2015-2017年南昌地區無償獻血谷丙轉氨酶與肝炎指標的分析及意義

王芳 ，莊養林 ，李玉 ，張鵬飛 ，苗燕平 ，熊麗紅

(1.南昌大學基礎醫學部，江西 南昌330006；2.江西省血液中心，江西 南昌 330052)

在20世紀80年代初期，由于丙肝ELISA試劑的靈敏度不強，而谷丙轉氨酶（ALT）能靈敏反映肝臟損傷，世界各國很早便將ALT作為非甲非乙型肝炎的替代篩查指標，這一舉措在當時能很好地保障輸血安全。隨著實驗室篩查手段快速更新-ELISA試劑的靈敏度和特異度大幅提高以及病毒核酸檢測技術（Nucleic acid testing，NAT）的引進，國際上對ALT在無償獻血篩查中的現行意義，存有質疑[1]。作為輸血風向標的美國，在1999年時便取消了獻血者ALT的檢測，而后其他國家紛紛效仿。基于中國是肝炎大國的國情，國內暫未取消ALT在無償獻血中的篩查，中國采供血行業近年來也對ALT的域值進行過調整，2012年衛生行業標準WS/T404.1-2012中將原來的40U/L變更為50U/L。本文旨在南昌地區無償獻血者ALT指標和肝炎指標的分析，進一步探討ALT在無償獻血中的運用價值。

1 材料與方法

1.1 研究對象 2015年1月-2017年12月本中心所有采血點經體檢初篩合格的無償獻血者。

1.2 試劑與儀器 ELISA試劑廠家為北京萬泰生物有限公司和英科新創（廈門）科技有限公司，儀器為瑞士Hamilton STAR全自動加樣系統和瑞士Hamilton FAME全自動酶免分析儀。ALT試劑廠家為西門子診斷，儀器為德國西門子X-PAND DIMENSION全自動生化分析儀。NAT試劑為美國ROCHE公司，儀器為美國ROCHE COBAS s201核酸檢測儀。

1.3 實驗方法

1.3.1 ELISA法檢測肝炎指標 本文所指肝炎指標，在無償獻血篩查中是HBsAg和抗HCV，使用FAME進行肝炎指標檢測，兩種不同廠家試劑ELISA檢測HBsAg和抗HCV，只要出現一種試劑以上ELISA檢測結果S/CO≥80%cutoff，則判定為陽性，操作均嚴格按照試劑盒內說明書進行。

1.3.2 速率法檢測ALT檢測結果＞50U/L判定為不合格，操作均嚴格按照試劑盒內說明書進行。

1.3.3 NAT法檢測肝炎病毒 使用ROCHE COBAS s201進行HBV DNA、HCV RNA和HIV RNA三聯檢測，先6標本混樣檢測，結果呈陽性后，再單獨檢測。出現HBV DNA和（或）HCV RNA陽性者，判定肝炎指標NAT陽性。

1.3.4 統計學處理 應用SPSS 19.0統計軟件，不同率的比較用卡方檢驗，數值型變量的比較用獨立樣本T檢驗，在肝炎病毒診斷價值中，對ALT進行ROC曲線分析，以P＜0.05為差異具有統計學意義。

2 結果

2.1 2015-2017年無償獻血者ALT與肝炎指標不合格情況 不合格率、ALT異常率以及抗HCV陽性率有差異，不合格率和抗HCV陽性率表現為2017年＞2015年＞2016年，ALT異常率表現為2015年＞2017年＞2016年，差異具有統計學意義（P＜0.05）， 而 HBsAg 陽性率三年間無差異，P＞0.05，見表 1。

表1 2015-2017年無償獻血者ALT與肝炎指標不合格情況（n，%）

2.2 2015-2017年肝炎指標陽性組和陰性組ALT異常情況 將每年的獻血人群分為肝炎指標陽性組和肝炎指標陰性組，并用Fisher確切概率法分析該兩組人群ALT異常情況，肝炎指標陽性組與陰性組ALT異常率在這三年均無明顯差異，P＞0.05，見表 2。

表2 2015-2017年肝炎指標陽性組和陰性組ALT異常情況

2.3 179份肝炎指標陽性結果NAT檢測后ALT比較情況 對2015-2017年肝炎指標陽性標本，隨機挑出179份進行NAT單檢，再對NAT陽性組和NAT陰性組ALT不合格率的比較，無明顯差異，P＞0.05。兩組ALT值進行獨立樣本t檢驗后，無明顯差異，P＞0.05，見表3。對ALT在肝炎病毒中的篩查價值做ROC曲線分析，曲線下面積AUC為0.583， 最佳臨界值為 22.5U/L，95%CI(0.497～0.669)，此時靈敏度為41%，特異度為71%，見圖1。

表3 179例肝炎指標陽性NAT檢測后ALT比較情況

圖1 ALT篩查肝炎病毒陽性的ROC分析

3 討論

ALT的異常率一直是各地血液報廢[2]的首要原因，隨著多地研究者[3，4]發現ALT與肝炎指標的關聯性也越來越小。本研究先對2015-2017年江西省南昌地區無償獻血者中肝炎指標陽性率和ALT異常率進行年度分析，ALT異常率和抗HCV陽性率差異有統計學意義，HBsAg陽性率無統計學意義。經分析自2017年以來，本實驗室由一遍ELISA檢測模式改為兩遍ELISA檢測模式，雙試劑檢測務必會增加抗HCV陽性率且丙肝試劑存在一定的假陽性結果[5-7]，如纖維蛋白原干擾、試劑準備、孵育溫度[8]的控制等，所以本實驗室變更后的檢測模式使抗HCV陽性率明顯增加，但HBsAg陽性率的影響較小。

其后，將獻血人群分為ELISA肝炎指標陽性組和陰性組，在肝炎指標陽性組中ALT異常率與陰性組人群差異無統計學意義，這點與熊姣梅[9]觀點一致。后續在對179例肝炎指標陽性標本進行金標核酸檢測（NAT），發現ELISA和NAT法反映獻血者肝炎情況不一致[10]，僅有54.19%（97/179）呈NAT陽性，ALT的均值水平在NAT陰陽性組中分別為 27.40±3.68和 20.88±1.64U/L， 雖然 ELISA+NAT+組的ALT水平略高于ELISA+NAT-組水平，但遠低于ALT檢測上限值，且對兩組ALT水平進行比較分析，差異無統計學意義。ROC曲線，在臨床上常用于比較不同診斷實驗對疾病的識別能力[11]，圖1對ALT在肝炎病毒中的篩查價值做ROC曲線分析，AUC僅為0.583，最佳臨界值為22.5U/L，95%CI(0.497~0.669)，此時靈敏度為 41%，特異度為71%，說明ALT在篩查獻血者肝炎方面作用不凸顯。故認為本地區ALT在無償獻血者體內升高的原因，不是主要由肝炎病毒引起的，而是由非肝炎因素造成，如生理情況[12]性別、年齡、職業和體重指數（BMI）等[13]有關，這點與漆萍[14]的研究結果相符。

綜上所述，在目前無償獻血篩查模式下，乙肝和丙肝試劑的靈敏度和特異度日益提升，ALT在提示獻血者肝炎方面的作用逐步減弱，本地區無償獻血者ALT異常原因多由自身生理因素造成。制定合理的血液篩查模式，減少ALT的非肝炎性報廢率，對于保留匱乏的血液資源是有極大幫助的。后續將對ALT在無償獻血者升高的異常原因，進行生理因素的分析，為無償獻血ALT指標的域值范圍提供參考依據。