本操作規范適用于從事非洲豬瘟(ASF)病原分子生物學檢測等實驗活動的消毒和無害化處理。
1.1 消毒劑推薦用于ASF實驗活動的消毒劑包括75%乙醇、0.8%氫氧化鈉、含2.3%有效氯的次氯酸鹽、3%的鄰苯基苯酚、3%的碘化合物。75%乙醇處理5~10 min,其余都是處理30 min。配制好的消毒劑,應保存在帶蓋的塑料容器中,并在使用后確保蓋子擰緊。
1.2 樣品接收環節和消毒樣品的接收應由專人負責,接到樣品時,首先檢查外包裝有無損壞,并進行登記,如有破損應立即報告生物安全負責人。不管外包裝有無損壞,都要在外包裝(采樣箱)四周噴灑消毒劑(含2.3%有效氯的次氯酸鹽)。如果外包裝是紙箱子,則打開紙箱子,露出泡沫箱,然后在紙箱子內側和泡沫箱四周全部噴灑消毒劑,作用30 min(為防止噴灑的消毒液干燥,中途可再噴灑一次)。除特殊情況外,送樣單位一般應使用采樣箱進行樣品運輸。
1.3 樣品開箱環節和消毒樣品處理由專人負責,打開樣品的人員應當了解樣品對身體健康、實驗室環境的潛在危害,接受如何采用常規預防措施的培訓。樣品的處理應在生物安全柜內進行,操作過程中盡可能防止氣溶液產生。在樣品箱內側充分噴灑消毒劑,翻動冰袋,再次噴灑,保證所有角落和內壁均被噴灑消毒劑,不留死角。
1.4 生物安全柜內的消毒樣品處理完畢,用新的干凈密封袋盛裝余樣,做好標記和密封,外表面噴灑消毒劑,然后保存在-70℃非洲豬瘟樣品保存專用冰箱,檢測結果為陰性的樣品,經121℃、15 min高壓滅菌后集中放置于-20℃樣品暫存冰箱,定期由有資質的無害化處理公司處理。生物安全柜內的物品清理完畢后,對柜壁四周用消毒劑充分噴灑消毒,作用30 min(為防止噴灑的消毒液干燥,中途可再噴灑一次)。污染的一次性材料和產生的廢棄物用醫療垃圾黃色塑料袋裝好,并撕一小片高壓指標帶(約5 cm)稍微扎口(不能太緊),然后在袋子口部和外面噴灑消毒劑,待高壓處理。
1.5 剪刀、鑷子等可重復使用的物品消毒對于剪刀、鑷子等可重復使用的物品,可用牛皮紙包好后進行高壓滅菌,再清洗消毒后使用。如果可以浸泡消毒的,則用塑料小盒盛裝倒上消毒劑浸泡處理30 min;不能浸泡的,則噴灑消毒劑作用30 min(為防止噴灑的消毒液干燥,中途可再噴灑一次)。正常情況下,儀器、地面均噴灑消毒。如果出現溢灑情況,則先用吸水紙清除污染物,再噴灑消毒作用30 min(為防止噴灑的消毒液干燥,中途可再噴灑一次)。
1.6 實驗室環境消毒
1.6.1 室內空氣消毒每次實驗完成后,用紫外線燈對室內空氣進行消毒,紫外線燈的平均功率為1.5 W/m3,照射時間≥30 min。
1.6.2 地面消毒每周及發生樣品溢灑時應進行實驗室地面消毒。實驗室地面要實行濕式拖掃。可用0.4%過氧乙酸拖地或用有效氯濃度為0.1%~0.5%(1~5 g/L)的消毒劑噴灑或拖地,噴灑消毒劑的用量不得少于10 mL/m2。各實驗室拖把應專用,污染區和清潔區不得混用。使用后,用上述消毒液浸泡30 min,用水洗凈,懸掛晾干,最好放在陽光下晾曬后備用。
消毒完畢,水分蒸發后,臺面、內壁等可能會出現白色結晶現象,可用蒸餾水噴灑擦拭清理干凈。
ASF實驗活動中產生的垃圾、廢棄物等均需進行無害化處理。放置高壓指示帶或放置化學指示卡。最佳的無害化處理方法是121℃高壓蒸汽處理20 min。處理完畢,查看化學指示卡和高壓指示帶的變色情況,然后做好記錄。