無創DNA檢測在唐氏綜合征產前篩查中的作用

瞿 敏

（宜興市第二人民醫院婦產科，江蘇 無錫 214200）

唐氏綜合征是因染色體異常導致的疾病，以先天智力障礙、先天畸形為主要特征[1]。染色體異常與基因具有直接關系，在患兒出生后在進行治療，效果欠理想。因此，加強孕婦唐氏綜合征產前篩查，是避免唐氏綜合征患兒發生的主要手段。以往臨床多應用血清學篩查，該方法診斷準確率低，診斷效果不佳。無創DNA檢測是新型的診斷方法之一，本次研究對唐氏綜合征產前篩查孕婦1000例分析，探究無創DNA檢測的應用價值，并作如下報道。

1 資料與方法

1.1 基礎資料

擇取2017年1月～2018年1月在我院進行唐氏綜合征產前篩查孕婦80例為研究對象，孕婦年齡范圍22～34歲，平均年齡（27.9±1.6）歲，孕周15～19+6周，平均孕周（17.1±1.8）周，所有孕婦均為單胎，無妊高癥、糖尿病等疾病。

1.2 方法

予以孕婦均血清學篩查、無創DNA檢測，具體的方法如下：（1）血清學篩查：抽取孕婦空腹靜脈血2～3 ml，離心機進行血清分離，將血液標本置于-20℃環境下保存，1周內完成檢測。采取酶聯免疫法對血清標記物甲胎蛋白（AFP）、人類絨毛膜性腺激素（F-βhCG）檢測，操作嚴格按照說明書進行。（2）無創DNA檢測：抽取孕婦靜脈血3～5 ml，分離血漿，將其置于-80℃環境下，提取血漿中胎兒游離的DNA，擴增、測序處理在12-plex高通量Hiseq平臺上進行，檢測后，對檢測數據進行生物學分析，并對孕婦外周血游離胎兒DNA片段檢測，處理測序結果，結合孕婦的年齡、體重、超聲檢查結果、預產期、采血時孕周等綜合指標分析，對胎兒的唐氏綜合征風險進行計算。（3）核型分析：對于檢測為高危的孕婦，在其孕17周～25周時，在與孕婦、孕婦家屬溝通，待其同意后，對其進行二維超聲引導，實施羊膜腔穿刺，抽取孕婦羊水，劑量約20 ml，對羊水細胞進行細胞培養，待時機成熟后，獲取細胞，并予以低滲、固定等處理，進行染色體制備，G顯帶，觀察其染色體核型分析。對于檢測中低危孕婦，需要對孕婦的妊娠結局予以追蹤隨訪。

1.3 觀察指標

對孕婦經過唐篩檢查后確診為中高風險的孕婦采取無創DNA檢測，并以羊膜腔穿刺技術檢查結果為金標準，觀察應用無創DNA檢測的準確率，探究無創DNA檢測用于唐氏綜合征產前篩查中的診斷價值。血清學篩查唐氏綜合征風險≥1:280為高風險，在1:280～1:1000之間為中風險，唐篩陽性標準如下：唐氏綜合征風險＞280；唐氏綜合征的診斷金標準如下：經羊膜腔穿刺術檢查胎兒羊水細胞染色體核形分析證實[2]。

1.4 統計學方法

SPSS 23.0統計學軟件用于指標數據處理分析，用（%）表示計數資料，x2檢驗；以P＜0.05為差異具有統計學意義。

2 結果

2.1 唐篩檢出率

80例開展唐氏綜合征產前篩查孕婦經過常規糖篩檢查，結果顯示為中風險+高風險孕婦共7例，占比例為8.75%。

2.2 無創DNA檢測準確率

7例中高風險孕婦經過無創DNA檢測，結果顯示，有1例出現高風險，占比例為14.29%，1例高風險孕婦經過羊水穿刺分析，染色體核型檢查結果確診為唐氏綜合征，無創DNA檢測準確率為100%。

3 討論

唐氏綜合征是一種遺傳性疾病，胎兒出生后表現為面容特殊、智力低下等癥狀，影響患兒的生活。目前，唐氏綜合征尚無特效治療方法，一旦該疾病發生，對患兒健康造成極大影響，加重了患兒家庭的經濟負擔。對孕婦產前進行篩查，可以減少唐氏綜合征發生風險，對保證胎兒的健康安全具有重要的意義。

血清學篩查是結合孕婦年齡、孕周而開展的檢查方法，主要通過檢測血清中胎兒蛋白、絨毛促性腺激素進行診斷，從而對唐氏綜合征進行診斷，該檢測方法雖然可以達到一定的診斷效果，但假陽性率高，一旦發生誤診、漏診，則會增加唐氏綜合征的發生率。無創DNA檢測是通過對孕婦外周血游離胎兒DNA片段檢測結果分析進行診斷的方法。與血清學篩查，無創DNA檢測具有操作簡單，診斷準確率高的特點，且該方面無年齡、孕周限制，能有效彌補血清學篩查的不足。雖然無創DNA檢測診斷準確率高，但是存在一定的局限性，詳細分析如下：第一，對于少數血漿中胎兒游離DNA濃度過低的孕婦，失敗性高，需要采取進行抽血檢測，延長了檢測的周期；第二，無創DNA檢測方法不適用于染色體中存在微重復、嵌合體、微缺失、等結構異常孕婦，此外，對于夫妻雙方中一方存在染色體異常的患者均不可以試試無創DNA檢測，在臨床實踐中還發現，對于近期4周內接受過移植手術、免疫或者肝細胞治療的孕婦也不是適用于無創DNA檢測，其原因是上述情況容易導致孕婦體內殘留其他的DNA片段，進而影響無創DNA檢測的準確性；第三，與血清學唐篩比較，應用無創DNA檢測的費用高，對于存在經濟問題的家屬，不容易接受，因此，在對孕婦開展無創DNA檢測前，需要詳細告知孕婦、孕婦家屬相關的問題，做好充分的溝通，使其知曉無創DNA檢測的風險性、局限性、費用等問題，在孕婦同意后開展；第四，因目前醫學檢測技術水平限制，且不同孕婦個體差異性的不同，容易出現假陽性。李盼盼[3]等學者研究中指出，無創DNA檢測的準確率、特異率均比血清學篩查結果，證實了該檢測方法應用的價值。分析研究結果，經過常規糖篩檢查，擇選的80例開展唐氏綜合征產前篩查孕婦中，存在中風險+高風險孕婦共7例（8.75%），中高風險孕婦經過無創DNA檢測，出現高風險孕婦1例（14.29%），1例高風險孕婦經過羊水穿刺分析，確診為唐氏綜合征，無創DNA檢測準確率為100%，再次對無創DNA檢測的有效性予以證實。筆者指出，因血清唐氏篩查診斷的準確率僅在70%左右，漏診率高，因此，對于血清唐氏篩查中高風險孕婦可以進一步開展無創DNA檢測，并對其檢測為高風險的孕婦予以羊水穿刺核型分析，從而達到確診的目的。此外，對于高齡孕婦，因開展羊水穿刺風險性高，普通血清唐氏篩查診斷效果不理想，則無此DNA檢測可以作為最佳的檢測方法之一。

綜上所述，唐氏綜合征產前篩查應用無創DNA檢測，準確率高，值得在臨床中廣泛推廣與應用。