氣相色譜儀測定蔬菜有機磷類農藥殘留時標樣校正曲線對測定結果的影響

賈月波 郭浩

【摘要】 通過不同標樣濃度下校正曲線對蔬菜有機磷進行加標回收試驗，研究有機磷類農藥單點、多點標樣濃度下標準曲線的濃度值對農藥殘留測定結果的影響，試圖尋找準確性良好的有機磷類農藥殘留檢測方法，為農產品質量安全提供有效、準確依據。

【關鍵詞】 氣相色譜儀;校正曲線;有機磷;農藥殘留

【DOI編碼】 10.3969/j.issn.1674-4977.2019.02.012

Abstract： Through the calibration curves under different sample concentration of vegetables organic phosphorus standard addition recovery test，the research of organic phosphorus pesticide single point，multi-point sample concentration under the standard curve of density on the result of determination of pesticide residues， trying to find a good accuracy of organic phosphorus pesticide residues detection method，provides the effective and accurate basis for the quality and safety of agricultural products.

Key words： gas chromatograph;calibration curve;organic phosphorus;pesticide residue

隨著經濟技術的發展和法規政策的完善，農藥的品種越來越多，農產品質量安全也越來越受到人們的重視，農產品質量安全、農藥殘留、農產品檢驗等詞語也出現在人們的日常生活。因此，農產品檢驗檢測技術也隨之快速發展，而驗證農產品檢驗檢測技術，加標回收試驗就成了最好的選擇。

在本次加標回收試驗中，通過檢驗回收率值來探究蔬菜有機磷類農藥殘留時標樣校正曲線的選擇對測定結果是否有影響以及影響的大小，從而確定日常工作中蔬菜有機磷類農藥殘留測定時標準曲線的選擇，確保農產品質量的安全，建立快速、靈敏、簡便、準確的農產品檢驗檢測方法。

1 試驗部分

1.1 執行標準

試驗根據NY/T 761-2008《蔬菜和水果中有機磷、有機氯、擬除蟲菊酯和氨基甲酸酯類農藥多殘留的測定》標準執行。

1.2 試驗儀器

（1）安捷倫氣相色譜儀7890B;（2）火焰光度檢測器（FPD檢測器）;（3）色譜工作站（7890 Chemstation）;（4）IKA T-18型高速勻漿機;（5）奧特賽恩斯MTN-5800A型氮吹濃縮裝置;（6）IKA漩渦混合器。

1.3 試驗試劑

乙腈（色譜純），丙酮（色譜純），氯化鈉（分析純）。

1.4 樣品前處理

1.4.1 提取

準確稱取25.0 g黃瓜試樣放入燒杯中，并加入50 mL乙腈溶液，放入勻漿機中高速勻漿2分鐘后倒入盛有5.0～7.0 g氯化鈉的100 mL具塞量筒中，收集濾液約50 mL，直到不再滴有濾液為止，蓋上蓋子，劇烈搖蕩1分鐘，并在室溫下靜置30分鐘，使水相和有機相充分分層。

1.4.2 凈化

充分靜置后，從100 mL具塞量筒中吸取有機溶液10 mL，放入150 ml燒杯中，將燒杯放在水浴加熱鍋中進行加熱，水溫為80 ℃。杯內緩緩通入氮氣流，蒸發近干，加入2 mL丙酮溶液，蓋上鋁箔，備用。

將上述備用液完全轉移在15 ml刻度試管中，再用約3 ml丙酮分三次沖洗燒杯，并轉移至離心管，最后定容至5 ml，在旋渦混合器上混勻，分別移入兩個2 ml自動進樣器瓶中，供測定。如果定容后的樣品過于混濁，應用0.2 ?m濾膜過濾后再進行測定。

1.5 氣相色譜測定條件

（1）安捷倫氣相色譜儀7890B，火焰光度檢測器（FPD）;（2）色譜柱：Agilent 125-1732 DB-17（30 m×530 ?m×1 ?m）;（3）載氣：氮氣（純度≥99.999%）;（4）進洋口溫度：150 ℃;（5）檢測器溫度：250 ℃;（6）柱溫條件：采用程序升溫，150 ℃保持2分鐘，每分鐘上升8 ℃，直到250 ℃，并保持12分鐘;（7）進樣條件：不分流進樣。

1.6 標樣配置

用1000 ?g/mL的對硫磷農藥標準品加丙酮溶液配置成50 ?g/mL的對硫磷標準工作溶液，然后再依次配置成0.05 ?g/mL、0.1 ?g/mL、0.2 ?g/mL、0.4 ?g/mL、0.6 ?g/mL、0.8 ?g/mL、1 ?g/mL、2 ?g/mL、4 ?g/mL、5 ?g/mL的標準工作溶液。

1.7 標準曲線設置

1.7.1 單點標準曲線的設置

用0.05 ?g/mL、0.1 ?g/mL、0.2 ?g/mL、0.4 ?g/mL、0.6 ?g/mL、0.8 ?g/mL、1 ?g/mL、2 ?g/mL、4 ?g/mL、5 ?g/mL的標準工作溶液配制的標樣，分別進行單點標準曲線的設置，來對待測試樣進行濃度值的檢測，分別記錄其加標回收的濃度值，并計算出回收率。

1.7.2 多點標準曲線的設置

分別用與待測物質添加水平相近的3點0.1 ?g/mL、0.2 ?g/mL、0.4 ?g/mL，5點0.05 ?g/mL、0.1 ?g/mL、0.2 ?g/mL、0.4 ?g/mL、0.6 ?g/mL，10點0.05 ?g/mL、0.1 ?g/mL、0.2 ?g/mL、0.4 ?g/mL、0.6 ?g/mL、0.8 ?g/mL、1 ?g/mL、2 ?g/mL、4 ?g/mL、5 ?g/mL的標準工作溶液配制的標樣，進行3點、5點、10點標準工作曲線的設置，來對測試樣進行濃度值的檢測，分別記錄其加標回收的濃度值，并計算出回收率。

1.8 回收率測定

取25 g黃瓜試樣3份，分別加入1000 ?g/mL對硫磷標準溶液配置成的5 ?g/mL標準溶液1.25 mL，使黃瓜的農藥含量為0.25 mg/kg，重復3次，使之成為3份平行試樣，并按照上述的前處理、檢測方法進行前處理和檢測，并測定回收率。

2 試驗結果與討論

2.1 不同濃度下單點測定對硫磷的平均回收率

分別對3份平行試樣進行單點標準曲線的回收率測定（見表1），可以看出其標準溶液的濃度值越接近試樣的添加水平，其回收率越接近真值，并且回收率會隨著與試樣添加水平的差距增大而越來越不穩定。

2.2 不同濃度下3點測定對硫磷的平均回收率

標準曲線為：[Y=9755.19781X+3.02854]，相關性為1.0000，圖中X軸為含量（ng/?l），Y軸為峰面積。

選用與添加水平相近的3點標準工作溶液設置成標準工作曲線（見圖1），可以看出其回收率（見表2）比較準確，線性相關性也較好。分別與其單點的標準工作溶液設置的標準工作曲線測定的回收率來比較，更為精密和準確。

2.3 不同濃度下5點測定對硫磷的平均回收率

標準曲線為：[Y=9839.07049X-2.19747]，相關性為0.99997，圖中X軸為含量（ng/?l），Y軸為峰面積。

選用與待測試樣的添加水平相近的5點標準工作溶液設置成的標準曲線，從圖2中可以看出，其線性相關性較好，回收率（見表3）也在控制范圍。與單點和3點標準溶液設置成的標準工作曲線測定的回收率相比，較單點的標準工作曲線回收率更為穩定，與3點的標準工作曲線回收率均在控制范圍，但5點的標準工作溶液設置成的標準工作曲線測定的回收率更為合理和準確。

2.4 不同濃度下10點測定對硫磷的平均回收率

標準曲線為：[Y=10223.98161X-69.39712]，相關性為0.99995，公式圖中X軸為含量（ng/?l），Y軸為峰面積。

從圖3中可以看出，10點標準工作溶液設置成的標準工作曲線線性相關性和回收率（見表4）均在控制范圍內，用10點標準工作曲線測定的待測物質農藥濃度值更為廣泛。在日常工作中，需要測定的待測樣品數量繁多，雖然10點標準工作溶液設置成的標準工作曲線線性相關性和回收率在控制范圍內，但增加了工作量和繁瑣性，不利于提高工作效率。

3 結論

綜上所述，通過采用黃瓜樣品、對硫磷標準農藥進行了不同標樣工作曲線濃度下對回收率測定值影響的試驗，結果表明了回收率采用標準曲線的方式進行測定時，待測試樣濃度含量值接近所添加的標準農藥值，測定結果較為準確。不采用標準曲線的方式進行測定時，待測試樣濃度含量值會隨著所添加的標準農藥含量值與試樣添加水平的差值越大，測定結果越不穩定。而所選擇的標準曲線應為包含試樣添加水平接近的至少3點以上，測定結果較為準確。

在實際工作中，標準曲線受時間和測定環境等限制，不能長期使用，大批量的日常檢查過程中，每天均做一次的標準曲線工作量較大。若采用單點標準工作曲線的方式進行檢測待測樣時，事先不知道待測試樣的實際農藥含量值，所以濃度值的選擇較為困難。

因此，在日常工作中，可以先對待測試樣進行粗測，標準農藥選擇其結果濃度的一定范圍內，而對疑似超標的待測樣品進行檢測時，可以進行復測、接近超標農藥含量值的標準農藥進行檢測。若是較為精準的測定待測樣品農藥含量時，盡量選擇3點以上的標準曲線進行農藥含量值的測定，從而保證結果的準確、可靠。

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