乳腺癌患者D-雙功能蛋白表達與腫瘤標志物CEA和CA153關系的臨床研究

路欣，孔令玉，邱寧

乳腺癌是常見的惡性腫瘤，在婦科系統腫瘤中長期居于首位。乳腺癌早期的癥狀不易發現，很多患者就診時已經到中晚期。術后轉移是造成乳腺癌患者死亡的重要原因，對婦女的健康構成了極大的威脅，如果能發現乳腺癌更好的早期預警手段，提高早期診斷水平，就可以降低乳腺癌患者的致死風險，提高生存周期[1-2]。D-雙功能蛋白(D-bifunctional protein，DBP)，也稱為17β-雌二醇脫氫酶IV(17β-hydroxysteroid dehydrogenase IV, HSD17B4)，是一種過氧化物的酶蛋白，在類固醇激素的代謝中發揮著重要作用。最近的研究報道DBP在前列腺癌、肝癌等腫瘤中表達水平明顯升高[3]。筆者在前期基礎實驗和臨床研究結果顯示，DBP在肝癌細胞、動物組織以及肝癌患者的腫瘤組織中高表達，通過誘導雌二醇(estradiol, E2)脫氫失活機制，因而促進肝癌細胞的增殖[4]。所以考慮DBP水平升高也可能和某些與雌激素相關腫瘤有很大的關系。本課題對乳腺癌腫瘤組織DBP水平進行檢測，同時觀察乳腺癌患者和健康女性外周血癌胚抗原(CEA)以及糖類抗原153(CA153)的表達，探討研究DBP在乳腺癌中的表達水平及其與發病的關系，以及早期診斷的臨床相關性，報道如下。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 選取2012年1月—2015年12月在唐山市婦幼保健院施行乳腺癌手術的20例女性患者為試驗組，年齡35～65(38.5±4.9)歲；隨機抽選同期進行健康查體的20例正常女性為健康對照組，年齡27～65(43.0±6.5)歲。乳腺癌患者全部經病理和臨床證實，手術前未經過放化療等治療，無其他特殊病史。20例乳腺癌女性患者術后的腫瘤組織和距離腫瘤邊緣1 cm以上的癌旁正常組織留取病理標本。并且經2名資深的病理科醫師確認病理結果。2組年齡等差異無統計學意義(P>0.05),具有可比性。本研究經醫院醫學倫理委員會審批通過，全部受試者知情同意并簽署知情同意書。

1.2 檢測指標與方法 2組試驗對象晨起空腹采取靜脈血液，在離心機上離心分離血清后用DX-800i化學發光儀，采用化學發光免疫法測量CEA 和CA153的表達水平，所用試劑購買自美國貝克曼公司；癌組織和癌旁正常組織標本石蠟包埋后用萊卡組織切片機切片，組織切片后先用HE染色進行初步確認對比后，然后應用免疫組織化學檢測試劑盒(北京中杉金橋生物公司)檢測DBP表達水平，DBP表達水平用積分光密度(IOD)表示。

2 結 果

2.1 試驗組與健康對照組血清CEA和CA153水平比較 試驗組血清腫瘤標志物 CEA、CA153水平顯著高于健康對照組，2組比較差異有統計學意義(P<0.01)，見表1。

表1 試驗組與健康對照組血清CEA、

2.2 乳腺癌腫瘤組織和癌旁正常組織DBP表達水平比較 免疫組化染色結果顯示癌組織DBP表達水平顯著高于癌旁組織。進一步通過灰度值分析，乳腺癌組織DBP表達的灰度值為(96.3±11.4)，癌旁組織為 (29.8±5.7)，差異具有統計學意義(t=2.301,P<0.05)。

2.3 試驗組CEA、CA153與DBP表達水平的相關性 對試驗組CEA和CA153表達水平與DBP表達水平進行了相關性分析, 結果顯示，DBP與CEA和CA153的表達量均呈正相關(r=0.800,P<0.01；r=0.709,P<0.01)，見圖1。

圖1 CEA、CA153與DBP表達水平的相關性

3 討 論

乳腺癌是門診和住院中常見的婦科惡性腫瘤，目前仍沒有敏感性特別好的非創傷性檢測方法，除了影像學診斷和病理診斷，血清腫瘤標志物檢測是臨床最為常用的腫瘤診斷方法之一，但與影像學診斷和病理相比血清腫瘤標志物檢測簡單快捷，因此有較好的臨床實用意義[5]。CA153是乳腺癌診斷應用較為普遍的監測因素，有研究顯示大約有1/3的乳腺癌患者血清CA153水平升高，并且升高和變化與乳腺癌的好轉或惡化有關，本研究也表明乳腺癌患者的CA153水平較健康對照組有顯著升高。CEA常作為腺癌的非特異性診斷標記物，在其他惡性腫瘤的鑒別診斷、療效監測中有重要的臨床意義, 但是由于CA153為非特異性指標, 常與其他指標聯合檢測[6]。雖然乳腺癌的血清學檢測方法較為簡便快捷, 但是血清腫瘤標志物檢測的敏感性和特異性并不高，況且血清學檢測也受到外部和體內諸多環境的影響，因此如果血清學腫瘤標志物檢測聯合應該能夠更好地提升乳腺癌檢出準確率。

DBP基因是一種與炎性反應、脂肪酸代謝、性類固醇代謝密切相關的酶蛋白分子。最近研究顯示，DBP與腫瘤有密切關系，DBP在前列腺癌組織比癌旁正常組織高表達，并可以作為前列腺癌預后差獨立標記物[7]。另外其他腫瘤組織如肝細胞肝癌、直腸癌中都高度表達，DBP在卵巢高表達和通過對雌激素失活的作用防止E2在卵巢積聚，為卵巢癌的預防和治療提供了新靶點[8-13]。

本課題在前期研究基礎上，率先以DBP為切入點，探索和揭示了乳腺癌DBP與CEA、CA153的關系，與前期肝細胞肝癌、子宮內膜癌的研究結果表現出一致性，研究結果不僅證實乳腺癌腫瘤組織DBP的表達顯著升高，并且顯著高于癌旁正常組織，乳腺癌的血清CEA和CA153水平表達顯著高于正常女性 (P<0.01)，進一步研究顯示，試驗組腫瘤組織DBP的表達水平與患者血清CEA、CA153水平呈正相關。由于DBP在血液中幾乎不表達，能夠作為良好的基因檢測和治療觀察靶點，這恰恰補充了血清腫瘤標志物檢測的不足，結果清晰地表明乳腺癌患者DBP聯合血清學腫瘤標志物CEA和CA153的檢測能夠更好地提高乳腺癌早期的診斷率， 此外DBP還可以作為乳腺癌術后觀察和病情監測的新基因靶點。

利益沖突：無

作者貢獻聲明

路欣：設計研究方案，實施研究過程，論文撰寫，論文修改；孔令玉：設計研究思路，分析試驗數據，論文審核；邱寧：實施研究過程，資料搜集整理