氣相色譜電子捕獲檢測器測定生鮮乳中有機氯農藥殘留

文/戴洋洋 閆 磊 王春天 王紫竹 李 卉 宋 爽 曲建偉

（天津市乳品食品監測中心）

牛奶中農藥殘留問題受到世界各國的重視。國內外毒理學專家研究證明，牛奶中農藥殘留污染對人體健康存在微劑量、慢性細微毒性危害。控制奶產品中農藥殘留污染，確保乳制品安全，日益受到關注[1]。農藥可以用來殺滅昆蟲、真菌和其它危害作物生長的生物，部分農藥穩定性好，能在環境中長期存在，并在動植物及人體中不斷積累，對人畜的生命安全產生危害。由于奶牛飼料品種多，如玉米、麥類、稻米、高粱、豆類等，施用的農藥品種更多，生鮮乳及其乳制品的產業鏈較長，牛奶在生產運輸加工過程中會受到各種各樣的污染，其中任何一種污染都有可能影響牛奶的安全性。

牛奶中的農藥殘留主要來源于：①奶牛的喂養過程，動物飲用被污染水源或食用含有農藥殘留的飼料，部分農藥通過食物鏈在動物體內蓄積；②為抑制奶牛身上的真菌、細菌、線蟲等，及周圍的蒼蠅、蚊子等昆蟲，使用的殺蟲劑可能會混入牛奶中，并且擠奶設備、用具等牛奶接觸到的物件也有可能導致農藥殘留[2]；③飼料種植使用的農藥經遷移轉化后進入生鮮乳，再經加工進入乳制品中。

由于牛奶中存在較多的脂肪和蛋白質，要把牛奶中農藥殘留和雜質分離，需要對牛奶進行必要的前處理，有效提取目標物，并對目標分析物進行凈化與濃縮，以達到檢測要求[3]。

1 材料與方法

1.1 試劑和材料

乙腈，氯化鈉，乙酸鉛，正己烷；有機氯農藥標準品：五氯硝基苯；七氯；艾氏劑；狄氏劑；六六六；滴滴涕；硫丹；氯丹。

固相萃取柱（ProElut DPC），規格為3 g/12 mL。

混合標準儲備溶液的配制：準確稱取標準品，用甲苯分別配制成10 mg/mL的標準儲備液，再用甲苯配制成10 μg/mL的混合標準儲備液。

1.2 儀器和設備

氣相色譜儀（帶電子捕獲檢測器，安捷倫6890N）；分析天平（精確到0.0001 g）。

1.3 測定步驟

1.3.1 提取

稱取10 g生鮮乳，加入15 mL乙腈、4 g氯化鈉、2 mL 200 g/L乙酸鉛溶液，振蕩5 min，8 000 r/min離心5 min，收集上層清液；按照上述步驟重復提取一次，合并上層清液；將上清液在40 ℃水浴下減壓蒸發至約5 mL，待凈化。

1.3.2 凈化

加入10 mL乙腈活化固相萃取柱，棄去流出液；隨后加入待凈化液，收集流出液；然后加入20 mL乙腈洗脫固相萃取柱，收集流出液；最后將收集的流出液在40 ℃水浴下減壓蒸餾至干，加入1 mL正己烷溶解，混勻，供氣相色譜分析。

表1 各有機氯農藥標準曲線線性方程及相關系數

表2 生鮮乳中添加有機氯農藥的添加回收試驗結果

1.4 儀器條件

色譜柱：HP-5，30 m×0.25 mm，0.25 μm，或性能相當者；載氣為氮氣，純度為99.999%；載氣流速1.0 mL/min；進樣口溫度280 ℃；檢測器溫度280 ℃；進樣量1 μL；不分流進樣；柱溫：初始溫度90 ℃，保持1 min，以40 ℃/min升至170 ℃，2.3 ℃/min升溫至230 ℃。

1.5 結果計算

按照式1計算生鮮乳中有機氯農藥的殘留量。其中，X為試樣中農藥殘留的含量（μg/kg）；Ai為試樣中農藥殘留的峰面積；Ci0為標準溶液中農藥殘留的濃度（ng/mL）；D為樣液的稀釋倍數；V為樣液最終定容體積（mL）；Ai0為標準溶液中農藥殘留的峰面積；m為試樣的質量（g）。結果以重復性條件下獲得的2 次獨立測定結果的算術平均值表示，保留3 位有效數字。

圖1 有機氯農藥標準色譜圖

2 結果

2.1 標準曲線建立

配置不同濃度的有機氯農藥混合標準溶液（0、1、2、3、4、5、6 ng/mL），氣相色譜測定。以各有機氯農藥濃度為橫坐標，峰面積為縱坐標，建立標準曲線（表1）。

2.2 有機氯農藥的標準色譜圖

在既定色譜條件下，有機氯農藥的標準色譜圖見圖1。混合標準溶液在既定色譜條件下能夠完全分離，峰型尖銳。

2.3 實際樣品測定

收集生鮮乳樣品，按照測定步驟檢測有機氯農藥殘留，結果顯示，樣品中有機氯農藥均未檢出（＜1.0 μg/kg）。

2.4 添加回收試驗

向空白生鮮乳樣品中添加有機氯農藥標準品，進行添加回收試驗，按照提取方法和色譜條件測定添加回收率（扣除樣品本底值），結果見表2。結果表明，本方法的回收率為78%～107%，說明方法具有較好的準確度。

表3 各有機氯農藥的最低檢出限

2.5 檢出限

根據《食品衛生檢驗方法 理化部分 總則》（GB/T 5009.1-2003）中色譜法公式（式2）計算檢出限，其中，b為標準曲線回歸方程中的斜率，S為儀器噪音的3 倍，即儀器能辨認的最小物質信號。結果見表3。

3 結論

目前測定生生鮮乳中多種農藥殘留的方法主要參考國內外相關技術資料。本文方法的準確性、重現性、檢出限等均能夠滿足檢測要求，可用于生鮮乳中有機氯農藥殘留的檢測。