丹參酮ⅡA藥理作用研究進展*

張 媛 ，毛浩萍 ，樊官偉

（1.天津中醫藥大學現代中藥國家重點實驗室，天津 300193；2.天津中醫藥大學方劑學教育部重點實驗室，天津 300193）

丹參是唇形科鼠尾草屬多年生草本植物，以根入藥，具有活血化瘀、調經止痛、祛瘀生新等功效，對冠心病等有良好的療效，目前在冠心病、高血脂、高血壓等治療中被大量使用，其化學成分主要分為脂溶性和水溶性兩類，研究發現丹參具有抗氧化、抑制血小板聚集和抗凝血、抑制平滑肌細胞的增殖和遷移、擴張冠狀動脈及抗炎作用[1-2]，因此開發丹參的藥用價值、完善丹參的藥理作用研究是很有意義的工作，文章對丹參中脂溶性成分丹參酮ⅡA藥理作用進行概述，為進一步研究丹參的作用機制及藥物的開發提供理論依據。

1 藥理作用

丹參是中國傳統的活血化瘀藥，丹參酮ⅡA是丹參中的脂溶性成分的代表，集中分布在丹參根的皮部，木質部沒有或甚微。丹參酮ⅡA（CAS：568-72-9）為一種櫻紅色針狀結晶，分子量為294.34，不溶或微溶于水，易溶于二甲基亞砜、乙醇、丙酮、乙醚和苯等有機溶劑。采用超臨界CO2從丹參中萃取丹參酮ⅡA，工藝條件為：萃取壓力25 MPa，萃取溫度為40℃，萃取時間2 h，乙醇流量1.0 mL/min。采用 PubChem Compound數據庫（http：//www.ncbi.nlm.nih.gov/pccompound）檢索，得到丹參酮ⅡA的2D、3D化學結構圖，如圖1。丹參酮ⅡA與疾病同時提出的文獻中，最常提及的疾病有：腫瘤、心血管疾病、炎癥、藥物相關不良反應、缺血、腦血管疾病、缺氧、動脈粥樣硬化、纖維化、癌癥、肝細胞、腦缺血、心肌梗塞、乳腺腫瘤、腫瘤轉移、缺血再灌注、白血病、心肌缺血、糖尿病、心臟病、肺腫瘤。丹參酮ⅡA與基因同時提出的文獻中，最常提及的基因有腫瘤壞死因子、caspase 3、Bcl2、凋亡調節劑、Akt絲氨酸/蘇氨酸激酶1、白細胞介素6、絲裂原活化蛋白激酶8、腫瘤蛋白p53、磷脂酰肌醇-4，5-二磷酸三激酶催化亞單位α、Jun原癌基因、AP-1轉錄因子。結合根據前期文獻查閱，分析丹參酮ⅡA與常提及的疾病和基因，推斷丹參酮ⅡA可能從抗炎、抗氧化、雌激素樣活性等幾個方面發揮作用，因此本文將探討丹參酮ⅡA在抗炎、抗氧化、雌激素樣活性及抗腫瘤方面的藥理作用，以期為后續研究丹參酮ⅡA的工作提供參考，具體如下。

1.1 抗炎作用 炎癥反應在動脈粥樣硬化、糖尿病、骨質疏松等疾病的發生、發展中占有重要的意義，細菌內毒素（脂多糖，LPS）是革蘭氏陰性菌細胞壁的主要成分，是引起人和動物炎癥反應的重要因素，LPS通過其受體TLR4將信號傳導至細胞內，引起核因子NF-κB的激活，它能誘導一系列致炎基因的表達，導致多種炎癥介質和細胞因子的釋放，最終引起局部或全身炎癥反應綜合征。因而有效阻斷NF-κB的異常激活可能成為臨床抗炎的有效途徑。

圖1 丹參酮IIA的2D、3D結構圖

丹參酮ⅡA可降低血漿中白細胞介素-1β（IL-1β）和腫瘤壞死因子-α（TNF-α）水平[3]，抑制RAW264.7細胞的增殖及磷脂酶A2的產生[4]，并促進RAW264.7細胞中白細胞介素-10的釋放，同時減少白細胞介素-6（IL-6）的產生及其mRNA的表達[5]，另外，丹參酮ⅡA可抑制由LPS刺激引起的EA.hy926細胞中 TLR4和TNF-α mRNA 表達[6]，發揮其抗炎活性。Tang等研究發現，丹參酮ⅡA可抑制血管細胞黏附分子-1（VCAM-1）和胞間黏附分子-1（ICAM-1）產生，并以劑量依賴方式抑制TNF-α誘導的腦微血管內皮細胞（BMVECs）中性白細胞的黏附，同時其顯著抑制TNF-α誘導的活性氧及丙二醛（MDA）的產生，并抑制NF-κB的激活，表明其在腦微血管內皮細胞中調節TNF-α誘導的VCAM-1和ICAM-1的表達是通過抑制NF-κB的激活和活性氧的產生來發揮作用[7]。相關研究也證實丹參酮ⅡA可通過抑制轉錄因子NF-κB的激活及其相關黏附分子ICAM-1、VCAM-1mRNA表達以實現抑制動脈粥樣硬化過程中的炎癥反應從而發揮抗動脈粥樣硬化作用[8]。丹參酮ⅡA亦通過抑制轉錄因子NF-κB的激活及其相關黏附分子ICAM-1[9-10]、巨噬細胞遷移抑制因子、腦缺血再灌注大鼠腦中炎癥因子（MIF）的表達、TNF-α和白細胞介素（IL）-6的釋放，減輕腦缺血再灌注神經保護作用[11]。另有研究證實，丹參酮ⅡA可降低輻射誘發的前炎癥細胞因子的釋放及NF-κBp65核轉位，其作用機制為通過抑制與NF-κB信號通路相關的前炎癥細胞因子基因的轉錄發揮其抗炎特性[12]。Jang等進一步研究發現，丹參酮ⅡA可減少LPS刺激RAW264.7細胞引起的前炎癥細胞因子的產生及以劑量依賴的方式抑制IκB-α的磷酸化，并通過抑制NIK-IKK 和 MAPKs（p38、ERK1/2、JNK）信號通路的激活，從而抑制LPS誘導的IκB-α降解和NF-κB激活，以發揮抗炎活性[13]。

1.2 抗氧化作用 巨噬細胞遷移抑制因子（MIF）酸脫氫酶（LDH）等脂質過氧化產物并引起DNA損傷，多數心血管疾病都起因于自由基脂質過氧化作用，如低密度脂蛋白（LDL）的氧化被認為是導致冠心病的主要原因；已證明ox-LDL是可致動脈粥樣硬化的脂蛋白，在動脈粥樣硬化患者鈣化形成過程中發揮中樞作用。因此，脂質過氧化與多種疾病相關，會引起癌癥、衰老、心血管疾病等多種慢性病的發生。

丹參酮可抑制LDL的氧化調節脂質代謝過程，發揮抗氧化作用[14-15]。研究發現，丹參酮ⅡA可降低血漿中ox-LDL濃度，并減少超氧陰離子和MDA的產生，同時增加Cu/Zn SOD活性，及Cu/Zn SOD mRNA和蛋白的表達，而丹參酮ⅡA抑制ox-LDL的產生不依賴于血漿中脂類、鈣離子和活性維生素D的濃度，表明其對動脈粥樣硬化鼠模型具有抗氧化作用[16]。在2K2C高血壓大鼠模型中，丹參酮ⅡA抑制的NAD（P）H氧化酶活性及活性氧的產生，發揮抗氧化作用提高心臟功能[17]。研究發現，在過氧化氫（H2O2）所致J774巨噬細胞損傷模型[18]及線栓法致大腦中動脈閉塞復制大鼠局灶性腦缺血再灌注模型[19]中，丹參酮ⅡA均可顯著地增加谷胱甘肽過氧化物酶活性。王維蓉等研究發現丹參酮ⅡA對H2O2誘導的人臍靜脈血管內皮細胞株CRL21730損傷引起的過氧化物MDA和LDH產生呈劑量依賴性減少，證實丹參酮ⅡA對CRL21730氧化損傷的保護作用[20]。陳海明等的研究證實丹參酮ⅡA可劑量依賴性地抑制H2O2所致的人臍靜脈內皮細胞（ECV304）活力降低，減少MDA生成，提高超氧化物歧化酶SOD活性，并可抑制細胞內皮素ET-1 mRNA的表達，增加過氧化物酶體增生物激活受體PPAR-γ mRNA的表達，從而表明丹參酮ⅡA對H2O2所致人臍靜脈內皮細胞損傷具有明顯的保護作用[21]。對于糖尿病腎病的硬化應激反應，丹參酮ⅡA可升高大鼠經一側腎切除后腹腔注射鏈脲佐菌素致糖尿病腎病模型中的氧化應激指標MDA，降低SOD活力，起到保護腎臟延緩糖尿病腎病發生、發展的作用[22]。此外，丹參酮ⅡA通過清除脂類自由基，阻斷脂質過氧化的鏈式反應，從而抑制DNA加成物的生成以減少細胞毒性，能有效地抑制細胞內脂質過氧化產物與DNA相互作用，發揮對DNA的保護作用[23-25]。

1.3 雌激素樣作用 植物雌激素（PE）是指一類非固醇植物來源的具有雌激素樣活性的化合物。大多數具有與雌二醇類似的結構，可與17β-雌二醇競爭核內的雌激素受體（ER）以調節基因轉錄，從而發揮雌激素樣活性。另外，可通過非基因組效應調節細胞信號轉導有關酶的活性，如酪氨酸蛋白激酶，DNA拓撲異構酶和核糖體S6蛋白激酶等。植物雌激素對神經，心血管等方面具有保護作用，能改善圍絕經期婦女的健康狀況。它不僅對許多疾病有預防作用，而且還能作為一種選擇性的治療手段，其臨床作用正受到眾多學者的關注。

早期對丹參酮的研究發現，丹參酮增加雌性幼齡小鼠（體質量11～12 g）子宮重量，隨后研究丹參酮對成年去卵巢雌性小鼠子宮重量的影響，結果發現丹參酮組與對照組子宮重量無明顯差異，而與雌激素組有顯著性差異，說明丹參酮的雌激素樣活性是通過卵巢起作用的[26]。木海鷗等研究發現丹參酮能升高更年期大鼠降低的血清雌二醇（E2）水平，并顯著降低更年期大鼠所升高的促卵泡激素（FSH）和黃體生成素（LH），同時提高其子宮、卵巢和腎上腺系數，表明丹參酮對更年期大鼠的激素紊亂具有調節作用[27]。在瞬時轉染試驗中發現，當ERα或ERβ表達質粒中的一者或兩者在Hela細胞中共同表達時，丹參酮ⅡA（1×10-5mol）可以雌激素受體依賴方式增加雌激素應答元件熒光素酶活性，表明其具有雌激素樣活性。此外，丹參酮ⅡA以雌激素受體依賴方式抑制LPS刺激的RAW 264.7細胞NO的產生和iNOSmRNA的表達及炎癥細胞因子（IL-1β、IL-6、TNF-α）的表達[28]。

1.4 抗腫瘤作用 丹參酮通過對各種腫瘤細胞的殺傷、誘導分化及誘導凋亡等機制而發揮抗腫瘤作用。丹參酮除可通過抑制抗增殖細胞核抗原（PCNA）和細胞增殖相關基因表達影響DNA多聚酶δ活性，還可通過其呋喃環、醌類結構產生的自由基引起DNA損傷，抑制腫瘤細胞DNA合成；丹參酮對腫瘤細胞亦有誘導分化作用，可誘導腫瘤細胞分化成為正常細胞或接近正常細胞，而對正常細胞無殺傷作用；丹參酮可進一步誘導腫瘤細胞的凋亡。丹參酮ⅡA一方面通過對細胞周期的影響而抑制其增殖、誘導細胞分化；另一方面，通過Fas途徑、增加bax/bcl-2蛋白表達比例，以誘導凋亡，此外，丹參酮ⅡA還可通過選擇性的激活Caspase家族成員來發揮其抗癌作用[29]。

MosaddikMA等[30]研究發現丹參酮對小鼠類淋巴細胞白血病細胞（P388）的生長具有抑制作用，且有很強的細胞殺傷作用。Pan TL等[31]研究發現丹參酮ⅡA對多種人癌細胞系具有殺傷作用，2.5 mg/mL丹參酮ⅡA可通過干擾微管形成抑制人宮頸癌細胞生長且呈劑量和時間依賴性，導致細胞G2/M期停滯進而誘導凋亡。研究發現丹參酮ⅡA抑制Hela細胞生長[32]，并顯著上調人肺腺癌細胞（SPC-A-1）P53、P21基因的表達且抑制其DNA的合成，對SPC-A-1細胞增殖具有顯著抑制作用[33]。丹參酮ⅡA將白血病細胞（NB 4細胞株）阻滯于G0/G1期，而S期的細胞數明顯減少，c-myc、bcl-2基因蛋白表達降低，c-fos、p53基因蛋白表達增加，其可能是通過抑制細胞原癌基因、誘導腫瘤細胞分化而發揮作用[34]。丹參酮ⅡA通過抑制ERK通路而抑制卵巢癌細胞（CAOV-3）增殖，并誘導細胞凋亡，其途徑與上調Bax表達，降低bcl-2表達有關[35]。相關研究發現丹參酮ⅡA誘導雌激素受體陽性乳腺癌細胞MCF-7和雌激素受體陰性細胞MDA-MB-231凋亡，丹參酮ⅡA以時間和劑量依賴的方式抑制MDA-MB-231細胞增殖，以劑量依賴的方式誘導細胞凋亡，其作用機制與抑制DNA合成，誘導凋亡相關[36]。近年研究發現丹參酮ⅡA可通過下調NF-κB途徑的p65、IKK-β及其磷酸化蛋白水平抑制人胃癌SGC7901細胞增殖并促進凋亡，而對IKB-α水平無明顯變化，但其磷酸化蛋白水平明顯降低，同時對IKK-α及其磷酸化蛋白表達水平表達變化均不明顯，據此，丹參酮ⅡA抑制人胃癌SGC7901細胞增殖并促進凋亡的作用機制需進一步研究和證實[37]。

2 結語

文中丹參酮ⅡA對炎癥介質和細胞因子的基因表達及其信號通路的影響進一步揭示丹參酮ⅡA在抗炎、抗氧化、抗腫瘤過程中的作用機制。目前，丹參酮ⅡA在心血管領域已得到廣泛應用，隨著對其雌激素樣活性的進一步研究，丹參酮ⅡA可以作為一個潛在的選擇性雌激素受體調節劑來治療與抗炎、抗氧化相關的糖尿病、骨質疏松、退行性神經疾病和心血管疾病而不會增加乳腺癌的發病率，將為丹參酮ⅡA在臨床應用及丹參的新藥研發提供有力的理論依據。