頂空固相微萃取氣質聯用法分析保心寧片中揮發性成分

鄭月，徐建，許艷茹，石菊，趙俞，李芳，任曉楠，張顯濤，唐紀琳※

（1.中國科學院長春應用化學研究所，長春 130022；2.吉林修正藥業新藥開發有限公司吉林省中藥標準化關鍵工程技術重點實驗室，長春 130012；3.修正藥業集團股份有限公司，吉林 通化 134000；4.長春高新制藥有限公司，長春 130012）

保心寧片主要由丹參、枳殼、當歸和三七等4 味中藥組成，具有活血化瘀、行氣止痛等作用，常用于治療冠心病、心絞痛、心律失常等疾病[1]。保心寧片通過增加冠狀動脈血流量、改善心肌缺血、增加心肌供氧量而起作用[2]。頂空固相微萃取和氣相色譜-質譜聯用技術廣泛應用于中藥揮發性成分的定性研究，具有精確度高、簡便快捷、對環境友好等特點[3]。目前，未見有關保心寧片揮發性成分研究的報道。為進一步提高對其藥效物質基礎的認識，本實驗采用頂空固相微萃取和氣相色譜-質譜聯用技術對保心寧片中揮發性成分進行分析鑒定。

1 儀器

5975-6890N 型氣相色譜-質譜聯用儀（美國Agilent 公司，）；100 μm 聚二甲基硅氧烷（PDMS）萃取纖維頭、手動固相微萃取（SPME）進樣器裝置（美國Supelco 公司）；ALC-210.2 型電子天平（德國Sartorius 公司）。

2 方法

2.1 樣品處理

取保心寧片適量，除去包衣，于干燥研缽中研細。精密稱取2 g 置于20 mL 固相微萃取專用頂空瓶中，用PDMS-100μm 固相微萃取針在60 ℃下萃取60 min[4]，插入氣相色譜儀進樣口進樣，解析溫度260 ℃，解析時間2 min[5-6]。

2.2 分析條件

氣相色譜條件：色譜柱：19091j-433 型彈性石英毛細管（30.0 m×0.25 mm，0.25m）；載氣：高純度氦氣（99.99%）；進樣：不分流進樣；進樣口溫度：260 ℃；程序升溫：初始溫度60 ℃（3 min），10 ℃/min 升至280 ℃，保持12 min；溶劑延遲3 min；倍增器電壓：1541 eV[7]。

質譜條件：離子源：電子轟擊離子源（EI）；離子源電壓：70 eV；離子源溫度：230 ℃；掃描范圍（m/z）：20～500。

2.3 數據處理

將收集的保心寧片中揮發性成分同標準譜庫（NIST2008）[8]進行對比，采用正向和反向2 種匹配方式進行定性分析，要求2 種方式定性匹配度均大于880。在相同色譜條件下，利用正構烷烴（C8～C22）計算保留指數（RI），采用面積歸一化法計算化合物的相對含量，利用外標法對主要化合物進行定量分析。

3 結果

共鑒定出揮發性成分36 種，占揮發性成分總量的79.74%。鑒定出揮發性成分中含有酚類化合物2 種（27.09%）、酮類化合物10 種（23.84%）、醛類化合物1種（10.27%）、烴類化合物9 種（6.29%）、酸類化合物3種（5.02%）、醇類化合物5 種（3.41%）、酯類化合物2 種（0.85%）、其他類化合物4 種（2.97%）。見圖1、表1。

表1 保心寧片揮發性成分的化學成分及其相對含量Table 1 The chemical composition and relative content of the volatile components of Baoxining tablet

續表1

續表1

4 討論

對保心寧揮發性成分分析中發現，相對含量較高的成分為匙葉桉油烯醇（2.14%）、1-苯基-1-戊酮（2.21%）、1（-2-呋喃）-乙酮（2.23%）、乙基苯丙酮（4.28%）、苯甲酸（4.53%）、3-亞丁基-1（3H）-異苯并呋喃酮（9.22%）、5-甲基呋喃甲醛（10.27%）和2-烯丙基-4-甲酚（25.8%），總量超過總組分含量的60%。可見保心寧揮發性成分主要為酮類，醛類，酚類等化合物。

在已經鑒定出的保心寧片的揮發性成分中，根據相關參考文獻報道，正十六烷、十七烷、十六烷酸乙酯為丹參揮發油的主要成分[9]；反式芳樟醇氧化物、右旋檸檬烯為枳殼揮發油的主要成分[10]-蓽澄茄油烯-依蘭油烯、辛酸和匙葉桉油烯醇為三七揮發油的主要成分[11]；右旋檸檬烯、辛酸、匙葉桉油烯醇、正十六烷-依蘭油烯、十七烷為當歸揮發油的主要成分[12]。

本研究分析了保心寧揮發性成分的化學組成及相對含量，基本明確了保心寧片揮發性成分的特征和結構類型，從揮發性成分的角度深入了解保心寧片的藥效物質基礎，為其臨床應用提供了科學依據。