幾種抗球蟲藥物對獺兔球蟲感染和幼兔生長性能的影響

蘭加花 福建省福安市潭頭鎮畜牧獸醫站 福建福安 355014

兔球蟲病是家兔最常見且危害最為嚴重的寄生蟲病之一，目前據國內外文獻報道已檢測出17種兔球蟲，其中包括16種艾美耳屬（Eimeria）和1種等孢屬（Isospora）球蟲[1-3]，除了斯氏艾美耳球蟲寄生肝臟膽管上皮細胞內，其余均寄生在腸上皮細胞內，多數為混合感染[4-5]，主要危害1～3月齡幼兔，60日齡內最為敏感，感染率高達90%以上，患病幼兔死亡率高達40%～70%，成年兔多為臨床型或帶蟲者[6]。如不及時防治，常常導致幼兔大批死亡，給養兔業帶來巨大的經濟損失。因此，應用抗兔球蟲藥對防?治兔球蟲病大面積的暴發具有重要意義。在獺兔抗球蟲藥物預防和臨床治療上，先后有開展過莫能菌素、鹽霉素、氯苯胍、地克珠利、磺胺六甲氧嘧啶、復方抗球散等試驗[7-9]。我們先期調查了福建省某獺兔場球蟲感染情況，40～65日齡幼兔感染率最高，達98%以上；檢出的球蟲種類有11種[10]；該場有些抗球蟲藥物使用效果不佳，幼兔球蟲病死亡率最高達27%。因此，選取妥曲珠利等抗球蟲藥，觀測抗球蟲感染的效果以及對獺兔幼兔生長的影響，為獺兔養殖場正確防控球蟲病提供參考依據。

1 材料與方法

1.1 試驗用動物及分組 選取福建省福安市某獺兔場母兔健康狀況良好、出生時間相近的斷乳幼兔210只，隨機分為7組，抗球蟲藥物為2.5%妥曲珠利、5%腸球雙效和5%優球樂，分為一次給藥組和二次給藥組，另設對照組。每組試驗幼兔死亡不補充、不寄養，按常規飼養和免疫。幼兔飼料采用臨沂市瑞泰飼料有限公司生產的兔用1號粒料，粗蛋白≥17%，斷乳后少量飼喂，逐漸加量，以15 min內吃完為標準，每天投喂量約為體重的4%～5%，分2次投喂。

1.2 試驗器材 電子稱，最大稱量20 kg（精確度0.01 g）；注射器（1 mL）；生物顯微鏡；麥克馬斯特計數板；飽和食鹽水等。

1.3 試驗藥物 2.5%妥曲珠利溶液，拜耳（四川）動物保健有限公司生產（批號：CN18887）；5%腸球雙效（有效成分為鹽酸氨丙啉+磺胺喹噁啉鈉），南京龍馬動物藥業有限公司生產（批號：20150123）；5%優球樂（有效成分為癸氧喹酯），廣州華農大實驗獸藥有限公司生產（批號：14060501）。

1.4 抗球蟲藥物試驗劑量、給藥及稱重、糞便采樣2.5%妥曲珠利、5%腸球雙效（鹽酸氨丙啉+胺喹噁啉鈉）、5%優求樂（癸氧喹酯）分別設2個試驗組（一組為一次給藥組，另一組為二次給藥組），對照組為生理鹽水組，每組30只幼兔。試驗幼兔在斷乳時進行分籠、稱重和標記。2.5%妥曲珠利組按有效劑量30 mg/kg體重，5%腸球雙效組和5%優球樂組按有效劑量50 mg/kg體重，分別用注射器經口灌服，對照組每只灌服1 mL生理鹽水；1周后，二次給藥組再分別按上述劑量灌服。定期測定各組獺兔從斷乳到用藥后第8周的體重。

定期采集各組獺兔從斷乳到用藥后第8周新鮮糞樣（每籠采集2份樣品，每份20 g左右），分別裝入干凈鏈封塑料袋，注明兔籠編號、日齡、用藥情況等，最后將所采集的新鮮樣品裝入放有冰袋的采樣箱中帶回實驗室鏡檢。

1.5 OPG值檢測 用電子稱（精確度0.01 g）稱取2 g糞樣置于l00 mL燒杯中，用長柄藥匙將糞便搗碎，先加入l0 mL飽和食鹽水，充分攪拌成糞漿，再加入飽和鹽水至60 mL，用玻璃棒混勻；先用80目金屬篩網過濾一次，再用120目金屬篩網過濾，即刻用膠頭滴管吸取濾液注入到麥克馬斯特氏計數板的2個計室內（避免產生氣泡），室溫下靜置2 min，然后在顯微鏡（×100）下檢查，計算左右2個刻度室的卵囊數（n1、n2），求得2個計室卵囊的平均數（單個該計數室的容積：1 cm×1 cm×0.15 cm=0.15 cm3），乘200即為每克糞樣中的卵囊數，即：OPG=（n1+n2）/2×200。

1.6 統計方法 用統計軟件SPSS 17.0的ANOVA模塊對不同藥物組的不同日齡獺兔體重、獺兔球蟲卵囊OPG值（原始數據對數化后）分別進行方差分析。

2 結果與分析

2.1 獺兔斷乳時球蟲感染情況 共采集福建省福安市某獺兔場母兔健康狀況良好、出生時間相近的斷乳幼兔糞樣1 980份，通過高倍顯微鏡下觀察孢子化的卵囊，根據其具體特征結合相關參考文獻鑒定卵囊種類，共檢測出穿孔艾美耳球蟲（Eimeria perforans）、小型艾美耳球蟲（E.exigu）、納格浦爾艾美耳球蟲（E.nagpurens）、松林艾美耳球蟲（E.matsubayashi）、盲腸艾美耳球蟲（E.coecicola）、維氏艾美耳球蟲（E.vejdovsky）、中型艾美耳球蟲（E.media）；兔艾美耳球蟲（E.lepori）、大型艾美耳球蟲（E.magna）、斯氏艾美耳球蟲（E.stieda）、腸艾美耳球蟲（E.intestinal）、長型艾美耳球蟲（E.elongat）、無殘艾美耳球蟲（E.irresidu）、黃艾美耳球蟲（E.flavescens）、新兔艾美耳球蟲（E.neotepor）、梨形艾美耳球蟲（E.piriformi）等16種艾美耳球蟲，其孢子化卵囊的形態、大小、結構與相關文獻描述一致；感染率達到100%，平均OPG值為4.98×104。

2.2 抗球蟲藥物對獺兔球蟲感染的影響

2.2.1 不同藥物作用下獺兔球蟲感染率 該獺兔場試驗幼兔在斷乳時的球蟲感染率為100%，用藥后第1周，2.5%妥曲珠利1次用藥組獺兔幼兔球蟲感染率降為86.77%，腸球雙效組與優球樂組的感染率仍為100%，比對照組（97.56%）高。用藥后第2周，妥曲珠利2次用藥組球蟲卵囊陽性率降至77.42%，顯著低于其他各組（P＜0.05）；用藥第3周后各組獺兔球蟲卵囊的陽性率出現升高趨勢；用藥后第8周，妥曲珠利組和優球樂2次用藥組球蟲卵囊陽性率低于其他組（見表1）。

2.2.2 妥曲珠利等抗球蟲藥物對獺兔幼兔球蟲感染強度的影響 獺兔各組試驗幼兔用藥前球蟲平均OPG值在46 833～57 933，差異不顯著（P＞0.05）。給藥后第1周，妥曲珠利組幼兔球蟲OPG值比用藥前減少了78.39%，下降幅度極顯著高于優球樂組（P＜0.01）；其2次用藥組獺兔在給藥后第2周球蟲OPG值比用藥前減少了88.35%，下降幅度極顯著高于其他藥物組和對照組（P＜0.01），此后均保持較低感染水平。說明妥曲珠利2次用藥對獺兔幼兔球蟲感染有較為穩定的抑制作用（見圖1）。用藥后第8周比用藥前減少了92.99%，下降幅度極顯著高于其他藥物組和對照組（P＜0.01）；自第8周起，各試驗組獺兔幼兔球蟲感染均轉歸為相對較低水平。

表1 不同藥物作用下獺兔球蟲感染率情況

2.3 妥曲珠利等抗球蟲藥物對獺兔幼兔生長的影響 測定獺兔幼兔口服不同抗球蟲藥物后的個體增重，結果顯示，幼兔用藥前各組間平均體重差異不顯著（P＞0.05），至用藥后第8周，2.5%妥曲珠利組獺兔平均增重顯著高于對照組（P＜0.05），料重比則顯著低于對照組和5%腸球雙效1次用藥組（P＜0.05），見表2。

3 討 論

大樣本調查結果顯示，該獺兔場兔球蟲多樣性豐富，有16種艾美爾球蟲，比此前調查增加5種[10]；感染比例最高的為穿孔艾美耳球蟲，與喬軍等[11]、宋鴻雁等[12]以及孟慶玲等[13]對兔球蟲的調查結果相同。

圖1 妥曲珠利等藥物對獺兔幼兔球蟲卵囊OPG值的影響

表2 試驗獺兔體平均增重情況

在獺兔不同生長階段，以40～65日齡幼兔球蟲感染率最高，接近100%；從感染率變化曲線看，哺乳仔兔球蟲感染率最低（19.23%），40日齡左右的斷乳仔兔球蟲感染率急劇升高到98.61%，此后仍可保持高感染率，150日齡左右成年兔和懷孕母兔的感染率下降至70%～80%。獺兔球蟲感染強度（OPG值)變化前期與感染率變化基本一致，亦為哺乳仔兔最低（OPG值：330），40～65日齡幼兔平均OPG值很快上升至5×104～6×104，80日齡后平均OPG值下降至1.5×104，150日齡后平均OPG值下降至1.64×103[9]。成年兔球蟲病多為亞臨床型或帶蟲者[14]，母兔的球蟲感染強度也不高，但可傳播球蟲卵囊使幼兔感染，導致兔球蟲病[15-16]，因此，獺兔幼兔球蟲病防控是獺兔場球蟲病防控的重點。

藥物防控仍是目前兔球蟲病防控的主要手段。聚醚類、喹啉類、嘧啶類、磺胺類、三嗪類、中草藥類等抗球蟲藥在兔球蟲病防控中均有應用，尤其在幼兔階段抗球蟲藥物基本上是必用藥物。在獺兔抗球蟲藥物預防和臨床治療方面先后進行過一些試驗，曾有報道在獺兔日糧中添加莫能菌素、鹽霉素、氯苯胍以及地克珠利均能很好地預防球蟲病的發生，其中在降低死亡率方面，鹽霉素最低、效果最好[7]；在交替使用抗球蟲藥物方面，有研究者在氯苯胍、地克珠利、磺胺六甲氧嘧啶、三字球蟲粉等抗球蟲藥物中選擇2～3種交替使用，抗球蟲感染效果好于使用單種藥物[8]。在中草藥應用方面，由白頭翁、常山、貫仲、大黃、苦參等10味中藥組成的復方抗球散試驗組球蟲卵囊減少率可達97.84%[9]；常山、蛇床子、大黃、苦楝皮、蒼術、使君子、苦參、玉片、地榆炭、白茅根、柴胡、黃連等中草藥煎劑與球蟲血痢散（主要成分為磺胺喹噁啉鈉）結合使用，防治獺兔球蟲病總有效率達97%[17]。

在該獺兔場使用過多種抗球蟲藥，檢測球蟲卵囊強度仍高居不下，幼兔常發球蟲病，說明該場兔球蟲對一些抗球蟲藥物產生耐藥性。妥曲珠利系新一代的抗球蟲藥，可阻斷球蟲整個生活周期，破壞球蟲細胞內有性生殖和無性生殖，降低球蟲卵囊排出，阻止球蟲病流行[18]。妥曲珠利在體內生物半衰期長，生物利用度高，不易產生耐藥性[19]。妥曲珠利口服溶液能夠有效用于雞、豬和兔球蟲病的治療，顯著降低球蟲病所導致的球蟲卵囊排出量[20-21]。妥曲珠利運用于兔球蟲病防治的研究較少，我們選擇該藥物觀察其對獺兔幼兔球蟲感染及生長性能的影響，以腸球雙效（有效成分為鹽酸氨丙啉和磺胺喹噁啉鈉）和優球樂（有效成分是癸氧喹酯）作參照藥物進行比較。以獺兔的球蟲卵囊陽性幼兔試驗，用藥后第1周、第2周和第8周妥曲珠利組獺兔幼兔球蟲平均OPG值分別下降了78.39%、88.35%和92.99%，下降幅度顯著高于其他藥物組和對照組（P＜0.01），死亡率也比對照組顯著下降。對于生長性能提高，累積到用藥第8周時才體現出來，有報道在13～14日齡肉仔雞飲水中按7 mg/kg體重添加妥曲珠利溶液，能夠顯著提高飼料轉化率和體重[20]；在3～6日齡哺乳仔豬口服5%妥曲珠利1.0 mL后，等孢球蟲OPG值和球蟲病的發生率下降，斷乳仔豬的生長率有所提高[21-22]。本試驗獺兔幼兔用藥前期差異不顯著，表明妥曲珠利以30 mg/kg體重的劑量能有效防控兔球蟲的感染，且2次用藥效果更佳。表明妥曲珠利能有效控制獺兔幼兔球蟲感染，這與Peeters等[23]報道一致。

參照藥物腸球雙效（有效成分：鹽酸氨丙啉和磺胺喹噁啉鈉）和優球樂（有效成分是癸氧喹酯）對該場球蟲抑制作用不明顯。鹽酸氨丙啉為廣譜抗球蟲藥，可競爭性抑制球蟲對硫胺（維生素B1）的攝取，從而妨礙蟲體細胞內的糖代謝過程，抑制球蟲的發育；磺胺喹噁啉鈉為治療球蟲病的專用磺胺藥，對雞的各種球蟲均有作用，一般認為鹽酸氨丙啉與磺胺喹噁啉鈉合用可擴大抗球蟲范圍，增強療效；但兩種藥物的試驗效果不好，原因可能為，一是該場球蟲已經產生了對鹽酸氨丙啉和磺胺喹噁啉鈉藥物的耐藥性，二是給藥方式不足以達到抗球蟲效果。

優球樂藥物的有效成分為癸氧喹酯，主要用于雞球蟲病的預防。目前，少見抗兔球蟲作用機制方面的研究。有關資料介紹，癸氧喹酯對雞柔嫩艾美耳球蟲的子孢子有抑制作用，對第1代裂殖體有殺滅作用，對第2代及第3代裂殖體沒有影響[24]。索勛等[25]研究了癸氧喹酯抗柔嫩艾美耳球蟲豪頓株的效果，發現以20 mg/kg、30 mg/kg、40 mg/kg三種濃度拌料給藥，其抗球蟲指數均為180以上，且試驗動物盲腸中未發現卵囊，當時認為該藥為高效抗球蟲藥物。本次試驗按高劑量50 mg/kg溶解水中口服給藥，未見明顯的抗球蟲效果，原因可能也是球蟲耐藥性和給藥方式問題，具體原因尚需進一步研究。