2型糖尿病患者血清脂聯(lián)素與氧化應(yīng)激的相關(guān)性研究

王妹 盛春君 程曉蕓 吳國亭 倪秀石*

2型糖尿病（T2DM）是一種以胰島素抵抗或胰島素敏感性下降為主要特征的內(nèi)分泌代謝性疾病，2013年我國的患病率為10.4%［1］。脂肪組織為活性內(nèi)分泌器官［2］，能分泌多種細(xì)胞因子，如脂聯(lián)素（APN）、瘦素、內(nèi)脂素［3］等。研究顯示T2DM患者血清APN水平下降。作者通過檢測正常人、肥胖和非肥胖T2DM患者的血清APN、8-異前列腺素F2a（8-iso-PGF2a）、hs-CRP、測定各組丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽過氧化物酶（GSH-PX）、空腹血糖、胰島素、血脂等指標(biāo)，并進(jìn)行相關(guān)分析，探討肥胖和非肥胖T2DM患者中脂聯(lián)素與氧化應(yīng)激的關(guān)系。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 選擇2005年12月至2006年5月同濟(jì)大學(xué)附屬第十人民醫(yī)院內(nèi)分泌科住院新診斷的2型糖尿病患者57例（糖尿病組），均符合WHO（1999年）糖尿病診斷標(biāo)準(zhǔn)，男26例，女31例；平均年齡（51.8±10.7）歲。所有患者未使用他汀類藥物、噻唑烷二酮類藥物等抗氧化劑，排除糖尿病急性并發(fā)癥和其他內(nèi)分泌疾病，如甲狀腺功能異常、腎上腺皮質(zhì)功能異常，及排除肝腎功能不全、感染、腫瘤、結(jié)締組織疾病、高血壓、心肌梗死、心力衰竭、腦梗死、腦出血急性期、應(yīng)激狀態(tài)、妊娠、哺乳、長期服用避孕藥等。健康對照組25例，選擇同期年齡、性別匹配的門診體檢者，并根據(jù)美國糖尿病學(xué)會（ADA）空腹血糖受損（IFG）的診斷切割點(diǎn)，剔除FPG≥5.6mmol/L。病例和對照的選擇均遵照隨機(jī)單盲的原則。所有患者均記錄性別、年齡；測量身高、體重，并計(jì)算體重指數(shù)（BMI）=體重（kg）/身高（m）2；體脂百分比（BF%）：男性=1.2×體重（kg）/身高（m）2+0.23×年齡-16.2，女性=1.2×體重（kg）/身高（m）2+0.23×年齡-5.4；測量血壓記錄基礎(chǔ)收縮壓（SBP）、舒張壓（DBP）。

1.2 方法 常規(guī)檢查空腹血清葡萄糖（FPG）、甘油三酯（TG）、總膽固醇（TCH）、高密度脂蛋白膽固醇（HDL-C），及低密度脂蛋白膽固醇（LDL-C），使用日立7170A全自動生化儀測定。APN采用ELISA法（美國AssayPro公司），MDA采用硫代巴比妥酸法，SOD采用黃嘌呤氧化酶法測定，GSH-PX采用化學(xué)比色法，后三者均由南京建成生物工程研究所提供。血清8-iso-PGF2a采用ELISA法測定。依據(jù)亞太地區(qū)2000年的肥胖標(biāo)準(zhǔn)，根據(jù)BMI將糖尿病組分為非肥胖糖尿病組（BMI＜25kg/m2）28例和肥胖糖尿病組（BMI＞25kg/m2）29 例。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS13.0統(tǒng)計(jì)軟件。計(jì)量資料以（±s）表示，APN、MDA、8-iso-PGF2a呈偏態(tài)分布，經(jīng)對數(shù)轉(zhuǎn)換后進(jìn)行統(tǒng)計(jì)。各組間比較用方差分析（ANOVA），組間兩兩比較用LSD法檢驗(yàn)，并行相關(guān)性分析及多元線性回歸分析。以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 各組臨床監(jiān)測指標(biāo)比較 見表1。

表1 各組臨床監(jiān)測指標(biāo)比較（±s）

表1 各組臨床監(jiān)測指標(biāo)比較（±s）

注： 與正常對照組比較，*P＜0.01，與2型糖尿病非肥胖組比較，△P＜0.05，△△P＜0.01

組別（group） 肥胖糖尿病組 非肥胖糖尿病組 對照組FPG（mmol/L） 10.91±3.55* 10.65±3.49* 4.40±0.29 TG（mmol/L） 2.41±0.35* 2.28±0.40* 1.48±0.43 TCH（mmol/L） 4.84±1.08 4.87±1.20 4.82±0.65 HDL-C（mmol/L） 1.17±0.20*△ 1.28±0.23* 2.21±0.11 LDL-C（mmol/L） 2.25±0.71 2.51±0.65 2.35±0.59 APN（mg/L） 5.80±1.05* 6.45±1.87* 9.07±1.27 Ln-APN 1.74±0.19* 1.82±0.32* 2.20±0.13 MDA（nmol/L） 6.86±1.54*△△ 5.54±1.42* 3.77±0.85 SOD（U/ml） 70.20±10.64*△△ 81.29±8.56 85.81±7.23 GSH-PX（活力單位） 71.37±6.52*△△ 80.34±8.91 82.19±7.75 hs-CRP（mg/L） 7.18±2.98* 6.34±2.21* 4.29±0.96 8-iso-PGF2a（ng/L） 39.72±6.92*△△ 30.26±6.22* 18.02±5.12 Ln_8-iso-PGF2a 3.67±0.19*△△ 3.39±0.20* 2.85±0.28

2.2 血清APN與氧化應(yīng)激指標(biāo)及其它變量間的相關(guān)分析 血清APN與BMI、BF%TG、MDA、8-iso-PGF2a呈顯著負(fù)相關(guān)，與HDL-C、SOD、GSH-PX顯著正相關(guān)。偏相關(guān)分析表明，血清APN與HDL-C、APN、MDA、8-iso-PGF2a、SOD、GSH-PX顯著相關(guān)，見表2。

表2 血清脂聯(lián)素水平與各變量間的相關(guān)分析

2.3 血清APN與其它變量間的多元逐步回歸分析 以血清脂聯(lián)素水平（Y）為因變量，以體重指數(shù)（X1）、體脂百分比（X2）、空腹血清葡萄糖（X3）、HOMAIR（X4）、甘油三酯（X5）、HDL-C（X6）、hs-CRP（X7）、MDA（X8）、8-iso-PGF2a（X9）、SOD（X10）、GSHPX（X11）為自變量進(jìn)行多元逐步回歸分析，HDL-C、hs-CRP 、GSH-PX進(jìn)入回歸方程（進(jìn)入水平0.05，剔除水平0.10），得回歸方程：Y=1.299+0.301×X6-（-0.180×X7）+0.006×X11。校正后的回歸系數(shù)為R2=0.490（P＜0.001），見表 3。

表3 以脂聯(lián)素為應(yīng)變量的多元回歸分析

3 討論

本資料顯示，肥胖糖尿病和非肥胖糖尿病組空腹APN均比對照組顯著降低，MDA和8-iso-PGF2a均顯著升高；肥胖糖尿病組SOD、GSH-PX活力均顯著低于正常對照組和非肥胖糖尿病組。血清APN與MDA、8-iso-PGF2a呈顯著負(fù)相關(guān)，與SOD、GSH-PX等呈顯著正相關(guān)。

大量研究表明，APN水平與T2DM和妊娠期糖尿病有關(guān)，甚至APN可作為T2DM臨床診斷的指標(biāo)［4-5］，本資料進(jìn)一步提示肥胖與非肥胖T2DM均與APN相關(guān)。T2DM與抗氧化劑和自由基之間的平衡失調(diào)有關(guān)。糖尿病患者葡萄糖和糖化蛋白的自氧化可產(chǎn)生氧自由基；高血糖狀態(tài)葡萄糖可使SOD發(fā)生非酶糖基化，使該酶活性降低，從而使氧自由基代謝活躍［6］。MDA是脂質(zhì)過氧化產(chǎn)物，是評價(jià)人體氧化應(yīng)激最常用的指標(biāo)，8-iso-PGF2a也是體內(nèi)脂質(zhì)過氧化物較敏感的指標(biāo)。SOD、GSH-PX能清除超氧陰離子保護(hù)細(xì)胞免受損傷，其對機(jī)體氧化與抗氧化的平衡起著重要的作用。本資料顯示，血清MDA、8-iso-PGF2a在糖尿病組顯著高于對照組，糖尿病肥胖組顯著高于非肥胖組，兩兩比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；SOD，GSH-PX在糖尿病組低于對照組，糖尿病肥胖組顯著低于非肥胖組，兩兩比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。提示2型糖尿病患者機(jī)體清除自由基能力降低，脂質(zhì)過氧化增加，表明糖尿病肥胖組患者氧化應(yīng)激更明顯。

本資料顯示，糖尿病組空腹血清脂聯(lián)素濃度與血清8-iso-PGF2a、MDA負(fù)相關(guān)，與SOD、GSH-PX正相關(guān)，經(jīng)校正體重指數(shù)體脂影響后上述幾種相關(guān)性仍存在，且以脂聯(lián)素為應(yīng)變量的多元回歸分析得出其中GSH-PX與脂聯(lián)素相關(guān)最密切。另外肥胖糖尿病組和非肥胖糖尿病組中APN與氧化應(yīng)激的相關(guān)性，發(fā)現(xiàn)非肥胖組APN仍與GSH-PX顯著相關(guān)，而與其他指標(biāo)的相關(guān)程度明顯下降，甚至在肥胖組未發(fā)現(xiàn)脂聯(lián)素水平與氧化應(yīng)激指標(biāo)等變量間的相關(guān)性。分析原因，可能與各組的樣本例數(shù)有關(guān)，有待增加樣本含量以證實(shí)脂聯(lián)素與氧化應(yīng)激指標(biāo)之間的相關(guān)性。關(guān)于氧化應(yīng)激抑制APN機(jī)制方面，目前認(rèn)為脂肪細(xì)胞對氧化應(yīng)激很敏感，ROS能夠直接抑制APN基因的表達(dá)，H2O2能導(dǎo)致APN mRNA表達(dá)下降。但ROS和H2O2抑制脂聯(lián)素mRNA表達(dá)的分子機(jī)制有待進(jìn)一步證實(shí)，可能存在APN基因轉(zhuǎn)錄減少或APN mRNA降解增加。

綜上所述，T2DM患者APN水平顯著降低，機(jī)體清除自由基能力降低，脂質(zhì)過氧化增加，且提示APN與氧化應(yīng)激相關(guān)，兩者關(guān)系機(jī)制及何為因果關(guān)系目前未闡明，有待今后進(jìn)一步的臨床和基礎(chǔ)研究去證實(shí)。