基于環(huán)介導等溫擴增技術(shù)檢測社區(qū)獲得性肺炎病原體的應用研究

馮遠軍 黃靜

563000貴州航天醫(yī)院，貴州遵義

在臨床中，社區(qū)獲得性肺炎為常見疾病，具有傳染性。重癥社區(qū)獲得性肺炎患者具有較高的死亡率，病情發(fā)展迅速，容易出現(xiàn)因溶血功能障礙、呼吸衰竭等引發(fā)的彌漫性血管內(nèi)凝血情況，以及引發(fā)膿毒性休克、膿毒血癥，危及患者生命健康。社區(qū)獲得性肺炎具有高發(fā)率，對人們的健康造成嚴重影響[1-2]。本研究對社區(qū)獲得性肺炎患者進行環(huán)介導等溫擴增技術(shù)檢測，探究病原體檢查靈敏度、特異度、陽性預測值與陰性預測值，為診斷與治療提供參考?，F(xiàn)報告如下。

資料與方法

2017年1月-2018年12月收治社區(qū)獲得性肺炎患者86例，男48例，女38例；年齡31～69 歲，平均(42.1±3.9)歲。所有患者均簽署知情同意書。

納入標準：①確診為社區(qū)獲得性肺炎；②無非感染性疾??；③無肺結(jié)核；④無HIV感染；⑤無其他嚴重疾病。

方法：①采集患者支氣管肺泡：對不同癥狀患者采取不同灌洗方法，肺部感染局限性病變灌洗支氣管肺段，彌漫性間質(zhì)性病變灌洗右肺中葉與左肺舌葉。進行局部麻醉，植入纖維支氣管鏡，推注生理鹽水25～50 mL/次，總推注量為100～250 mL，推注后負壓吸引，回收液體，保存于-80℃冰箱中，送往實驗室檢查。②痰液標本：切開患者氣管，將無菌導管插入人工氣道，收集呼吸道分泌物作為實驗室研究標本。在獲取痰液時需要注意吸痰操作，不采取負壓操作，避免采集到非呼吸道標本。同時每次吸痰時間在15 s 以下，反復開放與關(guān)閉壓力孔，慢慢吸取呼吸道分泌物，避免對患者造成嚴重影響，避免出現(xiàn)心跳驟停與缺氧情況。痰液采集后將其裝入EP管中，其中含有0.5 mL細菌保存液，而后將其分成3 份送至實驗室培養(yǎng)檢測，標注好信息，保存于-80℃冰箱中。③環(huán)介導等溫擴增技術(shù)檢測：將600 mL 灌洗液與痰液放入滅菌離心管中做好標記，并加入600 mL 等體積NaOH溶液，混勻后放置核酸提取儀中搖動液化。再將其放至離心機中離心，10 000轉(zhuǎn)/min，離心5 min。留沉淀物，并加入生理鹽水洗滌，再次離心，10 000 轉(zhuǎn)/min，離心5 min。棄上清液，100 mL Tris EDTA 懸浮，核酸提取儀震蕩裂解15 min，震蕩液離心1 mL 得核酸。選取社區(qū)獲得性肺炎常見12 種病原體進行序列設計，將患者標本核酸與其對比。

觀察指標：觀察病原體檢測結(jié)果，對比12 種社區(qū)獲得性肺炎常見病原體，確定病原體；而后將檢測結(jié)果與實驗室培養(yǎng)檢測結(jié)果進行對比，分析環(huán)介導等溫擴增技術(shù)檢測的特異度與靈敏度、陽性預測值與陰性預測值[3-4]。

統(tǒng)計學方法：數(shù)據(jù)應用SPSS 21.0 軟件處理；計數(shù)資料以[n(%)]表示，采用χ2檢驗；P＜0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

結(jié) 果

86例患者經(jīng)實驗室培養(yǎng)檢測均確診為社區(qū)獲得性肺炎，其中陰性31例(36.0%)，陽性55例(64.0%)。經(jīng)過環(huán)介導等溫擴增技術(shù)檢測檢出概率較高的為：銅綠假單胞菌20例(23.3%)，肺炎克雷伯菌19例(22.1%)，耐甲氧西林金黃色葡萄球菌15例(17.4%)，嗜麥芽窄食單胞菌13例(15.1%)和鮑曼不動桿菌12例(14.0%)。而環(huán)介導等溫擴增技術(shù)檢測結(jié)果與痰液實驗室培養(yǎng)檢測結(jié)果相比，其靈敏度為95.8%，特異度為67.2%，陽性預測值為81.5%，陰性預測值為97.0%。

討 論

社區(qū)獲得性肺炎具有傳染性，對患者及家屬的健康與生活有著嚴重影響，而盡早確定病情，并檢測出病原體，可以采取針對性的措施進行治療，效果顯著。但近年來隨著抗感染藥物的不斷應用，臨床中出現(xiàn)了很多有耐藥性的病原體，影響治療效果以及病情恢復，因此社區(qū)獲得性肺炎病原體檢測成為治療的關(guān)鍵環(huán)節(jié)。對社區(qū)獲得性肺炎進行早期診斷，并及時采取措施進行治療，可提高治療效果，降低死亡率，但為降低抗生素耐藥性，需要了解病原體，制定合理有效的治療方案，提高治療效果。環(huán)介導等溫擴增技術(shù)檢測對病原體有著較高的靈敏度，且該檢測方法操作簡單，方便快捷，實驗室操作人員技術(shù)要求較低，上手較快。同時環(huán)介導等溫擴增技術(shù)的檢測準確度相對較高，對社區(qū)獲得性肺炎病原體檢測有重要價值[5-6]。

實驗結(jié)果表明，環(huán)介導等溫擴增技術(shù)檢測社區(qū)獲得性肺炎患者病原體準確率較高，靈敏度與特異度也相對較高，銅綠假單胞菌、肺炎克雷伯菌、耐甲氧西林金黃色葡萄球菌等常見病原體檢出率也相對較高。表明環(huán)介導等溫擴增技術(shù)檢測對社區(qū)獲得性肺炎病原體的檢測價值較高，準確性較高，值得作為常用檢測方式，對治療有重要意義，有望代替社區(qū)獲得性肺炎病原體的傳統(tǒng)檢測方式。