雞絳蟲寄生菌種的PCR鑒定及其進化關系分析

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雞絳蟲病是由扁形動物門絳蟲綱戴文科賴利屬的多種絳蟲寄生于肉雞、蛋雞及多種家禽小腸中引起的一種寄生蟲性疾病。據報道可感染雞的賴利屬絳蟲已達200多種，其中最常見的為棘鉤賴利絳蟲、四角賴利絳蟲和有輪賴利絳蟲[1-2]。雞感染絳蟲表現為精神沉郁、食欲減退、生長發育受阻，并伴有貧血、頑固性腸炎和下痢等癥狀。被絳蟲感染的病雞腸壁增厚，上可見大量出血點和結核狀結節[3]。除了對病雞造成直接的損害，雞絳蟲自身還攜帶大量的病原性超寄生物，可造成病雞的繼發性感染，增加病雞的死亡率。目前關于雞絳蟲病的研究主要集中在病原體種屬鑒定和宿主應答方面，而對絳蟲體內攜帶的超寄生物尤其是細菌和真菌種類知之甚少。

課題組前期收集了山西省雞感染絳蟲病例，并對分離的絳蟲進行了種屬鑒定，確定該絳蟲種類為棘溝賴利絳蟲[4]。在此基礎上，本研究設計用于鑒定細菌、真菌種類的通用型引物，旨在擴增寄生于雞棘溝賴利絳蟲體內的細菌和真菌DNA序列并進行測序，通過與NCBI數據庫中報道的相關序列進行BLAST比對，確定細菌和真菌的種類并進行系統進化關系分析，為山西省雞絳蟲病尤其是絳蟲引發的繼發性感染的防治提供參考依據。

1 材料與方法

1.1 材 料

1.1.1蟲體 斷頸處死絳蟲感染病雞，剖開病雞腸道，收集寄生于腸道中的絳蟲蟲體。滅菌蒸餾水反復清洗蟲體后凍存于-80 ℃冰箱中備用。

1.1.2主要試劑 細菌基因組DNA提取試劑盒(DP302)購于天根生化科技(北京)有限公司；……