糖尿病腎病患者血清胰島素抵抗指數、胰島素樣生長因子-1與炎性因子表達水平的相關性

魏靖 朱慧楠

(1中國科學院大學附屬北京懷柔醫院內分泌科，北京 101400；2中國人民大學醫院)

糖尿病腎病(DN)是最常見的糖尿病(DM)微血管并發癥之一，是DM最嚴重和危害最大的并發癥之一〔1～4〕。有研究〔5～8〕表明胰島素抵抗(IR)、胰島素樣生長因子(IGF)-1及炎性因子〔白細胞介素(IL)-6和腫瘤壞死因子(TNF)-α〕參與DM發病機制，本實驗對比單純DM和DN患者胰島素抵抗指數(HOMA-IR)及IGF-1、IL-6、TNF-α的基因水平，探討阻斷DM并發癥進程的可能性。

1 資料與方法

1.1研究對象 選取北京懷柔醫院2017年1月至2018年5月收治的DM患者193例，其中單純DM患者84例〔平均年齡(52.9±6.1)歲〕作為實驗1組，DN患者109例〔平均年齡(56.4±4.8)歲〕作為實驗2組；同期體檢的健康者40例〔平均年齡(53.2±2.5)歲〕作為對照組。實驗組病程2～9〔平均(6.46±1.03)年〕。入選的DM患者均符合《2013年版中國2型糖尿病防治指南》中的相關標準〔9〕，各組間一般資料具有可比性(P>0.05)，均為知情下自愿參與。

1.2實驗試劑和儀器 IGF-1、IL-6和TNF-α酶聯免疫試劑盒購于長春鼎國生物有限公司；引物購于上海生物工程有限公司；Trizol、反轉錄試劑盒、實時熒光定量試劑盒購于TAKARA公司。實時熒光定量PCR儀(ABI7300)，Biometra PCR擴增儀，Epoch酶標儀(Biotek公司，美國)。

1.3血清IGF-1、IL-6和TNF-α蛋白含量檢測 受試者清晨空腹抽取靜脈血5 ml，1 500 r/min離心10 min，留血清待測。采用酶聯免疫法檢測血清IGF-1、IL-6和TNF-α蛋白含量，嚴格按照試劑盒方法逐步加樣，顯色后在Epoch酶標儀450 nm處檢測。

1.4血清IGF-1、IL-6和TNF-α mRNA水平檢測 受試者清晨空腹抽取靜脈血5 ml，1 500 r/min離心10 min，留血清。Trizol 提取總RNA、反轉錄，每個樣本基因擴增3次，采用實時熒光定量PCR方法檢測IGF-1、IL-6和TNF-α mRNA水平，取Ct值均值，采用2-ΔΔCt表示目的基因相對表達水平。

1.5統計學分析 應用SPSS13.0軟件行t檢驗，相關性采用Pearson分析。

2 結 果

2.1各組HOMA-IR、血清IGF-1、IL-6和TNF-α蛋白含量及mRNA水平比較 與對照組比較，實驗1、2組HOMA-IR、血清IGF-1、IL-6及TNF-α蛋白含量及mRNA水平均顯著升高，且實驗2組各指標明顯高于實驗1組，組間差異均有統計學意義(P<0.05)，見表1。

表1 各組HOMA-IR、血清IGF-1、IL-6和TNF-α蛋白及mRNA含量的比較

與對照組比較:1)P<0.05；與實驗1組比較:2)P<0.05

2.2DN患者HOMA-IR、血清IGF-1水平與IL-6、 TNF-α水平的相關性 DN患者HOMA-IR、血清IGF-1水平與IL-6、 TNF-α水平呈正相關性，見表2。

表2 DN患者HOMA-IR、血清IGF-1水平和IL-6、TNF-α水平的相關性

3 討 論

DM患者的高血糖狀態不但影響患者生活質量，還能誘發DM并發癥加重病情。DN長期得不到控制就會出現腎小球硬化、腎小管重吸收功能喪失，伴隨死亡率上升〔4，6〕。因此，DM患者防治并發癥發生是治療關鍵。高血糖、高血脂能激活絲氨酸激酶應激信號通路，誘發胰島素受體及受體底物中絲氨酸激酶不斷上升，減弱胰島素的作用，從而造成IR，也就是胰島素的生物學效應低于正常水平〔6，10，11〕。IGF-1是單鏈顯性蛋白，在分子結構上與胰島素家族非常類似，與慢性腎臟病變呈正相關性，是評估慢性腎臟病的主要因素〔12,13〕。IL-6能夠激活肝細胞、脂肪細胞、血管內皮細胞分泌大量急性時相反應蛋白，降低胰島素受體的作用〔7，14〕。TNF-α能夠分泌促炎因子增加內皮細胞合成并釋放細胞因子，通過減少胰島素介導的葡萄糖及脂肪轉運誘發IR〔15，16〕。以上幾種因子都與胰島素作用密切相關。本實驗結果說明HOMA-IR、IGF-1、IL-6、TNF-α參與糖尿病的發病進程，可作為尋求阻斷DM進程藥物的新靶點；調控DM患者HOMA-IR及血清IGF-1水平，能有效降低炎癥因子IL-6、TNF-α水平，減輕炎癥反應，從而對DM并發癥防治具有指導意義。