血清VEGF、SAA、hs-CRP聯合檢測對急性腦梗死的診斷價值

秦 爽，霍 豆，邢瑞青，張小寧，吳永昌，陳慧昱，彭道榮

(空軍軍醫大學西京醫院全軍檢驗醫學研究所，陜西西安 710032)

急性腦梗死(ACI)是臨床上一種發病率和致殘率均較高的疾病之一[1]，且近年來隨著人們生活和飲食習慣的不規律性，該病的發病率呈上升趨勢[2]。目前認為，ACI的常見病因是動脈粥樣硬化，炎性反應在其發生、發展過程中也起重要作用[3]。早期的炎性反應及損傷作用已引起了許多學者的關注[4]。血清淀粉樣蛋白A(SAA)主要由肝細胞合成，是一種急性時相反應蛋白，研究發現SAA在腦梗死中有一定的作用，許多腦梗死患者SSA明顯上升[5]。超敏C反應蛋白(hs-CRP)與ACI的密切關聯主要體現在發生炎性反應時,hs-CRP通過經典途徑激活補體系統,損傷血管內膜,導致動脈粥樣硬化,形成腦梗死的危險因素。因此,hs-CRP不僅是一種炎癥標記物,而且在缺血事件的發生、發展中,可作為獨立評價指標[6]。血管內皮生長因子(VEGF)也稱血管通透性因子(VPF)或促血管素,它能增加微血管與小靜脈血管的通透性。VEGF能特異的作用于血管內皮細胞,并促進血管內皮細胞的增殖[7]。新近研究發現VEGF與ACI發生關系密切[8]。本研究旨在探討ACI 患者血清中VEGF、血清SAA及hs-CRP水平與ACI的關系及在ACI診斷中的臨床價值，為本地區ACI的診治提供新思路。

1 資料與方法

1.1一般資料 選取2017年8月至2017年10月本院收治的76例ACI患者(ACI組)，男56例，女20例，年齡15～87歲，平均(59.99±15.42)歲。所有患者的臨床診斷均符合全國第四次腦血管病學術會議修訂的腦梗死的診斷標準[9]，且經頭部CT或MRI證實。另選擇同期在本院進行體檢的健康者32例作為對照組(NC組)，其中男22例，女10例，年齡11～94歲，平均(60.41±17.50)歲。兩組年齡、性別構成等比較，差異無統計學意義(P>0.05)，具有可比性。

1.2方法

1.2.1標本采集 采集患者入院第2天清晨空腹肘靜脈血3～5 mL，室溫下待血液自然凝固10 min，3 000 r/min離心20 min，吸取上層血清，凍存于-20 ℃冰箱內待測，保存時間不超過1個月。

1.2.2血清SAA、hs-CRP檢測 應用西門子BNⅡ特定蛋白全自動免疫分析儀及其配套SAA及hs-CRP檢測試劑盒，采用散射比濁法進行SAA和hs-CRP的檢測，具體操作嚴格按照儀器操作規程進行。

1.2.3血清VEGF檢測 應用帝肯全自動酶聯免疫分析儀(Freedom EVOlyzer)及北京建平金星生物科技的VEGF測定試劑盒，采用雙抗夾心ELISA法進行VEGF測定。VEGF測定嚴格按照試劑的操作說明書及儀器的操作規程進行。

2 結 果

2.1ACI組與NC組VEGF、SAA、hs-CRP水平的比較 ACI組VEGF、SAA、hs-CRP水平均高于NC組，差異有統計學意義(P<0.01)，見表1。

表1 ACI組和NC組VEGF、SAA、hs-CRP水平比較±s)

2.2血清VEGF與SAA、hs-CRP水平的相關性 ACI患者的血清中，VEGF與SAA、hs-CRP水平呈正相關(r=0.434、0.631，P=0.000、0.000)。

圖1 VEGF的ROC曲線

2.3VEGF、SAA、hs-CRP檢測對ACI的診斷價值評價 ROC曲線分析結果顯示，VEGF的AUC明顯大于hs-CRP，更有診斷價值；VEGF的靈敏度最高，但在特異度方面，與VEGF、SAA均比hs-CRP略差。見圖1～3。VEGF、SAA、hs-CRP的診斷截斷點和正確診斷指數見表2。

圖2 SAA的ROC曲線

圖3 hs-CRP的ROC曲線

指標AUC95%CI最佳診斷臨界點PVEGF0.8050.722～0.888161.930.000SAA0.6770.576～0.7793.810.004hs-CRP0.6510.549～0.7544.630.013

表4 VEGF、SAA、hs-CRP檢測對ACI的診斷價值

2.4VEGF、SAA、hs-CRP單項及聯合檢測對ACI的診斷價值 單項檢測中，VEGF的靈敏度最高為93.55%；SAA的特異度最高為93.75%；VEGF、SAA、hs-CRP 3項聯合檢測靈敏度為100.00%，而特異度僅為62.22%，準確度為0.62；在2項聯合檢測中，hs-CRP+VEGF的靈敏度為96.67%，特異度為95.65%，約登指數達到0.92，優于其他2項及3項聯合檢測。見表4。

3 討 論

VEGF是一種特異性作用于血管內皮細胞的多功能細胞因子，與腦血管病發生和發展密切相關[10-12]。VEGF與血管內皮細胞上的特異性受體F1t-1和Flk-1結合，對血管內皮細胞產生類似于凝血酶、組織胺等激發劑的作用，可增加血管的通透性，誘導血管內皮細胞表達多種活性物質及細胞因子、組織因子等的釋放，改變細胞外基質，有利于血內皮細胞生長刺激和趨化作用，促進內皮細胞的分裂、增殖、遷移和細胞間的相互粘連，有利于新血管特別是微血管的生成和側支循環的建立，使血流迅速恢復，阻止組織的缺血和壞死，并縮小缺血區域[13]。本研究結果顯示，ACI組患者血清 VEGF水平均較NC組明顯升高，差異有統計學意義(P<0.05),表明在腦組織中,VEGF由神經元和血管細胞產生并作用于自身,介導神經修復和血管再生[14-16]。

SAA是一種急性時相反應蛋白，在預防機體或組織氧化損傷方面發揮著一定的功效[17]。近年來有學者在對腦梗死患者進行血清SAA的檢測發現，缺血性卒中組患者SAA水平較對照組高，且高水平風險明顯比低水平風險高，提示SAA能夠獨立預測缺血性卒中的發生[18]。本研究結果顯示，ACI組患者的SAA水平顯著高于NC組，差異有統計學意義(P<0.01)，與上述研究相符，證實SAA具有預測腦梗死發生的作用。另有學者在對進展ACI患者進行連續監測發現，SAA水平與患者病情的輕重及治療療效相關[19]。

hs-CRP可與脂蛋白結合,由經典途徑激活補體系統,產生大量的終末攻擊復合物和終末蛋白C5b-9,造成血管內膜損傷,使氧自由基大量釋放,引起血管痙攣、脂質代謝異常,導致動脈粥樣硬化的進一步加重。有研究表明，動脈粥樣硬化的早期斑塊中沉積了大量的hs-CRP[20]，而hs-CRP為作為一種重要的炎癥因子多用于診斷急性炎癥，這提示炎癥介質在動脈粥樣硬化形成中的重要地位。本研究結果顯示，ACI組患者的hs-CRP水平顯著高于NC組，且VEGF與hs-CRP呈高度正相關。因此，推斷二者之間可能存在某種相互促進的機制，是ACI發生、發展的重要因素。

本研究中，VEGF的Pearson單因素分析結果顯示，VEGF與hs-CRP呈高度正相關，與SAA呈中度正相關。ROC曲線分析結果顯示，VEGF曲線AUC在三者中最大，最具診斷意義，靈敏度較SAA和hs-CRP高，特異度低于二者。本研究還發現，單一的指標檢測都有其一定缺陷，靈敏度高的特異度差(VEGF)，特異度高的靈敏度低(SAA、hs-CRP)，而約登指數均低于0.65，容易造成漏診和誤診，一旦延誤病情，對患者造成的危害巨大。通過聯合檢測發現，VEGF、SAA、hs-CRP在診斷ACI中的靈敏度、特異度、陽性預測值及陰性預測值，除SAA+hs-CRP靈敏度較單一指標略降，VEGF靈敏度單一指標略優于SAA+VEGF外，其他聯合均較單一指標有所提高，彌補了單一指標檢測的不足。但聯合檢測有利、有弊，并非檢測的指標越多越好，指標聯合檢測的最大意義在于增加了ACI的檢出線索，為進一步明確診斷提供參考方向或為治療提供有效手段，但在提高陽性率的同時也增加了假陽性的概率，因此，需要尋找最佳組合來提高檢出率和降低患者經濟負擔。為了更好地評價聯合檢測的準確度，本研究使用約登指數進行評判。SAA+hs-CRP+VEGF 3項聯合檢測雖然提高了靈敏度和陰性預測值，但是特異度和陽性預測值都大幅降低，約登指數較SAA+VEGF和VEGF+CRP聯合降低了0.26和0.30。因此，聯合檢測的項目并不是越多越好。hs-CRP+VEGF是所有聯合檢測中最優的，hs-CRP+VEGF聯合檢測可為ACI的診斷提供重要的參考價值，具有重要的實用意義。

4 結 論

VEGF、SAA、hs-CRP在ACI血清中升高，其表達對于ACI 的診斷具有重要的價值。VEGF與SAA、hs-CRP呈正相關。三者均參與了ACI的病理過程，在ACI的發生、發展及療效觀察中具有重要作用。ACI患者血清VEGF和hs-CRP聯合檢測有著很好的臨床應用價值和效果，可以作為臨床中診斷ACI的一個重要方案。