宮頸癌組織中KGFR、TFPI-2的表達及臨床意義

郭瑞玲(安陽市中醫院婦產科，河南 安陽 455000)

近年來宮頸癌的發生率明顯的上升，流行病學研究認為，我國宮頸癌的發病率可達274～483/10萬人左右[1]。臨床上宮頸癌的發生發展，能夠導致患者無瘤生存時間的縮短，嚴重降低患者的生存質量[2]。

在研究宮頸癌的病情進展機制的過程中可以發現，癌細胞調控相關因子的改變，能夠影響癌細胞的增殖、凋亡及分化等病理過程，進而促進宮頸癌的發生。角質細胞生長因子受體（KGFR）的表達能夠通過激活絡氨酸激酶，進而促進癌細胞內腫瘤相關信號通路的上調，增加了癌細胞增殖轉錄風險；組織因子途徑抑制物-2（TFPI-2）是重要的絲氨酸蛋白抑制家族成員，其能夠通過抑制癌細胞的增殖、促進癌細胞的凋亡，進而抑制早期惡性腫瘤的發生過程[3]。部分研究者報道了TFPI-2在胃癌或者食管癌患者病灶組織中的表達情況，認為TFPI-2的表達濃度的下降能夠影響胃癌或者食管癌患者的病情轉歸，導致患者臨床病理分期的進展[4，5]，但在宮頸癌患者中的研究不足。為了揭示KGFR、TFPI-2的表達與宮頸癌的關系，從而為臨床上宮頸癌患者的臨床診療提供參考，本次研究選取2016年1月至2018年1月我院保存的宮頸癌組織標本56例，探討了不同腫瘤調控因子與宮頸癌病理學特征的相關性，報告如下。

1 材料與方法

1.1 組織標本 選取2016年1月至2018年1月我院保存的宮頸癌組織標本56例（宮頸癌組），同時選取正常宮頸組織35例（因子宮肌瘤或子宮腺肌癥而行子宮全切術）作為對照組，兩組受試者一般資料比較差異無統計學意義（P＞0.05），見表1，納入標準：⑴均經病理組織學確診；⑵患者臨床資料保存完整；⑶術前未行放化療等治療；⑷患者及家屬知情同意。排除標準：⑴合并有其他惡性腫瘤者；⑵臨床資料不完整。

表1 兩組一般資料比較

1.2 檢測方法 所有組織標本經石蠟包埋后作連續切片，厚度約為4μm，采用免疫組化鏈霉卵白素一生物素復合體法 (strep avidin-biotin complex，SABC法)染色，二氨基聯苯胺(diamionben zidene，DAB)顯色。KGFR、TFPI-2蛋白通用型二抗以及SP試劑盒和DAB顯色盒均購自北京中杉金橋生物技術開發公司。以陽性片及PBS代替一抗分別作為陽性及陰性對照，高倍顯微鏡下觀察KGFR、TFPI-2蛋白的表達情況，具體染色步驟嚴格按照SP試劑盒說明書進行操作。

1.3 結果判斷 隨機選取5個視野，每個視野計數100個細胞，胞質出現棕黃色為KGFR或TFPI-2表達陽性，陽性細胞占細胞總數的比例≥30%為陽性表達，否則為陰性表達。

1.4 統計學處理 統計分析采用SPSS 19.0軟件，計量資料采用（）表示，比較使用t檢驗，計數資料比較使用χ2檢驗，相關性采用Spearman秩相關分析，以P＜0.05表示差異具有統計學意義。

2 結果

2.1 兩組中KGFR、TFPI-2陽性表達情況比較 宮頸癌組KGFR陽性表達率明顯高于對照組 （P＜0.05），而TFPI-2陽性表達率明顯低于對照組（P＜0.05）。見表2和圖1。

表2 兩組中KGFR、TFPI-2陽性表達情況比較

圖1 免疫組化染色圖

2.2 KGFR、TFPI-2表達與宮頸癌臨床病理特征關系 KGFR陽性表達與宮頸癌TNM分期、分化程度有關（P＜0.05）；TFPI-2陽性表達與宮頸癌TNM分期、淋巴結轉移有關（P＜0.05）。 見表 3。

2.3 相關性分析 將宮頸癌組織KGFR與TFPI-2表達進行相關分析，結果顯示：KGFR與TFPI-2表達呈負相關（rs=-0.599，P＜0.05），見表 4。

3 討論

在合并有高危HPV病毒感染的人群中，宮頸柱狀上皮病變的風險可顯著的上升，宮頸癌的發病率或者病死率等指標均明顯惡化。特別是在經濟條件差、多次流產病史或者過早性生活的患者中，宮頸癌的發病風險可進一步的上升[6，7]。現階段臨床上宮頸癌患者綜合性治療措施治療后的病情緩解率仍然較低，5年內的病死率仍然超過了25%[8]。免疫學方面的治療能夠在宮頸癌的綜合性治療過程中發揮重要的作用，而本研究對于宮頸癌患者病情組織中KGFR、TFPI-2的分析研究，不僅能夠為揭示宮頸癌的發病病因提供參考，同時還能夠為宮頸癌的免疫方面的治療提供理論靶點。

KGFR是生長因子家族成員，其羧基末端結構包含了4個重復性的絡氨酸激酶區域，能夠結合上皮細胞膜上的糖蛋白配體，促進癌細胞內第二信使的激活。KGFR對于癌細胞內的AKT或者MAPK信號通路的激活，能夠上調癌細胞DNA的轉錄活性，導致癌細胞浸潤能力的增強。部分研究者報道了KGFR的表達與宮頸癌的關系，認為KGFR能夠導致宮頸患者治療預后的惡化[9]，但對于EGFR的表達與宮頸癌患者臨床病理特征的關系研究不足；TFPI-2是絲氨酸激酶家族成員，其對于宮頸上皮細胞周期的調控作用，能夠穩定G0/S期比例，抑制癌細胞快速跨越G0期，并能夠提高癌細胞的分化成熟能力。TFPI-2還能夠影響到癌細胞的凋亡過程，通過激活細胞內的BCL-2蛋白的表達，進而促進癌細胞的凋亡[10]。部分研究者揭示了TFPI-2與惡性腫瘤的關系[11]，但相關臨床病理特征的分析研究不足。

表3 KGFR、TFPI-2表達與宮頸癌臨床病理特征關系

表4 相關性分析

免疫組化結果分析可以發現，KGFR在宮頸癌病灶組織中的表達陽性率明顯的上升，而TFPI-2蛋白的表達陽性率明顯的下降，提示KGFR、TFPI-2蛋白的異常表達均能夠參與到宮頸癌的發生發展過程，通過薈萃分析不同的臨床文獻，筆者認為這主要與 KGFR、TFPI-2 的下列作用有關[12，13]：⑴KGFR的上升能夠導致癌細胞的生物學特征的改變，導致癌細胞的浸潤能力和增殖能力的提升；⑵TFPI-2的表達下降能夠導致癌細胞的凋亡比例的下降，提高了癌細胞對于基底膜組織的侵襲能力。孫彥珍等[14]研究者也認為，在宮頸癌病灶組織中，TFPI-2蛋白的表達陽性率可平均下降35%以上，同時在合并有明顯的宮旁組織浸潤或者3年內病死率較高的患者中，TFPI-2蛋白的表達陽性率可進一步的下降。免疫組化染色分析可見，KGFR主要表達于宮頸癌上皮細胞異型性較為明顯的區域，特別是在癌細胞質或者細胞核周邊，KGFR的染色程度較深，推測KGFR的表達可能在影響癌細胞的異型性方面發揮了重要的作用。在探討KGFR、TFPI-2的表達與宮頸癌患者臨床病理特征的關系時可以發現在臨床分期較晚或者癌細胞分化程度較低的患者中，KGFR的表達陽性率可明顯的上升，提示了KGFR的表達能夠顯著影響宮頸柱狀上皮細胞的分化成熟能力，同時KGFR的表達上升還能夠導致癌細胞對于臨近正常組織的浸潤程度的加深，促進宮頸癌患者臨床分期的進展；在臨床分期較晚或者發生了淋巴結轉移的宮頸癌患者中，TFPI-2的表達濃度顯著的下降，提示了TFPI-2的下降對于宮頸癌患者臨床病理特征的影響，這主要考慮由于TFPI-2的表達濃度下降能夠導致癌細胞對于淋巴結內皮細胞的粘附能力的改變[15]。

綜上所述，KGFR在宮頸癌患者中的表達明顯的上升，而TFPI-2的表達明顯的下降，二者的異常表達均能夠影響到宮頸癌患者的臨床病理特征的進展。后續臨床研究可以增加對于KGFR、TFPI-2與宮頸癌患者臨床預后的關系研究。