胃癌患者腹水及外周血中乙醛脫氫酶1、胃泌素17表達觀察及其相關性分析

張晶晶，彭瓊

(合肥市第一人民醫院,合肥230000)

胃癌具有高發病率、高轉移率、高病死率特點，在我國發病率逐年增高，其中腹膜轉移是晚期胃癌死亡的首要原因之一[1,2]。因此研究胃癌的發生、發展及浸潤轉移至腹腔的機制，對預防胃癌患者腹水生成，降低胃癌病死率具有重要意義。乙醛脫氫酶1(ALDH1)是新發現的一種腫瘤干細胞標志物，在肺癌、食管癌等實體瘤中高表達[3,4]，在腫瘤轉移、復發及耐藥中起重要作用[5]。胃泌素17(G-17)為一種新型的腫瘤標志物，具有無創、簡便易行等優點，常用于癌前病變及胃癌篩查，被稱為“血清學活檢”，在臨床應用中具有重要價值[6]。兩者在胃癌腹腔轉移機制方面的研究較少[7]。本研究采用ELISA法檢測胃癌伴腹水患者腹水及外周血中ALDH1、G-17水平，觀察其水平變化，并探討兩者在胃癌患者腹水及外周血中的相關性，為初步探討兩者在胃癌腹腔轉移中的作用機制提供基礎。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 選擇2014年8月～2018年8月合肥市第一人民醫院消化內科門診及住院部確診的胃癌患者92例，入組前均未予放化療及手術治療，其中高分化癌5例、中分化癌49例、低分化癌38例。納入標準：入組胃癌患者均經胃鏡及病理學檢查確診，腹水組均經腹水穿刺脫落細胞學檢查陽性或經病理診斷，并排除其他可以引起腹水的非惡性疾病。排除標準：①炎癥感染性疾病或自身免疫性疾病；②近期大量使用抑酸劑、抗生素、糖皮質激素、非甾體藥物及胃黏膜保護劑；③合并有其他類型腫瘤；④孕婦或有嚴重心肺、肝腎功能不全；⑤經過放化療的胃癌或精神疾病。按其有無腹腔轉移分為腹水組及無腹水組，其中腹水組43例，男23例、女20例，年齡27～75(50.4±7.1)歲；無腹水組49例，男26例、女23例，年齡28～77(47.7±6.8)歲。另選取本院同期體檢中心確診為慢性非萎縮性胃炎患者25例作為對照組，其中男14例、女11例，年齡33～70(52.8±5.3)歲，均經胃鏡檢查提示正常胃黏膜，病理組織學檢查提示黏膜輕度慢性炎癥。三組性別、年齡有可比性。

1.2 腹水及外周血中ALDH1、G-17的檢測 晨起抽取研究對象空腹外周血6 mL，2 000 r/min離心8 min，取上層血清，-80 ℃冰箱保存待檢。抽取腹水組患者腹水200 mL，以3 000 r/min恒溫離心15 min，取上清液，-80 ℃冰箱保存待檢。采用ELISA法檢測腹水組腹水及各組外周血中的ALDH1、G-17水平。其中ALDH1試劑盒購自RayBiotech公司，G-17試劑盒購自芬蘭Biohit公司。

2 結果

2.1 腹水組腹水和各組外周血中ALDH1、G-17水平比較 腹水組腹水及外周血中ALDH1分別為(27.46±11.58)、(15.57±7.59 )ng/mL，G-17 分別為(50.53±25.47)、(35.36±20.68)pmol/L；無腹水組外周血中ALDH1、 G-17分別為(9.38±4.98) ng/mL、(23.65±8.79) pmol/L；對照組外周血中ALDH1、 G-17分別為(3.32±1.64) ng/mL、(7.67±6.23) pmol/L。 腹水組中腹水ALDH1、G-17水平高于外周血中(P均<0.05)；外周血中ALDH1、G-17水平比較，腹水組高于無腹水組和對照組(P均<0.05)，無腹水組高于對照組(P均<0.05)。

2.2 腹水組外周血及腹水中ALDH1、G-17水平的相關性 腹水組中，腹水和外周血中ALDH1水平與G-17水平呈正相關(r=0.592、P<0.05；r=0.523、P<0.05)；在無腹水組中，外周血ALDH1水平與G-17水平呈正相關(r=0.655、P<0.05)。

3 討論

胃癌是我國最常見的消化道腫瘤[8]，早期發現率低，易出現腹腔、肝、肺、骨等臟器轉移，根治性手術難度大，術后易復發，常年居我國惡性腫瘤病死率第一位。胃癌腹腔轉移時易出現腹水，是晚期胃癌的嚴重并發癥，也是導致患者死亡的重要原因，一旦患者出現腹水，5年生存率不到3%，平均生存時間和中位生存時間分別為6.5個月和3.1個月。

ALDH1是乙醛脫氫酶家族新發現的一種腫瘤干細胞(CSC)標志物[9,10]，是各組織中正常干細胞和腫瘤干細胞生長、分化的必需物質，在神經系統、造血系統的干、祖細胞中明顯升高[11]。ALDH1在腫瘤組織中表達高于癌旁組織，臨床分期越高、淋巴結轉移越早、預后越差的患者，ALDH1表達水平越高[12]，ALDH1與腫瘤分期、有無轉移及預后有明顯相關性[5,13]。ALDH1在腫瘤轉移過程中的具體機制尚不明確，可能通過上皮間質轉換(EMT)、血管內皮生長因子(VEGF)中導致腫瘤細胞浸潤轉移[14,15]。本研究發現，相對無腹水組，腹水組患者外周血中ALDH1表達升高，且腹水組患者腹水中ALDH1表達高于外周血中,提示ALDH可能通過某些機制，如EMT、VEGF，發揮CSC的作用，導致胃癌發展、轉移，腹水生成。

G-17是胃竇和十二指腸G細胞合成和分泌的一種胃泌素，在消化道腫瘤患者外周血及癌組織中高表達，臨床分期越高者其表達水平越高[16]。因此，目前認為G-17在胃癌疾病篩查及疾病早期診斷過程中可能發揮重要作用，臨床中廣泛用于癌前疾病及早期胃癌篩查[17,18]。G-17與進展期胃癌，特別是胃癌伴腹腔轉移關系的研究較少，其在腫瘤發展、侵襲、轉移中的作用機制尚未完全明確。目前研究認為，G-17可能通過與其受體，如胃泌素與膽囊收縮素-2受體(CCK-2R)結合，刺激多個信號傳導路徑，從而導致腫瘤細胞增殖。此外，G-17可通過激活混合譜系激酶3及INK1等激酶，活化金屬基質蛋白酶[19]，降解細胞外基質，進而促進腫瘤細胞的浸潤及轉移[20～22]。本研究發現，在腹水組患者中，其外周血中G-17表達水平較無腹水組及對照組升高，且腹水中G-17表達高于患者外周血，提示在胃癌腹水轉移過程中，G-17可能通過與CCK-2R等受體結合啟動信號傳導通路或者通過金屬基質蛋白酶作用導致腫瘤發展、轉移。

腫瘤發展和轉移是一個漸進式的過程，涉及多級反應。在胃癌腹腔轉移形成惡性腹水過程中，ALDH1通過VEGF促進血管內皮細胞增殖，導致腫瘤和新生組織中血管生成；而G-17通過與CCK-2R結合發揮作用，在血管生成中增強內皮細胞活性，增加微血管和小靜脈的通透性從而促進腫瘤轉移[23]；由此考慮兩者可能通過相同或者相近的機制協同作用，促進和加速腫瘤發展、轉移。本研究發現，在腹水組中，腹水和外周血中ALDH1表達水平與G-17水平呈正相關；在無腹水組中，外周血ALDH1水平與G-17水平呈正相關；提示ALDH1和G-17可能通過上述機制或其他機制，共同促進和加速腫瘤發展、轉移。

綜上所述，胃癌患者腹水及外周血中ALDH1、G-17異常高表達，且具有高度相關性，可能通過某種協同機制，促進胃癌進一步轉移、惡化。