7例杜氏肌營養不良檢測分析

郭鵬波 葛麗麗 鄭州兒童醫院兒科醫學研究所 （河南 鄭州 450018）

內容提要： 目的：探索多重鏈接探針擴增技術（MLPA）檢測在杜氏肌營養不良檢測方面的應用價值。方法：對鄭州兒童醫院2018年3月～2018年8月收治的7例杜氏肌營養病例進行多重鏈接探針擴增技術（MLPA）+Sanger測序檢測。結果：隨機挑選7例DMD疑似病例及母親，通過多重鏈接探針擴增技術（MLPA）+Sanger測序檢測，7例為均陽性或攜帶者，4例患兒發病年齡為8月～8歲，其中3例患兒為運動障礙來醫院就診。結論：多重鏈接探針擴增技術（MLPA）檢測在杜氏肌營養不良檢測方面有重要應用價值，能檢測出大部分的患者，但是需要以Sanger測序方法作為補充。

假肥大性肌營養不良（DMD）又稱杜氏肌營養不良，位于X染色體短臂Xp21處的DMD基因發生缺失、重復或點突變導致[1]，發病率為1:3500[2]，初期病征3～7歲，像鴨子般搖搖擺擺的步態、腰椎前凸、經常跌倒，從地板上站立和攀登樓梯時出現困難，跌倒時站立困難。隨著年齡增長，肌肉病變萎縮越來越嚴重。到12～13歲時，患者便需倚助輪椅出入。患者的心臟肌肉也會因此病而引起變化，導致心肌病。可能發生心律不正，心臟衰竭等病癥。通常到20多歲就會因為心肌、肺肌無力而死亡[3]。目前沒有治愈的方法，診斷DMD就變得尤為重要。本文介紹一種多重鏈接探針擴增技術（MLPA），可以診斷DMD，使用MLPA技術可以同時檢測DMD基因所有外顯子的缺失重復，約占病因的70～80%。

1. 實驗方法

取新鮮或兩周內4攝氏度保存的EDTA抗凝全血，用QIAGEN試劑盒提取DNA，再用Nanodrop測量濃度，將DNA稀釋到20ng/μL，進行去下步驟的操作（荷蘭MRC公司MLPA試劑盒）：（1）取PCR反應管，各加入5μL DNA標本；……