常規生化檢驗項目參考區間適用性驗證

索朗卓嘎，周 琪，許建成△

(吉林大學第一醫院：1.檢驗科；2.兒科，吉林長春 130021)

常規生化檢驗是實驗診斷學的重要組成部分，為臨床診斷、病情監測、判斷預后和指導治療提供了可靠依據。參考區間是解釋檢驗結果、分析檢驗信息的基本尺度和依據。原衛生部自2012年12月25日以來陸續頒布了國家衛生行業標準《臨床常用生化檢驗項目參考區間》[1]，對中國成年人臨床常用生化檢驗項目參考區間進行了調整，這些標準的發布實施對相應項目參考區間的建立和應用具有重要指導意義。然而，原衛生部發布的行業標準WS/T 402-2012[2]及美國臨床實驗室標準化協會(CLSI)文件C28-A3[3]均提出醫學實驗室在引用新的參考區間前，有必要進行適用性驗證。為了保證臨床生化檢驗項目的真實可靠性，此次研究采用相關文件[2-3]的推薦要求以驗證原衛生部發布的參考區間是否適用于吉林地區。

1 資料與方法

1.1研究對象 按WS/T 402-2012[2]的要求，選擇2016年7-10月吉林大學第一醫院體檢中心健康體檢人群，通過檢體診斷、實驗診斷、影像診斷確認符合要求的驗證個體。本研究篩選出男性驗證個體250人，其中20～<30歲、30～<40歲、40～<50歲、50～<60歲、60～<70歲、70～<80歲人數為30人、59人、44人、54人、31人、32人；女性驗證個體287人，其中20～<30歲、30～<40歲、40～<50歲、50～<60歲、60～<70歲、70～<80歲人數分別為30人、81人、79人、37人、30人、30人。

1.2儀器與試劑 所有生化項目均在日立7600-210全自動生化分析儀上檢測，試劑與標準品均為上海科華生物工程股份有限公司生產，室內質控品為美國伯樂公司參考物質。

1.3方法

1.3.1標本采集 采血前3 d正常飲食、活動。體檢者禁食8 h后于清晨7:30-9:30取坐位，于肘前靜脈采集2 mL靜脈血，紅色頭蓋分離膠-促凝采血管由廣州陽普醫療科技股份有限公司生產。

1.3.2標本檢測 排除溶血、脂血、高膽紅素等不合格標本后上機測定血清丙氨酸氨基轉移酶(AST)、天門冬氨酸氨基轉移酶(ALT)、γ-谷氨酰基轉移酶(GGT)、堿性磷酸酶(ALP)、總蛋白、血清清蛋白(ALB)、尿素、肌酐。標本均在4 h內完成測定。

1.3.3質量控制 日立7600-210全自動生化分析儀由廠家每12個月校準1次。每個工作日常規樣品開始測試前至少檢測低、中、高3個水平的質控品，當變異系數在允許范圍內時方可進行常規樣品檢測。每年對系統進行精密度、正確度、分析測量范圍、臨床可報告范圍、攜帶污染等性能驗證。

1.4統計學處理 使用SPSS21.0統計軟件分析。按WS/T 405-2012規定，采用Dixon方法剔除離群值。參考區間驗證：從20～<80歲，每10歲男性、女性各募集驗證個體20人以上，各個亞組的測定值與頒布的行業標準進行比較，若落在參考區間內的值不低于90%，則驗證通過。單樣本K-S檢驗判定數據是否呈正態分布。采用兩獨立樣本t檢驗行兩組間比較，采用單因素方差分析行多組間比較。P<0.05為差異有統計學意義。

2 結 果

2.1常規生化檢驗項目參數均值 除總蛋白無性別差異外，男性AST、ALT、GGT、ALP、ALB、尿素、肌酐均值都高于女性。男性ALT、GGT及女性ALT水平在20～<60歲隨年齡上升，但60～<80歲后隨年齡下降。男性AST、女性ALP水平隨年齡增長呈逐漸上升趨勢，男性ALB水平則隨年齡逐漸下降。長春地區漢族健康人群常規生化檢驗項目均值見表1。

表1 長春地區漢族健康人群常規生化檢驗項目參數±s)

表2 長春地區漢族健康人群常規生化檢驗項目驗證結果(%)

2.2常規生化檢驗項目參考區間驗證 男性、女性各6個亞組8個常用生化檢驗項目均值94%～100%落在參考區間內，通過驗證。長春地區漢族健康人群常規生化檢驗項目的驗證結果見表2。

3 討 論

臨床生化檢驗是利用化學發光、化學比色、電泳或免疫比濁、離子選擇性電極電位等技術，測定血液中的糖、脂、蛋白質、電解質、酶、激素及藥物等的濃度，為準確診斷、病情分析、療效監測、預后觀察和疾病預防等方面提供依據的一類檢查。參考區間是臨床判斷受試者健康與否的依據，實驗室應給臨床提供合適的參考區間，否則會導致漏診、誤診。2012年12月25日以來原衛生部先后發布了衛生行業標準《臨床常用生化檢驗項目參考區間》[1]，使我國有了全國性的臨床常用生化檢驗項目參考區間。各實驗室使用前應驗證參考區間的可靠性和適用性，以確認該參考區間是否適用于本地區人群。但外部參考區間的適用性取決于實驗室檢驗結果與建立參考區間時結果的可比性和服務人群的適用性[4]。本課題組首先確認本年度全自動生化分析儀的正確度、臨床可報告范圍、分析測量范圍、攜帶污染等性能驗證均符合CNAS-CL02《醫學實驗室質量和能力認可準則》要求。本課題組此前的研究結果表明，兒童ALP、膽紅素、總蛋白、ALB等的參考區間與成人有較大差別，成人衛生行業標準并不適用于兒童[5-8]。

衛生行業標準《臨床常用生化檢驗項目參考區間》建立時的年齡范圍20～<80歲，男女比例1∶1，每10歲年齡段參考個體數至少120人。本驗證選取年齡20～<80歲人群，男女每10歲均至少選取30例以上至吉林大學第一醫院的健康體檢者，總計537人、12個組分組驗證。本研究結果顯示，除總蛋白無性別差異外，男性AST、ALT、GGT、ALP、ALB、尿素、肌酐均值均高于女性。本研究結果發現，多個生化參數在不同年齡段有差異。男性AST及女性ALP水平隨年齡增長呈逐漸上升趨勢、男性ALB水平相反隨年齡增長呈下降趨勢。男性ALT、GGT及女性ALT 20～<60歲隨年齡增長逐漸上升， 60～<80歲卻隨年齡增長逐漸下降。但男女所有年齡段均值均在參考區間內。本研究分組驗證結果顯示，94%以上落在行業標準提供參考區間內，故原衛生部發布的臨床常規生化檢驗項目參考區間適用于吉林地區。這與云南[4]、山西[9]、安徽[10]、北京[11]等的報道相似。

4 結 論

由于原衛生部發布的臨床常用生化檢驗項目參考區間與此前的教材、說明書及《全國臨床檢驗操作規程》[12]等不同，而醫學學科教材并未隨之更改，故在低蛋白評估、腎臟功能衰退評判、肝臟功能受損評估等臨床應用中是否需要修改仍需探討。本課題組得出的經驗是，通過實驗室驗證后召開臨床聯席會，給臨床提供相應項目新的參考區間及制訂過程，再經過臨床驗證后才能得到較好地實施。