超高效液相色譜法應用于利福平藥物檢驗效果及價值分析

袁文彬

江西省吉水縣疾病預防控制中心檢驗科，江西 吉安 331600

進入21世紀后，社會得到快速發展，人民生活水平得到很大的提高，因此，人們對藥品、食品質量安全的關注越來越廣泛。常見的藥物檢驗方法包括高效液相色譜、超高效液相色譜等。這兩種檢驗方法均具有操作簡單、速度快、靈敏度高、效率高、應用范圍廣等優勢，雖然原理基本相似，但又有所不同。超高效液相色譜法是一種分析分離技術，應用過程中不僅操作快捷，而且十分高效，用于食品檢驗、藥品檢驗時，可實現檢驗自動化。有研究證實[1]，在藥物檢驗中，由于超高效液相色譜法色譜柱粒徑更小，從而檢驗速度、質量、效率、安全性、準確性均比高效液相色譜法高。因此，本文就對比分析這兩種方法在藥物檢驗中的應用效果，具體如下。

1 材料與方法

1.1 材料儀器研究所用藥物：利福平60片(國藥準字H32020550生產單位：蓋天力醫藥控股集團制藥股份有限公司規格：0.15g)。研究所用儀器包括常規液相色譜儀和超高效液相色譜儀兩組儀器。

1.2 研究方法對照組行高效液相色譜法檢驗，方法具體如下：選取30片利福平研磨成粉末狀，再取一個50mL量瓶把藥粉置入，行加流動溶解、稀釋、濾過一系列操作后，再放到紫外線中進行掃描，紫外線強度設置為200～400nm，末端吸收設置為220nm，再實施波長測定，各吸20μL的稀釋液，注入液相色譜儀中，記錄好色譜圖記。觀察組行超高效液相色譜法檢驗，操作方法具體如下：選取30片利福平研磨成粉末狀，行稀釋、濾過相關操作之后，各吸取20μL的稀釋液，再將稀釋液注入超高效液相色譜儀，仔細觀察色譜圖變化情況，同時做好詳細記錄。最后對兩種方法的應用結果進行對比分析。主要比較兩組的徹底分離率及所用時間[2]。

1.3 統計學處理本研究用SPSS 21.0分析所得數據，分析藥片所用時間等計量資料用()表示，進行t檢驗；藥片徹底分離率等計數資料(例/%)，進行χ2檢驗，組間數據差異為P＜0.05，則具統計學意義。

2 結果

在利福平片檢驗色譜圖記錄結果顯示，觀察組平均分析時間為(3.11±0.38)min、徹底分離率為100%，對照組高效液相色譜法分析時間為分(14.63±3.25)min、83.33%，觀察組分析時間更短，分離率更高，兩組比較差異均有統計學意義(P＜0.05)，見表1。

表1 兩組方法對利福平片試驗影響的比較

3 討論

高效液相色譜是一種重要的分離分析方法，主要把液相色譜與氣相色譜理論技術進行結合而形成。高效液相色譜是色譜法中的一個重要分支，由于流動相成分是液體，因此，流動相在壓力作用可輕松被擠壓到固定相中。高效液相色譜具有靈敏度高、操作簡單、效率高、應用范圍廣、組分易回收等優勢，因此成為常用的藥物分析方法。高效液相色譜法應用于藥物鑒別分析時，由于樣品組分的結構、性質等在實驗過程對藥物保留時間產生一定的影響，結構、性質變化容易導致藥物的出峰順序出現差異，因此，應根據供試品的含量進行合理實驗。

超高效液相色譜是一種新型的液相色譜技術，采用小型顆粒填料色譜柱、超高壓系統等，彌補了在復雜環境下無法保證檢驗質量的缺失，比高效液相色譜更具優勢[3]。超高效液相色譜技術是重要的藥品檢測分析方法，能夠適應更復雜的環境，在高壓、高速環境中，仍能確保藥物有效分析、高效分離，確保檢驗質量和效率，有效適應藥物分析測量高效率的要求，在藥物檢測中應用越來越廣泛。上世紀九十年代，首次對超高效液相色譜系統進行試驗，取得令人滿意的試驗結果。高效液相色譜、超高效液相色譜雖然檢驗方法的實驗原理相似，但又有明顯差異，主要差異就是色譜柱粒徑的大小之別，超高效液相色譜粒徑(1.6μm)，而高效液相色譜粒徑為(5μm)，粒徑越小，則有效增加柱子壓力，大大促進靈敏度、徹底分離率的提高。與高效液相色譜法比較，超高效液相色譜法的靈敏度、速度、分離度均明顯提高，在藥物分析領域中是非常重要的分析技術和檢驗手段，且更具研究價值。胡青等[4]文獻指出，超高效液相色譜法應用于藥品檢驗中，表現出藥品組分容易吸收、分離速度快、敏感度高、樣品處理簡單、藥物成分分離高效率等諸多優勢。

本研究中，采用不同的檢驗方法對利福平藥物進行分組檢驗，兩組色譜圖記錄結果顯示，對照組高效液相色譜法的分析時間為(14.63±3.25)min，而觀察組所用時間僅為(3.11±0.38)min，且徹底分離率高達100%，明顯高于對照組的83.33%，組間差異對比存在統計學意義。該結果表明，超高效液相色譜法應用于藥品檢驗，能夠在藥物分析中準確、快速的檢驗出藥物組成成分，且具有較高的通透量，在藥物檢驗中所發揮的重要作用，能夠提高藥物檢驗的質量，應用價值明顯更高。與高效液相色譜法比較，超高效液相色譜法應用于藥物檢驗中更具優勢：①敏感度更高，超高效液相色譜粒徑減小，微粒色譜峰縮小，促進樣品雜質得到徹底分離，降低基質效應，從而提高檢驗敏感度和分離度。②大大縮短分離時間。在檢驗條件相同時，色譜柱的粒徑越小，色譜柱則越短，分離流速則大大提高，有效縮短分離時間。超高效液相色譜法色譜柱粒徑比高效液相色譜法小3倍左右，因此，大大提高分離流速，縮短分離時間[5]。③分離度更高，由于粒徑平方根和微粒的分離度呈現出反比關系，超高效液相色譜法粒徑小于高效液相色譜法粒徑，因此，能獲得更高的柱效，從而促進分離度的提高。④環境適應性更強。在高壓、高速的環境下，高效液相色譜法無法對樣品進行分離，更不能保證分離質量不降低，而超高效液相色譜法則有效改善了這一缺點，在復雜環境中，仍能高效分離樣品，確保分離質量，保證藥物分析檢測中的安全性[6]。

綜上所述，超高效液相色譜技術在藥物分析的應用中具有粒徑極小、靈敏度高、分離度高、時間短、環境適應性強等優勢，從而越來越受到社會的廣泛關注。由此可見，超高效液相色譜應用于藥物檢驗中，取得顯著的效果，有效提高藥物的檢驗質量和檢驗效率，有效保障藥物安全，具有重要的研究及應用價值。