化學發光免疫測定技術在生化免疫檢驗中的應用

劉新登 周延美 程克蘭

山東省濟陽縣中醫院檢驗科，山東濟陽 251400

化學發光免疫測定（chemi luminescent immunoassay，CLIA）作為生化檢驗方式中的一種，相比較以往使用的放射性免疫檢驗方法而言，具有較大的區別[1]。該方法具有較高的安全性，同時，在操作方式上較為簡單。在臨床診斷和治療中，以往均采用對甲狀腺球蛋白含量測定的方式，完成對甲狀腺疾病的診斷[2]。以往所使用的放射免疫分析法在假陰性和假陽性的檢出率上相對較高，故而無法為檢驗結果提出準確可靠的依據。近年來，隨著科技發展水平的提高以及科研的不斷深入，部分學者在實驗研究中指出[3]，將化學發光免疫測定法于生化免疫檢驗中應用，可有效的促進檢驗結果準確率的提升，從而為疾病的診斷和治療提供重要的價值。鑒于此，本研究選取2016年2月～2018年2月，于我院接受治療的甲狀腺腫瘤患者113例，并就生化免疫檢驗中化學發光免疫測定技術的應用價值展開探究，現報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選擇2016年2月～2018年2月于我院接受治療的甲狀腺腫瘤患者113例。隨機分成觀察組（n=57）和對照組（n=56）。對照組中男36例、女20例，年齡42～58歲，平均（50.3±1.3）歲，病程1～3年，平均（2.19±0.39）年；觀察組男36例、女21例，年齡43～57歲，平均（50.3±1.3）歲，病程1～3年，平均（2.18±0.40）年。兩組患者一般資料比較，差異無統計學意義（P＞0.05），具有可比性。該實驗研究在整的醫院倫理委員會批準，患者簽署知情同意書的前提下進行。

納入標準：（1）符合甲狀腺疾病的相關診斷標準者；（2）臨床資料收集全面者[4]。排除標準：（1）合并患有嚴重心、肝腎以及腦部疾病、過敏、血液系統疾病、家族遺傳性疾病及其精神病史者；（2）意識不清楚、無法主動配合醫生完成試驗者；（3）不符合納入標準者[5]。

1.2 方法

所有入選該實驗研究者，均取靜脈血3mL，并將適量的肝素（laxo Wellcome；J20090006）與患者的血液標本混勻，防治凝固。3500r/min下離心分離，將所得血漿冷凍保存，對患者的球蛋白水平以及甲狀腺球蛋白水平進行檢測，檢測時間控制在4h以內[6]。放射免疫分析法于對照組應用，具體操作如下：采用西安國營262廠生產的、型號為20003/50P的γ全自動雙探頭放射免疫計數儀完成患者球蛋白水平以及甲狀腺球蛋白的測定[7]。化學發光免疫法于觀察組應用。具體操作如下：采用深圳新產生業生物醫學工程股份有限公司生產的MAGLUMI-4000型分析儀以及與之相配套的化學發光試劑盒完成患者球蛋白水平以及甲狀腺球蛋白的測定。并輔之以美國雅培公司生產的雅培i2000儀器與配套試劑對檢驗結果的準確性進行檢驗[8]。

1.3 觀察指標

對兩種檢驗方式的特異性、靈敏度、符合率、甲狀腺激素水平以及球蛋白水平和甲狀腺球蛋白水平指標進行評價分析和比對。

1.4 評價標準

放射免疫法檢測甲狀腺球蛋白正常水平為11.45～20.25ng/mL，化學發光免疫法檢測甲狀腺球蛋白正常水平為0.73～84ng/mL[9]。靈敏度=真陽性/(真陽性+假陰性)×100%，特異性=真陰性/(真陰性+假陽性)×100%，符合率=（真陽性+真陰性）/總例數×100%[10]。

1.5 統計學處理

本研究數據以SPSS20.0統計學軟件進行組間數據對比分析，計量資料以（±s ）表示，采用t檢驗，計數資料以百分數表示，采用χ2檢驗，P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 兩組特異性、靈敏度以及符合率比較

觀察組特異性96.49%，靈敏度98.25%，符合率98.25%；對照組特異性82.14%，靈敏度85.71%，符合率83.93%。兩組特異性、靈敏度以及符合率指標比較，差異有統計學意義（P＜0.05）。見表1。

表1 兩組特異性、靈敏度以及符合率指標比較[n（%）]

2.2 兩組球蛋白水平以及甲狀腺球蛋白水平比較

兩組球蛋白水平以及甲狀腺球蛋白水平指標比較，差異有統計學意義（P＜0.05）。見表2。

表2 兩組球蛋白水平以及甲狀腺球蛋白水平比較（±s）

表2 兩組球蛋白水平以及甲狀腺球蛋白水平比較（±s）

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2.3 兩組甲狀腺激素水平比較

在FT3、FT4指標上，觀察組與對照組比較，差異有統計學意義（P＜0.05），在TSH指標上，觀察組與對照組比較而言，差異有統計學意義（P＜0.05）。見表3。

表3 兩組甲狀腺激素水平比較（±s）

表3 兩組甲狀腺激素水平比較（±s）

組別 n FT3（pmol/L） TSH（mIU/L） FT4（pmol/L）觀察組 57 37.70±21.41 3.51±1.20 84.84±41.51對照組 56 25.53±18.81 1.10±0.73 73.53±38.84 t 5.471 12.147 10.210 P 0.034 0.001 0.001

3 討論

化學發光的原理是化學發光的物質在化學反應里面的光輻射，我們可以將其分為3個大的類型，第一個是發光物免疫測定，簡稱LIA，第二個是發光輔助因子免疫測定，簡稱LCIA，最后一種叫做發光酶免疫測定，簡稱LEIA。在對患者行生化檢驗的過程中，應用化學發光物完成對抗體的標記，導致抗體發生免疫現象，然后將化學發光劑置于復合物內，使得復合物得以在發光劑的作用下，出現發光狀況，并借助于相應的檢驗儀器完成對發光強度的檢驗、測定和觀察，并對其濃度進行詳盡的計算。這是化學發光免疫測定技術的主要測定原理[11]。可以存在發光現象的物質應該屬于有機化合物取得范疇，受氧化作用的影響，就會導致發光現象的產生。一旦分子處于興奮的狀態，就會使其多于的能量進行散發，而該能量散發的主要途徑即為光源，所以，在進行生化檢驗的過程中，大多會在其中置入少量的倍增技術，使得磁粉可以于更多的能量進行接觸，進而誘發發光現象的出現，使得檢驗過程中可以更加明確的對結果進行判斷[12]。

現階段的醫學診斷和治療中，化學發光免疫檢驗法在多個領域均有涉及。該方法作為特定化學作用下的光輻射產物，在實際的應用過程中，可以以抗體的不同作為主要測定方法擇選的依據。其中主要有以下幾種：輔助因子免疫測定、發光免疫測定以及發光物免疫測定等。相比較傳統測定過程中所使用的方法而言，在檢出率上明顯更，并且將其于腫瘤患者的生化檢驗中應用，所取得的效果更加明顯[13]。本研究中，系統化、科學化的分析實驗研究所得數據結果后可知，在特異性、靈敏度以及符合率指標上，兩組比較，差異有統計學意義（P＜0.05）；在球蛋白水平以及甲狀腺球蛋白水平指標上，觀察組相比較對照組比較，差異有統計學意義（P＜0.05）。由此實驗研究結果不難看出，化學發光免疫檢測方法相比較常規的放射免疫測定方法而言，在檢驗結果準確率、操作過程上明顯更佳，對于當前階段所存在的因就診患者過多所致的檢測效率低下問題均可以較較好的避免，除此之外，也有學者在實驗研究中表明，將標志物和化學免疫測定融合，并不會對標志物產生任何污染，所以這更加印證了該方法在未來應用中的可行性以及廣泛性的應用前景。同時，相比較放射性免疫法而言，在特異性指標上，化學發光免疫測定法明顯更高，這對于以往存在的誤診率高的問題，也可以得到較好的解決。這充分說明，該檢測方法具有失誤率低的特點，因此，現階段，該方法已經以其所具有的獨特和顯著的優勢被廣泛的于臨床醫學重大疾病的診斷和治療中應用，在我國當前的醫學診斷和治療及其免疫學研究等領域上產生重大價值的同時，也占據著重要的地位。因此，該檢驗方式是一項具有十分廣闊的應用前景的測定技術和方法[14]。

綜上所述，將化學發光免疫測定技術于生化免疫檢驗中應用，可有效的促進檢驗結果特異性、靈敏度以及符合率的提升，對于疾病的診斷和治療具有重要的指示性意義，因此，臨床應用價值顯著[15]。