，以%表示。

2 結果和討論

2.1 吸收波長的選擇

利用通過Agilent1260高效液相色譜儀二極管陣列檢測器進行掃描，得到氯苯胺靈原藥紫外波長掃描圖(圖2)。從圖2中可以看到氯苯胺靈最大吸收波長在235nm附近，此處溶劑干擾較小，因此將檢測波長定為235nm。

2.2 流動相和溶劑的選擇

一般情況下，水和與水互溶的有機溶劑是反相液相色譜的流動相的最佳選擇。通常，大多數的樣品都可以用一定比例的甲醇和水作為流動相來分離，甲醇和水都經濟便宜、且環境污染較小，毒性相對低。筆者以不同的比例進行比較，當甲醇+水=80+20時，基線穩定，樣品分離快、效果好，最終選定甲醇+水=80+20為流動相。

圖2 氯苯胺靈原藥紫外波長掃描圖

由于氯苯胺靈能和大多數有機溶劑混溶，選擇了三種不同溶劑進行比較：甲醇，乙腈，流動相。從峰的面積和分離度及拖尾因子和環保因素考慮，最終選定甲醇為溶劑。

2.3 線性相關性

稱取0.01g、0.02g、0.05g、0.08g、0.10g標準品按本方法1.4.1進行處理后測定，以氯苯胺靈峰面積為縱坐標，氯苯胺靈濃度為橫坐標繪制標準曲線，得線性回歸方程為y = 217731x + 13.973，其線性相關系數R2為0.9999。見圖3。

圖3 線性關系圖

2.4 精密度

對同一氯苯胺靈原藥樣品在該液相色譜條件下，5次重復測定，測得變異系數為0.24%。見表1。

表1 氯苯胺靈精密度試驗

2.5 回收率

已知含量的原藥樣品按1.4.2

處理，稀釋成相同濃度的5份，分別添加質量為0.8 、2.0 、4.0 、6.0 、8.0mg氯苯胺靈的標準品，按上述方法測定標準品的含量，計算得回收率在98.2%～101.6%之間。

3 結論

綜上所述，該方法測定氯苯胺靈原藥的含量，具有操作簡便、快捷的優點，并且重現性、穩定性、分離效果都好，能滿足氯苯胺靈原藥的檢驗要求，是一種較為理想的檢測方法。