乙酰螺旋霉素糖衣片含量測定方法探討

潘揚

摘 要：本實驗對乙酰螺旋霉素糖衣片含量測定方法進行研究。方法：采用奧泰公司 C18 色譜柱（218 mm×4.6mm，5μm），乙腈一0.1mol/L醋酸銨溶液（用冰醋酸調PH值7.3）（60：40），檢測波長為232nm，流速為1.0ml/min，柱溫為30℃。乙酰螺旋霉平均回收率分別為99.3%。結論：本法簡便、準確，可用于乙酰螺旋霉素糖衣片中乙酰螺旋霉的含量測定。

關鍵詞：乙酰螺旋霉素糖衣片；含量；測定

乙酰螺旋霉素為螺旋霉素的乙酰化衍生物，屬16元環大環內酯類。乙酰螺旋霉素為單乙酰螺旋霉素Ⅱ、單乙酰螺旋霉素Ⅲ、雙乙酰螺旋霉素Ⅱ和雙乙酰螺旋霉素Ⅲ四個組分為主的混合物。乙酰螺旋霉素片，適應癥為適用于敏感葡萄球菌、鏈球菌屬和肺炎鏈球菌所致的輕、中度感染，可用于隱孢子蟲病、或作為治療妊娠期婦女弓形體病的選用藥物。乙酰螺旋霉素常用于治療孕期弓形蟲感染、牙周炎、急性支氣管炎、慢性支氣管炎急性發作、肺炎、年人牙周炎、小兒急性化膿性扁桃體炎、小兒呼吸道感染等[1-6]。糖衣片可令片劑美觀、還能掩蓋中藥的不良氣味，從而使得病人樂于服用。本實驗采用高效液相色譜法對乙酰螺旋霉素糖衣片中的乙酰螺旋霉的進行了含量測定。

1 儀器與試藥

1.1 儀器：iChrom 5100高效液相色譜儀（大連依利特分析儀器有限公司）；KQ5200B型超聲波清洗器（昆山市超聲儀器有限公司）；723PC掃描型可見分光光度計（上海虔鈞科學儀器有限公司）； JDS-2B 雙功能冷凍水浴恒溫振蕩器（常州金壇精達儀器制造有限公司）；Plus-E3超純水機實驗室級超純水機（南京易普易達科技發展有限公司）；分析天平（常州市幸運電子設備有限公司）；PC-220色譜柱恒溫箱（天津艾維歐科技發展有限公司）；SP-1920紫外可見分光光度計（上海光譜儀器有限公司）；SPR-BW200 液相色譜進樣瓶專用洗瓶機（北京銘成基業科技有限公司）；pH610 WIGGENS PH610 臺式酸度計（北京桑翌實驗儀器研究所）；；SYZ-A石英亞沸蒸餾器（常州迅生儀器有限公司）。

1.2 色譜柱：奧泰公司 C18 色譜柱（218 mm×4.6mm，5μm）。

1.3 對照品：乙酰螺旋霉 購自中國藥品生物制品檢定所。

1.4 試劑：甲醇（南京化學試劑股份有限公司）、醋酸銨（青島春宇化工有限公司）、乙腈（南京化學試劑股份有限公司）、磷酸（南京化學試劑股份有限公司）、冰醋酸（南京化學試劑股份有限公司）、磷酸二氫鉀（南京化學試劑股份有限公司）。

2 測定方法確定

2.1 色譜條件

依據查閱文獻及考查的結果，確定色譜條件如下。流動相：乙腈一0.1mol/L醋酸銨溶液（用冰醋酸調PH值7.3）（60：40），檢測波長：232nm，流速：1.0m·min-1。柱溫：30℃。理論板數按乙酰螺旋霉峰計算應不得低于2000。

2.2 對照品溶液的制備

精密稱取乙酰螺旋霉對照品適量，置容量瓶中，加流動相溶解并定量稀釋制成每lml中約含1mg的溶液，即得。

2.3 供試品溶液的制備

取乙酰螺旋霉素糖衣片，研碎，稱取，置具塞錐形瓶中，加入70%甲醇適量，密塞，超聲處理10分鐘，放冷，過濾，揮干70%甲醇提取液殘渣，加流動相溶解并定量稀釋制成每lml中約含lmg的溶液，搖勻，濾過。取續濾液，即得。

2.4 專屬性試驗

依照處方取乙酰螺旋霉素糖衣片輔料，按樣品制備工藝制成陰性對照樣品，依上述方法測定，結果在單乙酰螺旋霉素Ⅱ、單乙酰螺旋霉素Ⅲ、雙乙酰螺旋霉素Ⅱ和雙乙酰螺旋霉素Ⅲ出峰處陰性液無色譜峰，結果陰性試驗沒有干擾，表明本方法專屬性良好。

2.5 精密度試驗

精密稱取乙酰螺旋霉對照品溶液。照上述色譜條件，精密吸取10μl，連續進樣6次，記錄峰面積。結果單乙酰螺旋霉素Ⅱ、單乙酰螺旋霉素Ⅲ、雙乙酰螺旋霉素Ⅱ和雙乙酰螺旋霉素ⅢRSD分別為0.76%、0.81%、0.91%、0.85%，表明本方法精密度良好。

2.6 對照品的線性考察

精密稱取乙酰螺旋霉對照品溶液分別精密吸取2μL、4μL、6μL、8μL、10μL、12μL、14μL、16μL、18μL、20μL，注人液相色譜儀，依照2.1項下的色譜條件測定，記錄色譜峰。以峰面積（Y）為縱坐標，對照品進樣量（X）為橫坐標，繪制標準曲線。結果表明，乙酰螺旋霉單乙酰螺旋霉素Ⅱ、單乙酰螺旋霉素Ⅲ、雙乙酰螺旋霉素Ⅱ和雙乙酰螺旋霉素Ⅲ均呈良好的線性關系。

2.7 重現性試驗

稱取同一批的乙酰螺旋霉素糖衣片樣品6份，按測定方法項下的方法制備供試品溶液，測定含量，并計算樣品的RSD值，結果RSD為0.93%，結果表明此方法的重現性良好。

2.8 準確度試驗

精密稱取已知含量的樣品6份，分別加入一定量的乙酰螺旋霉對照品，上述方法進行測定，計算回收率，平均回收率為99.3%，RSD=0.81%。結果表明此方法的回收率良好。

3 討論

分別考察乙腈一0.085%磷酸溶液（10：90），乙腈一0.1mol/L醋酸銨溶液（用冰醋酸調PH值7.3）（50：50），水：乙腈：甲醇：冰醋酸（77∶10∶11∶2），乙腈：0.2%醋酸水溶液（15：85），乙腈一0.1mol/L醋酸銨溶液（用冰醋酸調PH值7.3）（60：40），乙腈一0.1mol/L醋酸銨溶液（用冰醋酸調PH值7.3）（40：60），乙腈-0.033 mol/L磷酸二氫鉀溶液（40：60）不同比例的流動相，結果以乙腈一0.1mol/L醋酸銨溶液（用冰醋酸調PH值7.3）（60：40）為流動相為流動相，供試品各峰分離效果最好，故選用乙腈一0.1mol/L醋酸銨溶液（用冰醋酸調PH值7.3）（60：40）為流動相。

參考文獻

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