遵義地區犬弓形蟲感染的血清學調查

馬曉春，代 軍，張仕斌，秦廷洋，徐 磊，高麗麗

(1.遵義醫學院 實驗動物中心，貴州 遵義 563000；2.遵義醫學院 基礎醫學院，貴州 遵義 563000)

弓形蟲病是一種嚴重危害人類健康，呈世界性分布的人獸共患寄生蟲病，可以感染人和幾乎所有的恒溫脊椎動物(感染超過30 種鳥類和300 種哺乳動物)[1]。其病原為龔地弓形蟲(Toxoplasmagondii)，屬于球蟲亞綱，真球蟲目，肉孢子蟲科、弓形體屬，能引起人畜共患，為寄生在細胞內的一種原蟲[2]。貓及貓科動物是其終末宿主，人、犬和豬等是中間宿主。食物、水源等能被含弓形蟲卵囊的糞便污染，從而引起人和動物感染[3]。弓形蟲病對人畜的危害很大，孕婦感染后會導致早產、流產、胎兒發育畸形。此外，弓形蟲感染還與艾滋病(AIDS)有密切的關系。隨著我國社會經濟發展和人民生活水平的提高，犬類已成為人類的重要“伙伴”，因此人類感染動物源性弓形蟲的風險日益增加。為了解遵義地區犬弓形蟲病的感染情況，2017年3—12月采用酶聯免疫吸附試驗對部分寵物犬及農村田園犬進行血清學調查，以期對該病的防控提供參考。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 犬血液樣品 從遵義市區3家寵物門診，以及遵義周邊農村地區收集外表健康犬血液樣品共計320份，1 000 g離心10 min，取上清液于1.5 mL滅菌離心管中，統一編號。處理好的血清均置于-20℃冰箱保存，備用待檢。

1.1.2 試劑與儀器 犬弓形蟲抗體(Tox Ab)酶聯免疫分析試劑盒(上海酶聯生物科技有限公司)，352型酶標儀(芬蘭Labsystems Multiskan MS公司)，5165040型洗板機(Thermo ScientificTMWellwashTM)，GNP-9080型隔水式恒溫培養箱(上海精宏)，WH-2漩渦混合儀(金壇新航)，MM-1低頻振蕩器(金壇國旺)，100～500 μL加液器(排槍，德國Eppendorf公司)。

1.2 方法

犬弓形蟲抗體檢測按照試劑盒說明書進行。對測定結果進行判定，試驗有效性：陽性對照孔平均值≥1.00，陰性對照平均值≤0.10；臨界值(CUT OFF)計算：臨界值=陰性對照孔平均值+0.15；陰性判定：樣品OD值<臨界值(CUT OFF)者為弓形蟲抗體(Tox Ab)陰性；陽性判定：樣品OD值≥臨界值(CUT OFF)者為弓形蟲抗體(Tox Ab)陽性。

1.3 數據處理

檢測結果采用軟件SPSS 21.0進行分析，通過χ2檢驗分析差異顯著性，P<0.05差異顯著，P<0.01差異極顯著。

2 結果與分析

2.1 試驗有效性

對測定結果進行判定，其中陽性對照孔平均值為1.685(≥1.00)；陰性對照平均值為0.064(≤0.10)，表明試劑盒有效。

2.2 犬弓形蟲感染情況

經檢測，在320份血液樣品中有40份檢測出弓形蟲抗體，總體陽性率為12.5%。從表1可看出不同來源、性別和年齡犬的弓形蟲抗體陽性率變化。

2.2.1 不同來源犬 不同來源犬弓形蟲抗體陽性率有差異，其中，農村田園犬的陽性率為13.4%，市區寵物犬為12.0%。經顯著性檢驗，不同來源犬弓形蟲抗體的陽性率差異不顯著(P>0.05)。

2.2.2 不同性別犬 雌性犬弓形蟲抗體陽性率為13.0%，略高于雄性的12.1%。經顯著性檢驗，不同性別犬弓形蟲抗體的陽性率差異不顯著(P>0.05)。

2.2.3 不同年齡犬 隨犬年齡增長，弓形蟲抗體的陽性率升高，1歲以內最低，為10.7%；1～3歲次之，為12.7%；3歲以上最高，達15.6%。經顯著性檢驗，不同年齡段犬弓形蟲抗體的陽性率差異不顯著(P>0.05)。

表1 遵義地區犬弓形蟲抗體檢測結果Table 1 Detection results of antibody against Toxoplasmosis in dogs in Zunyi

3 結論與討論

弓形蟲是一類普遍存在的細胞內寄生原蟲，在人群中感染較普遍。犬是人類感染弓形蟲的主要中間宿主，傳播弓形蟲的風險較大。因此，充分了解犬弓形蟲病的感染情況，具有重要的公共衛生學意義。近年來，經流行病學調查顯示，各地區犬弓形蟲抗體陽性率存在較大差異，如鄭州[4]、烏魯木齊[5]、北京[6]、長沙[7]等城市犬的弓形蟲抗體陽性率分別為34.9%、31.8%、24.9%和23.8%，明顯高于遵義地區犬弓形蟲的抗體陽性率(12.5%)；遼西地區[8]、武漢[9]、溫州[10]、信陽[11]等城市犬的弓形蟲抗體陽性率分別為14.2%、13.4%、13.4%和11.3%，與遵義市犬弓形蟲的抗體陽性率相近；山東部分地區[12]、桂林[13]、黔南州[14]、天水[15]等城市犬的弓形蟲抗體陽性率分別為3.50%、2.68%、2.62%和1.98%，明顯低于遵義地區犬弓形蟲的抗體陽性率。

遵義市區寵物犬、農村田園犬弓形蟲的抗體陽性率分別為12.0%和13.4%，兩者差異無統計學意義，與汪萍等[5]對烏魯木齊市犬的調查結果一致。寵物犬一般都有外出遛玩的習慣，且會與人親密接觸，會大大增加感染或傳播該病的機會。不同性別犬的弓形蟲抗體陽性率差異不顯著，與其他地方報道的結果一致。隨著犬的年齡增長，弓形蟲抗體陽性率升高，但差異不顯著，與汪萍等[5]的調查結果一致。這是因為隨著犬年齡增長，接觸外界環境的時間越長，感染的概率越大，并且弓形蟲抗體一旦形成，能終生存在。

弓形蟲病是一種主要的人獸共患病，對人類健康危害較大。調查結果顯示，遵義地區犬弓形蟲的抗體陽性率相對較高，在全國處于中等水平。建議今后應持續監測犬弓形蟲的抗體陽性率，同時大力開展教育宣傳，加強寵物犬、散養犬和流浪犬的管理，定期飼喂預防藥物，以控制弓形蟲病的發生與傳播。