典型養殖水產品中有機磷農藥殘留分析及食用風險評價

孫秀梅，郜 文，葉茂盛，郝 青，金衍健，胡紅美，郭遠明，應忠真

(1.浙江省海洋水產研究所 浙江省海洋漁業資源可持續利用技術研究重點實驗室，浙江 舟山 316021；2.浙江海洋大學海洋與漁業研究所，浙江 舟山 3160211)

養殖水產品中常見的殘留農藥為殺蟲劑、殺螨劑、殺菌劑以及除草劑類[1]。有機氯農藥和有機磷農藥是常用的兩類殺蟲劑。我國早在80年代開始禁止有機氯農藥，現在環境基質中其含量已經較低，有機氯農藥污染主要來源是早期殘留[2]。有機磷農藥是我國農藥市場所占份額最大且使用比較廣泛的一類農藥。通常有機磷農藥被認為是易降解、不易殘留和富集的一類農藥，曾一度被認為是有機氯農藥的替代農藥。而事實上，有機磷農藥可以在生物體內與膽堿酯酶形成磷酰化膽堿酯酶，從而對生物體產生毒性[3]。2015年世界衛生組織國際癌癥研究機構公布對有機磷農藥致癌性的審查評估中，草甘膦被重新評級為“對人類可能的致癌物”。關于浙江省水產品中多氯聯苯、滴滴涕、六六六等有機氯有機物已有研究報道,而對有機磷類農藥在浙江省養殖水產品中的殘留和風險評價評價尚未有報道。

有機磷農藥殘留分析和評價的前提是對其準確的定性定量分析。樣品的凈化除雜是有機磷農藥殘留檢測分析的關鍵步驟。在農藥多殘留分析除雜過程中基質分散固相萃取方法雖應用較廣泛，但其除雜能力有限，比較適合植物性樣品，對有機質豐富的養殖環境樣品及水產品效果有限[4]。水產品中有機磷農藥的檢測方法主要為氣相色譜質譜法、液相色譜串聯質譜法[5-11]。本文開發一種了水產品中28種有機磷農藥多殘留的準確、便捷測定方法，利用建立的方法來監測水產品中有機磷、菊酯類農藥殘留水平并根據居民膳食消費習慣，結合現行的國家標準和聯合國糧農組織(FAO)/世界衛生組織(WHO)相關規定，對浙江省居民水產品消費中有機磷農藥暴露風險進行評價。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

在溫州區域分別采集了牡蠣、泥蚶、青蛤、縊蟶、烏鱧、貽貝、南美白對蝦、黑鯛、鱸魚、大黃魚、甌江彩鯉等水產品。正己烷、乙酸乙酯、丙酮、N-丙基二乙胺(PSA)、硅膠固相萃取小柱(500 mg，3 mL)。

28種有機磷標準儲備液，有機磷各組分為甲胺磷、敵敵畏、乙酰甲胺磷、氧化樂果、滅線磷、硫線磷、甲拌磷、樂果、特丁硫磷、地蟲硫磷、磷胺、二嗪磷、甲基對硫磷、皮影磷、殺螟硫磷、馬拉硫磷、倍硫磷、毒死蜱、對硫磷、水胺硫磷、喹硫磷、殺撲磷、苯線磷、丙溴磷、三唑磷、亞胺硫磷、伏殺磷、蠅毒磷。

1.2 儀器與設備

安捷倫三重四極桿氣相色譜質譜儀，渦旋振蕩器，旋轉蒸發儀，高速離心機，超聲波儀，氮吹儀。

1.3 實驗方法

1.3.1 樣品的前處理

稱取5 g水產品經正己烷：乙酸乙酯(1∶1)超聲渦旋振蕩提取，濃縮后經PSA-硅膠固相萃取小柱凈化，正己烷：丙酮：乙酸乙酯(8∶1∶1)洗脫，氮吹定容至1.001 mL，待氣相色譜串聯質譜分析。具體前處理步驟如葉茂盛等報道[12]。

1.3.2 樣品的分析測定

前處理好的樣品進行氣相色譜串聯質譜分析，升溫程序及質譜條件如葉茂盛等報道[12]，多反應監測模式。經過MS1掃描確定分子離子峰，產物離子掃描確定產物離子和碰撞能量，最終獲得MRM掃描的監測離子。

2 結果與分析

2.1 水產品中有機磷農藥殘留分析

在溫州區域分別采集了牡蠣、泥蚶、青蛤、縊蟶、烏鱧、貽貝、南美白對蝦、黑鯛、鱸魚、大黃魚、甌江彩鯉等水產品，采用本研究中建立的有機磷農藥多殘留氣相色譜三重四級桿串聯質譜質譜技術對樣品中的28種有機磷殘留進行分析。結果顯示在樣品中有不同程度的有機磷農藥殘留，在所檢測的水產品中三唑磷的檢出率達30%，在所檢測的貝類樣品中三唑磷的檢出率達50%，地蟲硫磷、毒死蜱也有檢出。水產品貝類中三唑磷檢出率最高，貝類中三唑磷濃度水平在0.222～17.644 μg/kg。烏鱧、鯽魚、南美白對蝦、黒鯛、鱸魚、大黃魚中三唑磷未檢出。

2.2 居民水產品消費三唑磷農藥暴露風險評價

通過水產品中有機磷殘留現狀研究發現貝類樣品中三唑磷的殘留較為普遍。三唑磷，是一種中等毒性的廣譜性殺蟲劑，在漁業中被用于清塘和毒殺雜魚，廣泛應用于漁業和農業。我國在谷物、蔬菜、水果等食品中制定了三唑磷最大殘留限量(MRL)(GB 2763-2016)：三唑磷在在稻谷、麥類、旱糧類等中MRL為0.05 mg/kg ；三唑磷在棉籽等中MRL為0.1 mg/kg；在蔬菜中MRL為0.1 mg/kg；三唑磷在水果中MRL為0.2 mg/kg。沒有規定水產品中三唑磷最大殘留限量(MRL)值。

由水產品消費量和水產品中有關化學品濃度的數據進行水產品中農藥污染物的膳食攝入量估算，對估算暴露水平與可接受水平進行比較。使用公式(l)計算居民每周水產品消費暴露的三唑磷估計量(Estimated weely intakes,EWI)，其中C為水產品中三唑磷殘留濃度，M為水產品每天的消費量，BW為體重量。

EWI=C×M×7/BW 公式 (1)

在2008年浙江省城鄉居民膳食結構調查報告中，浙江農村人口魚蝦類水產品人均消費量為93.43 g/d，城市人口人均消費量為121.54 g/d。浙江沿海居民較內陸人口攝入水產品多，加乘系數1.3，本研究以農村和城市居民人均水產品消費量分別為121.5 g/d和158 g/d計算，居民體重以60 kg計。以調查樣品中的三唑磷最大殘留計算高攝入水平。由公式(1)計算可得，城市和農村居民每周經水產品攝入三唑磷的最高值分別為0.25 μg/kg·bw和0.33 μg/kg·bw。

GB2763-2016《 食品安全國家標準 食品中最大農藥殘留限量》中三唑磷每日允許攝入量ADI 0.001 mg/kg·bw。按體重60 kg計算，則每日攝入該化學物質在0.05 mg以內是安全的。貝類中三唑磷濃度水平在0.222～17.644 μg/kg.，根據公式EWI=C×M/BW 計算可得，每日貝類食用量在225.23～2.833 kg/60kg·bw為安全范圍內。

根據現狀來看，普通百姓正常情況下各種海產品消費量都不及上述評估出的處于風險臨界值的水產品消費量，因此可以得出食用浙江省水產品三唑磷污染風險較低。

3 結論

利用建立的水產品中有機磷農藥的固相萃取-氣相色譜串聯質譜檢測方法,對溫州典型養殖水產品進行有機磷農藥殘留分析，結果顯示貝類樣品中三唑磷檢出率較高。居民水產品消費三唑磷農藥暴露風險評價表明水產品三唑磷殘留其膳食風險是較低的。