取干燥無霉變豌豆粒大小的玉米砂粒,最好經粉碎機加工,用篩子去除面粉和玉米皮,淘洗干凈后置于石灰水清液(pH8左右)中浸泡2~3 h,再淘洗至無渾濁,瀝水3~5 min,放入蒸鍋蒸10~20 min至八成熟,盛入容器內,按每千克干粒加入磷酸二氫鉀3 g,白糖20 g,復合肥8 g,攪拌溶化冷卻呈砂粒狀顆粒,如果不呈砂粒狀說明蒸的時間太長,應重新置備,所以掌握好蒸玉米砂很關鍵。將制作好的玉米砂分別裝入試管(干粒重10 g,用于轉管生產和母種分離),用木棒輕壓實,用濕棉塞(使用時捏擠至無水珠滴落為宜)封口,以手提棉塞頭試管不掉下為宜,每7支扎成一捆,即可滅菌。用家用壓力鍋滅菌,先向鍋內注水1.5 kg,試管直立于鍋底,用繩將鍋內小捆扎成一體。調大火至水開后蓋上鍋蓋,排氣孔排氣5 min,限壓閥噴蒸汽時開始計時,維持40~50 min,冷卻后取出備用。也可用大鍋常壓滅菌,方法是鍋蓋四周排汽開始計時,維持2.5 h,同樣能達到滅菌效果。無論用哪種方法滅菌,要注意試管棉塞不要挨著鍋壁,以防冷凝水浸濕棉塞。停火后冷卻至30℃以下開蓋取出,這也是滅菌的關鍵。
用甲醛和高錳酸鉀熏蒸接種箱10~15 min,試管用75%酒精擦拭消毒。按常規接種方法進行操作。
當繼代或傳代母種試管內的菌絲萌發長至1~2 cm時,試管口棉塞剪齊與管口齊平,取白色蠟燭2支放入直徑約5~6 cm的空罐內熔化形成蠟液并煮沸,迅速將剪好棉塞試管倒立,入溶沸的蠟液浸泡10 s,待蠟液不產生氣泡時,自然冷卻直至蠟燭的溶液與棉塞融合凝固(起隔絕空氣作用),置室內陰涼黑暗處,可保存1~2年。