蛋雞H5亞型禽流感免疫及免疫抗體監(jiān)測(cè)

李敬云

（盧龍縣陳官屯動(dòng)物防疫站，河北盧龍 066400）

1 禽流感的概況

禽流感（Avian Influenza，AI）是目前嚴(yán)重危害我國(guó)養(yǎng)禽業(yè)的主要疫病，世界動(dòng)物衛(wèi)生組織（OIE）將其列為必報(bào)的動(dòng)物疫病。根據(jù)禽流感病毒致病性的不同，可以將禽流感分為高致病性禽流感、低致病性禽流感和物質(zhì)并行禽流感。最早于1878年于意大利發(fā)現(xiàn)，呈世界性分布，以其高死亡率、傳播速度快，給養(yǎng)禽業(yè)造成毀滅性的打擊。禽流感由A型流感病毒（AIV）引起的一種禽類急性傳染性疾病。禽類感染后表現(xiàn)為呼吸道癥狀、食欲減少、急性高度致死性的全身性疾病等多種癥候。禽流感不僅能引起雞、鴨、鵝等禽類發(fā)病、死亡，而且能引起哺乳動(dòng)物和人發(fā)病、死亡，嚴(yán)重地威脅人類的健康和生命。

1.1 禽流感病毒

流感病毒屬正粘病毒科，流感病毒屬。目前已知的有15種特異的HA亞型和9種特異的NA亞型。禽流感病毒對(duì)外界環(huán)境的抵抗力不強(qiáng)，對(duì)高溫、紫外線、各種消毒藥敏感，容易被殺死。病毒在70℃經(jīng)幾分鐘既能被滅活。但存在于有機(jī)物如糞便、鼻液、淚水、唾液、尸體中的病毒能存活很長(zhǎng)時(shí)間。因此，嚴(yán)重污染的糞便是控制禽流感的主要問(wèn)題。健康禽通過(guò)呼吸道和消化道感染，引起發(fā)病。許多家禽和野禽、鳥類都對(duì)禽流感病毒敏感，并從其體內(nèi)分離出病毒。目前國(guó)內(nèi)外的禽類疫情是由H5N1血清型引起的高致病性禽流感。禽流感沒(méi)有特效的藥物治療，因此疫苗免疫是控制本病最有效的方法。為了更好地對(duì)當(dāng)?shù)氐碾u群進(jìn)行有效的疫苗免疫，制定科學(xué)的免疫程序，確定雞場(chǎng)的合理首免日齡，設(shè)計(jì)本次監(jiān)測(cè)試驗(yàn)。

1.2 禽流感的臨床癥狀和病理變化

本病患禽特征性癥狀為冠髯發(fā)紺、出血，腫頭流淚，呼吸困難，衰竭死亡，部分病例可能表現(xiàn)明顯的共濟(jì)失調(diào)等神經(jīng)癥狀。病理變化特點(diǎn)是腳脛及多處皮膚出血，皮下水腫，眼結(jié)膜出血，整個(gè)消化道（從口腔至泄殖腔）黏膜出血、壞死、潰瘍。

本病潛伏期的長(zhǎng)短隨家禽所感染病毒的毒力、病毒數(shù)量、感染途徑等不同有較大差異，由幾小時(shí)至幾天不等。其病型根據(jù)臨床癥狀及病理變化不同可分為急性敗血型、急性呼吸道型和非典型三類。第一類為急性敗血型禽流感，病禽主要的癥狀表現(xiàn)為高度沉郁、昏睡，張口喘氣，流淚流涕（在水禽有時(shí)可見(jiàn)眼鼻流出膿樣液體），冠髯發(fā)紺、出血，頭頸部腫大，急性死亡。部分病例出現(xiàn)共濟(jì)失調(diào)、震顫、偏頭、扭頸等神經(jīng)癥狀。病理變化特征是眼角膜混濁，眼結(jié)膜出血、潰瘍；翅膀、嗉囊部皮膚表面有紅黑色斑塊狀出血等；第二類為急性呼吸道型禽流感，病禽主要表現(xiàn)為流淚流涕、呼吸急促、咳嗽、打噴嚏，鼻竇腫脹，下痢，部分發(fā)生死亡（在與新城疫病毒或其他禽I型副黏病毒株合并感染時(shí)，死亡率較高）。主要病理變化為喉頭氣管出血，鼻竇積聚分泌物，眼結(jié)膜水腫出血，有時(shí)亦見(jiàn)類似急性敗血型禽流感的病理變化。第三類為非典型禽流感，病禽一般表現(xiàn)為流淚、咳嗽、喘氣、下痢，產(chǎn)蛋率大幅度下降（下降幅度為50～80%），并發(fā)生零星死亡。大體病理變化為鼻竇、氣管、氣囊、腸道有一些滲出性炎癥，有時(shí)見(jiàn)氣囊有纖維素性滲出，囊壁增厚，母禽發(fā)生卵黃性腹膜炎，輸卵管時(shí)有炎癥滲出物。

這些癥狀及病理變化中的任何一種都可能單獨(dú)或以不同的組合出現(xiàn)。有時(shí)疾病暴發(fā)很迅速，在沒(méi)有明顯癥狀時(shí)就已發(fā)現(xiàn)雞死亡。

2 禽流感的免疫

2.1 規(guī)范免疫操作

禽流感疫苗一般為肌肉注射免疫。通常將疫苗注射到胸部、腿部肌肉或翅根肌肉。

選用胸部肌肉注射時(shí)，一般應(yīng)將疫苗注射到胸骨外側(cè)2～3cm的表面肌肉內(nèi)。注意進(jìn)針?lè)较驊?yīng)與雞體保持45°角傾斜向前進(jìn)針，以避免刺穿體腔或刺傷肝臟、心臟等，對(duì)體格較小的雞尤其要注意。

腿部肌肉注射免疫的部位通常應(yīng)選在無(wú)血管處的外側(cè)腓腸肌。進(jìn)針?lè)较驊?yīng)與腿部平行，順著腿骨方向并保持與腿部30°～45°角進(jìn)針，將疫苗注射到腿部外側(cè)腓腸肌的淺部肌肉內(nèi)，以避免刺傷腿部血管。

2月齡以上的雞可以用翅根肌肉注射的方法。要選在翅膀根部肌肉多的地方注射。

無(wú)論哪個(gè)部位，肌肉注射時(shí)，應(yīng)注意選用適當(dāng)長(zhǎng)度和粗細(xì)適中的針頭，避免垂直進(jìn)針，刺入的深度也不能多大。

2.2 建立免疫檔案

免疫結(jié)束后，應(yīng)及時(shí)填寫免疫檔案。內(nèi)容主要包括：戶主姓名、地址、家禽種類和數(shù)量、免疫日期、疫苗名稱和生產(chǎn)批號(hào)、免疫人員等。

2.3 禽流感的免疫程序

禽流感的免疫都是滅活苗。使用滅活苗的好處是可以避免母源抗體的影響。對(duì)于種雞、蛋雞一般在7～14日齡初免，3～4周后，進(jìn)行一次加強(qiáng)免疫。散養(yǎng)禽則是春秋兩季各進(jìn)行一次集中免疫，每月定期補(bǔ)免。在發(fā)生疫情時(shí)，要對(duì)受威脅區(qū)域的所有家禽進(jìn)行一次強(qiáng)化緊急免疫。

3 禽流感的免疫監(jiān)測(cè)結(jié)果及分析

3.1 蛋雞選擇

選取65家雞場(chǎng)，免疫禽流感H5N1Re-8-6疫苗后18～23d每場(chǎng)選取蛋雞20只，心臟或翅靜脈采血，每只雞采取2ml血液，靜置，分離血清，在實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行HI監(jiān)測(cè)。

3.2 試驗(yàn)抗體監(jiān)測(cè)結(jié)果

經(jīng)過(guò)檢測(cè)65家養(yǎng)禽場(chǎng)中有2戶免疫抗體不合格，其他63戶免疫禽流感H5N1Re-4-5亞型油乳劑滅活疫苗的蛋雞抗體水平均在6（Log2）到11（Log2）之間，抗體最低6（Log2），最高達(dá)到11（Log2），平均水平為8.7（Log2），有較高的保護(hù)率。

4 結(jié)論與建議

4.1 免疫日齡的選擇與免疫效果有很大的關(guān)系

原因有以下兩方面，一是母源抗體的干擾。一定水平的母源抗體具有一定的保護(hù)作用，且母源抗體對(duì)抗原有明顯的中和作用。二是首免日齡的選擇特別關(guān)鍵。首免日齡太早，雞只發(fā)育不完全，對(duì)疫苗應(yīng)答較差。另外10日齡前雛雞免疫其他疫苗較多，對(duì)免疫系統(tǒng)的刺激也較大，導(dǎo)致免疫無(wú)應(yīng)答或者應(yīng)答效果較差，這就直接影響禽流感疫苗的免疫效果。目前公認(rèn)的雛雞最佳首免時(shí)間應(yīng)在2周左右。

4.2 免疫效果與健康狀況、飼養(yǎng)條件有很大關(guān)系

在同樣的飼養(yǎng)管理?xiàng)l件下，同一群雞在免疫疫苗以后，抗體效價(jià)離散度也有較大差別，說(shuō)明雞群的免疫效果與健康狀況、生物安全措施等有很大關(guān)系。不同日齡和品種的家禽對(duì)免疫的敏感性也不一致；抗體產(chǎn)生的時(shí)和多大道德水平也存在一定差別。一般認(rèn)為：經(jīng)2次免疫接種后禽類的保護(hù)力很高，免疫有效期可達(dá)4～6個(gè)月。

4.3 免疫是預(yù)防和控制禽流感最有效的手段

HI實(shí)驗(yàn)主要檢測(cè)血清中針對(duì)HA蛋白的抗體，具有特異性。HA抗體的產(chǎn)生在一定程度上反映機(jī)體對(duì)病毒感染的抵抗力水平。因此，免疫是預(yù)防和控制禽流感最有效的手段。

在蛋雞生產(chǎn)過(guò)程中，長(zhǎng)期堅(jiān)持對(duì)禽流感進(jìn)行血清學(xué)監(jiān)測(cè)是十分必要的。這對(duì)疫苗的選擇、疫苗免疫效果的考察以及免疫計(jì)劃的執(zhí)行是非常有用的。通過(guò)血清學(xué)監(jiān)測(cè)，可以準(zhǔn)確掌握疫情動(dòng)態(tài)，根據(jù)免疫抗體水平科學(xué)地進(jìn)行綜合免疫預(yù)防。