黏膜免疫及其在豬病防控中的應用

李天芝，于新友，沈志強，2

（1.山東綠都生物科技有限公司，山東 濱州 256600；2.山東省濱州畜牧獸醫研究院，山東 濱州 256600）

約有80%以上病原微生物主要經過呼吸道、消化道、生殖道等黏膜途徑侵入動物機體引起感染[1]。黏膜是防御病原微生物的第一道屏障[2]，它可在病原微生物侵入機體前將其消滅，免其對機體造成損傷，在疾病的發生和發展中起著重要的作用。黏膜免疫系統是由廣泛分布于呼吸道、胃腸道、泌尿生殖道黏膜下及一些外分泌腺體（唾液腺、淚腺、乳腺）處的淋巴組織組成的系統，主要包括3部分：1）黏膜相關淋巴組織，如腸黏膜相關淋巴組織、支氣管黏膜相關淋巴組織、泌尿生殖道黏膜相關淋巴組織、鼻咽黏膜相關性淋巴組織和眼結膜相關淋巴組織等[3]；2）致敏淋巴細胞散布途徑，主要是淋巴循環及血液循環；3）黏膜免疫效應部位，即全身的黏膜組織，包括胃腸道、呼吸道、眼結膜、生殖道和多種分泌腺如乳腺、唾液腺、淚腺等組織。黏膜免疫是豬體免疫網絡的重要組成部分[4]，50%以上的淋巴組織和 80% 的免疫細胞存在于黏膜，黏膜是豬最大的免疫系統。黏膜免疫自發現以來就受到國內外學者的廣泛關注，成為研究的熱點，黏膜免疫系統與傳統意義上的免疫系統不同，不僅能在黏膜局部發揮免疫功能，產生分泌型抗體，阻止了病原微生物從黏膜的入侵，還能通過“共同黏膜免疫系統”使整個機體黏膜系統產生免疫保護[5]，同時又能誘發全身性的體液免疫應答[6]。黏膜局部的抗體比血清抗體出現得早、效價高，且維持的時間長，其抗體水平更能體現疫苗免疫保護情況。黏膜免疫產生的抗體主要以分泌型的IgA（sIgA）為主，還有分泌型的IgM（sIgM）、IgG等。隨著集約化、規模化養殖業的不斷發展，傳統的疫苗注射免疫接種因存在費時費力、對豬的應激大、操作繁瑣、容易導致交叉污染等問題，已經不能完全適應生產的需要。黏膜免疫可通過氣霧、口服等途徑接種，簡單易行、副作用較小，更重要的是可阻止病原在局部黏膜的定植，免疫效果好，不僅誘導局部免疫應答，也誘導全身性應答等，因此越來越受到關注。文章主要介紹黏膜免疫及其在豬病防控中的應用。

1 黏膜免疫抗體

1.1 黏膜sIgA

sIgA抗體是由漿細胞分化產生的，在黏膜中含量最為豐富，是參與黏膜免疫反應的主要抗體。sIgA由兩個IgA單體、1條J鏈和一條分 泌 片 (secretory component，SC)構成[7]，J鏈是在漿細胞分泌IgA前同IgA聚合的，SC則是由IgA穿過上皮轉運過程中加上的。SC無免疫活性，但它能促進上皮細胞積極地從組織中吸收sIgA，并將其釋放到消化道、呼吸道和泌尿生殖道的黏膜表面，從而發揮黏膜免疫效應，還能夠保護抗體免受蛋白酶的降解，增加抗體的穩定性，使其在消化道及呼吸道管腔中保持活性的時間延長。與單體IgA相比，sIgA表面具有大量的抗原結合位點，結合抗原的能力強。sIgA沒有活化補體和其他促炎癥因子的功能，當發揮免疫活性時只是與腸腔中的各種抗原連接，干擾它們的攝入，因此對黏膜上皮細胞的損傷較小。sIgA的作用主要是：1）能捕捉進入黏膜內的病原，使病原發生凝聚，阻斷其病原與黏膜結合、或與病原微生物結合形成復合物，從而阻斷或阻止病原對黏膜的黏附，發揮外源病原的免疫排斥作用；2）能與溶菌酶、補體共同作用引起細菌溶解，也能中和相應腸毒素的毒性；3）能與吞噬細胞、自然殺傷（NK）細胞等細胞表面的Fc受體結合，發揮抗體依賴的細胞介導的細胞毒作用（ADCC）效應，殺傷靶細胞；4）增強乳鐵傳遞蛋白及乳過氧化物酶系統對幾種黏膜病原體的抗菌作用；5）可通過黏膜淋巴組織增強抗原依賴性細胞作用，從而提高對病原的直接殺傷能力。

1.2 黏膜 sIgM

sIgM是由5個IgM單體聚合而成，也是能發揮黏膜免疫功能的一種高效抗體。同sIgA的功能類似，具有抗菌、抗病毒、中和毒素的免疫活性，尤其對IgA免疫缺陷的個體，sIgM的免疫功能更為重要。

1.3 黏膜中的IgG

目前，尚不清楚血清中的IgG是如何進入分泌物中的，黏膜表面的IgG抗體在抵抗感染中可發揮重要作用。分泌到管腔中的IgG同樣具有抗菌、抗病毒及抗毒素等功能。但IgG與抗原結合發揮免疫活性時，能激活補體造成黏膜上皮細胞的損傷，從而達到清除病原的作用。IgG抗體對蛋白酶的水解作用抵抗力弱，容易降解，不穩定。IgG同sIgA一樣也能發揮ADCC效應，殺傷靶細胞。管腔中的IgG可與抗原結合，形成免疫復合物，返回到黏膜固有層，經樹突狀細胞處理后，遞呈給CD4+ T細胞，以供機體免疫系統識別。

2 黏膜免疫佐劑

經黏膜免疫時大多數蛋白質抗原免疫力降低，經反復大量免疫后，易引起免疫耐受，阻礙了黏膜疫苗的發展。因此，需要配合相應的佐劑，以增強黏膜免疫反應的效果，或使抗原物質免于被胃腸道消化酶降解。黏膜免疫相關佐劑可提高疫苗的免疫原性，延長抗原與黏膜及免疫活性細胞的作用時間，減少黏膜免疫耐受，增強疫苗免疫效果[8]，是黏膜疫苗研發的重點。好的黏膜免疫佐劑需具備以下條件：1）能誘導機體產生強烈的體液和/或細胞免疫應答反應；2）安全性好，無致熱原，無致癌致畸特性，無毒副作用，不會引起動物體的過敏反應；3）穩定性好，在一定溫度、pH范圍能長時間保存，性質不發生改變。目前，人們已開發出多種黏膜免疫佐劑并投入到實際生產中，取得了一定的成果。

2.1 細菌毒素

主要包括從霍亂弧菌獲得的霍亂毒素（CT）、從大腸桿菌獲得的熱不穩定毒素（LT）及從百日咳博德特氏菌獲得的百日咳毒素等。其中，CT和LT是公認的有效的黏膜佐劑，均能提高APCs遞呈抗原的能力，具有良好的免疫原性。CT和LT均是由A、B兩種亞單位組成的六聚體蛋白，A亞單位具有催化ADP核糖基化的作用，B亞單位可與宿主細胞表面受體結合，穿透細胞，將A亞單位帶入細胞。CT能誘導CD4+、Th2型細胞活化，產生IL-4、IL-5、IL-6和IL-10，也能促進IgG2b亞類、IgE和黏膜sIgA應答的出現。與抗原同時口服時可誘導CD4+、Th1細胞產生血清IgM、IgG1、IgG2a和 黏 膜 sIgA。LT作為佐劑可與多種抗原經不同途徑共免疫，均能明顯增強機體對共免抗原的黏膜sIgA和IgG應答，與CT主要誘導Th2型免疫應答不同，LT誘導的應答要均衡些，產生IgG1、IgG2a、IgG2b、IgG3和黏膜sIgA，是Th1和Th2型應答的混合。CT和LT均具有毒性，LT的毒性較CT低，經黏膜免疫時可產生針對自身的sIgA和血清抗體，限制了其在人體上的應用。

2.2 細胞因子

細胞因子通過促進免疫活性細胞的分化增殖或影響細胞內生物活性分子的表達與分泌而發揮免疫調節作用，可直接作為佐劑使用。目前，常用的細胞因子佐劑有IL-1、IL-2、IFN-γ、IL-12、IL-18 及 GM-CSF 等。IL-1和IL-12不僅能誘導抗原特異性的免疫應答，而且能誘導黏膜免疫應答。IL-1能顯著增加抗體水平，尤其是IgG2a和IgA的水平，在鼻內免疫佐劑中可代替CT或LT，毒性相對較小。IL-18可誘導Th1細胞分化發育和增殖。細胞因子佐劑的缺點是半衰期短，活性易受內環境如pH、各種水解酶及血漿蛋白的影響，當劑量大時可導致發熱、炎癥等副作用。

2.3 CpG基序

通過人工合成的一個或多個非甲基化的CpG基序為核心的寡核苷酸（ODN），也具有相似的免疫刺激功能，可誘導機體產生強烈的體液和細胞介導的全身免疫及黏膜免疫。當與蛋白抗原共同使用時，可誘導機體細胞免疫應答反應。CpG能刺激B細胞增殖，分泌多克隆抗體、IL-6、IL-12[9]，同時激活單核細胞、巨噬細胞和樹突狀細胞，促使未成熟的樹突狀細胞（DCs）轉變為成熟的APCs。CpG作為佐劑與抗原共同免疫動物可誘發強烈的以IgG2a和CTL為主的Th1型免疫應答。還能激活T細胞、B細胞、NK細胞等，產生大量的多種細胞因子，增強機體的特異性和非特異性免疫效應。還可與傳統的黏膜免疫佐劑CT和LT產生協同效應，且無毒副作用，是一種極具應用前景的黏膜免疫佐劑。

2.4 甘露聚糖

甘露聚糖可作為黏膜反應佐劑，誘導血清、陰道及唾液中sIgA的分泌。

2.5 脂質體

脂質體是由單層或多層磷脂組成的具有水相內核的環形囊狀結構小體，對蛋白質或多糖抗原都有免疫增強作用，能激發細胞免疫活性，提高抗體效價，而且抗體滴度維持的時間較長。脂質體與抗原結合后可增加黏膜供給疫苗的有效性，發揮免疫佐劑效應，能誘發高水平的系統IgG和黏膜sIgA抗體反應。作為鼻黏膜免疫佐劑時，刺激機體產生黏膜和全身免疫應答反應。在酸性溶液、膽汁和胰液素中非常穩定，因此，很適合作為口服疫苗的載體，脂質體也可以配合其他黏膜佐劑如CT一起使用，增加口服釋放的效率。

2.6 細菌載體

應用化學或分子生物學技術使上細菌中的致病基因發生突變以降低其毒性，但仍保留了其對黏膜的侵襲力或從動物體內分離的益生菌作為載體，將疫苗抗原運載至APCs。目前常用的細菌載體主要包括李斯特桿菌、鼠傷寒桿菌、志賀氏菌、乳酸桿菌、酵母菌等。一般通過口服方式進行免疫，可保護抗原免于被體內酸性環境破壞。

3 黏膜免疫的途徑

常見的黏膜免疫途徑包括消化道、呼吸道、生殖道、直腸黏膜等。由于每個部位的組織結構各不相同，其免疫的分子機制和效果也不同。疫苗用量較少，又能引起強烈的全身性免疫應答反應的途徑是最佳的途徑[10]。下面簡單介紹一下各種黏膜免疫途徑的特點。

3.1 消化道

消化道免疫主要是通過口服疫苗的方式免疫，操作方便，能同時預防腸道及呼吸道、泌尿生殖道感染，是傳統的黏膜免疫途徑，能產生大量的sIgA發揮免疫功能，但通過消化道免疫疫苗時，疫苗容易被強烈的胃酸環境破壞，免疫時需要加大劑量，或采用特殊的物質包被，以減少胃酸對疫苗的破壞。除了sIgA發揮重要作用外，位于小腸黏膜上皮之間的上皮內淋巴細胞，直接與進入腸腔的微生物接觸，也在消化道黏膜免疫中發揮重要的作用。腸道是誘導黏膜免疫應答的有效部位，經過腸道免疫可以產生較好的黏膜免疫應答，且免疫方法簡單易行。如何使疫苗不受消化液的影響、使用少量的抗原有效地誘導黏膜免疫反應，提高黏膜免疫力是目前經消化道免疫急需解決的問題。

3.2 呼吸道

所謂呼吸道免疫主要是經鼻腔接種疫苗，疫苗也可通過氣管激發機體免疫。鼻黏膜具有豐富的血管，接種的疫苗能吸收進入體循環，一般所需要的劑量少，鼻腔接種后可誘導激活扁桃體處的B淋巴細胞，在鼻或扁桃體激活的部分B細胞可進入血液循環遷移到遠處黏膜組織。因此，鼻腔接種疫苗不僅能預防呼吸道感染，也能預防其他部位的感染。鼻腔接種操作簡單，不需要專門器械，并可避免由于注射而帶來的交叉感染。

3.3 生殖道

豬的一些病毒性疾病如豬偽狂犬病、豬藍耳病及豬圓環病毒病可通過公豬的精液傳播，導致大批母豬被感染，引起豬繁殖障礙性疾病。常規的注射免疫不能阻斷這種傳播，可通過在豬生殖道黏膜接種疫苗的方式，誘導相應的免疫應答，從而阻止疾病的傳播，黏膜免疫是解決豬繁殖障礙性疾病的重要免疫方式。

3.4 直腸

豬直腸黏膜中有大量M細胞和淋巴細胞，能夠進行局部黏膜免疫。

4 黏膜免疫在豬病毒病防控中的應用

4.1 豬流行性腹瀉防控

豬流行性腹瀉病毒（PEDV）對哺乳仔豬的危害嚴重，尤其對7日齡內的仔豬，因腸上皮細胞更新速度慢，死亡率更高，通過母乳獲得的sIgA是仔豬抵抗病毒感染的關鍵。傳統的母豬肌注滅活疫苗不能產生sIgA，而接種弱毒疫苗后可能會因弱毒含量低或在腸道中的增殖能力低或與當前流行毒株不匹配等問題，不能產生大量的sIgA，免疫效果差。而口服疫苗免疫可刺激母豬乳腺產生sIgA，sIgA在腸道中穩定性較好，可為仔豬提供被動免疫保護。Hou等[11]構建了能表達PEDV N基因的重組乳酸桿菌，經口服和滴鼻免疫小鼠后，檢測其血清中抗PEDV的特異性IgG抗體水平。結果表明，重組菌能夠刺激機體產生明顯的免疫反應，口服和滴鼻免疫沒有明顯的差異。分別在70 d和84 d收集腸液和肺液，用間接ELISA檢測黏膜IgA抗體水平，結果表明：無論是在小腸黏液中還是在肺泡液中均可檢測到大量的抗體，這些抗體可以中和豬流行性腹瀉病毒。葛俊偉等[12]構建了表達PEDV COE基因的重組乳酸桿菌口服免疫小鼠，測定其免疫應答水平。結果表明：免疫組小鼠血清、糞便中檢測到較高水平的特異性IgG、sIgA（P ＜ 0.01），血清具有中和活性（1:12），脾淋巴細胞增殖指數明顯高于對照組，IL-4和IFN-γ水平極顯著提高（P ＜ 0.01）。

4.2 豬傳染性胃腸炎防控

豬傳染性胃腸炎病毒（TGEV）是經腸道黏膜感染的重要病毒，黏膜免疫在抵御病毒侵入機體過程中具有重要作用。宋振輝等[13]分別構建了含TGEV M及N基因的重組桿狀病毒rBac-M和rBac-N，將兩種重組病毒分別口服免疫小鼠，收集小鼠糞便檢測sIgA抗體水平，并檢測血清中IgG。結果顯示：兩種重組病毒均可誘導小鼠產生黏膜免疫和體液免疫應答。劉義等[14]將含有TGEV S基因的重組乳酸菌口服（灌胃）免疫BALB/C小鼠，首免、二免、加強免疫共免疫3次，每次免疫連續灌服3 d，間隔兩周,免疫劑量為0.3～0.4 mL/只。第3次加強免疫后10 d，捕殺小鼠，采集血液、脾臟、糞便，處理后采用T淋巴細胞增殖試驗及間接ELISA方法檢查免疫小鼠對外源基因表達產物的應答情況。結果表明，免疫組小鼠血清中的IgG、糞便中的sIgA與對照組有顯著差異（P ＜ 0.05）。

4.3 豬輪狀病毒病防控

輪狀病毒是引起嬰幼兒和各種幼齡動物腹瀉的主要病原之一。對輪狀病毒感染所引起的胃腸炎沒有特效治療藥物，只能通過疫苗免疫預防。目前，人用的輪狀病毒疫苗可口服免疫，效果較好，豬輪狀病毒口服疫苗的研制是疫苗研究的重要方向。葉麗萍等[15]構建了能表達輪狀病毒Vp4的重組乳酸菌，大量培養后離心，加入滅菌脫脂乳液給BALB/c小鼠灌服，檢測血清抗體和腸黏膜sIgA水平，并進行小鼠免疫保護性試驗。結果表明，該重組菌能增強小鼠的黏膜免疫反應，對豬輪狀病毒強毒株的攻擊具有一定的保護作用。

4.4 豬偽狂犬病防控

由于偽狂犬病病毒并不引起毒血癥，而主要定植在三叉神經，使用gE缺失的弱毒疫苗局部黏膜免疫可以起到占位效應，從而抵抗野毒的感染。同時，黏膜免疫可以避免母源抗體對免疫產生的影響。用豬偽狂犬病病毒活疫苗在小豬1～3日齡噴鼻免疫，是豬場豬偽狂犬病凈化的第1步，能有效抵御偽狂犬病野毒的入侵。噴鼻免疫一定要操作正確，選用專用的噴鼻器，最好不要進行滴鼻免疫，滴鼻時只有非常少的疫苗粘在鼻腔黏膜，大部分疫苗或通過吞咽反射進入胃內被胃酸滅活或直接流出，不能有效利用，如果能配合相應的佐劑，則能進一步提高黏膜免疫的效果。豬場在噴鼻免疫的基礎上再做1～2次肌肉注射免疫以建立起細胞免疫，防控豬偽狂犬病。

4.5 豬支原體病防控

豬支原體能與相應的受體結合，并在黏膜部位的細胞內增殖，通過“占位效應”阻斷野毒的“入侵”。豬支原體活疫苗可噴鼻免疫，也可進行噴霧免疫操作，當噴霧免疫時一定要控制氣溶膠顆粒的大小，粒徑太大只能吸入到咽部，粒徑太小吸入后又會被呼出，只有一定粒徑的才會停留于肺泡。另外，噴霧時一定要保持抗原的活性，否則就失去意義。如能解決保持粒徑和活性這兩個關鍵問題，氣霧型免疫就會有很好的進展。

4.6 豬圓環病毒病防控

豬圓環病毒2型（PCV2）可經呼吸道、消化道、精液及胎盤等途徑傳播，能定植于黏膜系統（包括口鼻呼吸道、支氣管、肺及胃腸道黏膜）然后開始復制，并伺機突破血液屏障進入血液循環和淋巴循環。傳統的圓環病毒2型疫苗肌肉注射，只能獲得體液免疫，無法阻止PCV2在黏膜系統的定植復制及向體外排毒，黏膜免疫產生sIgA可通過黏膜免疫中和病毒，全面清除機體中的病毒。英國皇家科學院用食用酵母菌為載體研制了圓環病毒病的口服疫苗為粉末狀風干重組酵母，可穩定地表達PCV2b的殼蛋白，在母豬腸道建立了黏膜保護，從而顯著降低病毒載毒量和排毒，防止臨床疾病癥狀的發生，提高血清（IgG）和糞便（IgA）中的抗體水平，顯著降低了母豬圓環病毒2型的排毒感染壓力。

4.7 豬藍耳病防控

豬藍耳病病毒（PRRSV）可經呼吸道、消化道、生殖道等黏膜途徑感染豬，通過黏膜免疫可阻斷其感染。吳國軍等[16]研究證實鼻黏膜免疫接種PRRSV CH-1R株弱毒疫苗，可以刺激機體產生較高的黏膜免疫反應和體液免疫反應，有效保護易感動物。Han等[17]構建了表達PRRSV的ORF7基因重組減毒沙門氏菌，經口服免疫小鼠12周后，在腸系膜淋巴結、小腸黏膜下淋巴集結、固有層淋巴細胞都檢測到sIgA。王振華等[18]構建了表達PRRSV ORF6基因的重組乳酸桿菌，與黏膜佐劑CpG ODN聯合鼻內免疫BALB/c小鼠，評價其佐劑效應。結果顯示，CpG ODN佐劑協同重組菌抗原組的血清特異性抗體IgG高于單獨佐劑組和抗原組，呼吸道和腸道黏膜sIgA水平高于單獨佐劑組和抗原組，并且呼吸道黏膜sIgA抗體水平高于腸道黏膜抗體，最后一次免疫后14 d檢測脾細胞懸液中IL-2、IFN-γ、IL-4及IL-5的活性。IL-2、IFN-γ和IL-5的活性，佐劑CpG ODN協同重組菌抗原組高于單獨抗原組（P ＞ 0.05）但不顯著，極顯著高于單獨佐劑組（P ＜ 0.01），IL-4水平在各組之間差異不顯著（P ＞ 0.05）。

4.8 口蹄疫防控

口蹄疫病毒（FMDV）經消化道、呼吸道進入動物機體，首先在咽喉部和扁桃體增殖，隨后進入血液循環系統，因此黏膜免疫對預防口蹄疫具有重要意義。王瀟等[19]分別構建了含FMDV VP1基因及小鼠IL-10基因的重組核表達質粒pcD-VP1和proVAX-IL-10，將兩種重組質粒同時或pcD-VP1單獨免疫小鼠，檢測免疫效果，結果顯示：與單獨接種pcD-VP1相比，加入IL-10分子佐劑后可誘導更高水平的黏膜sIgA的表達及分泌，極大地提高了黏膜部位抗原特異性T細胞增殖反應及CD4+T細胞中IL-4的表達量。張馨玉等[20]用殼聚糖來包被口蹄疫DNA疫苗pcD-VP1形成納米級顆粒，用此顆粒經滴鼻、口服、直腸和生殖道4種黏膜免疫小鼠，檢測小鼠針對口蹄疫的體液和細胞免疫水平。結果顯示，殼聚糖/pcDVP1滴鼻免疫小鼠，抗體的高峰來臨比僅免疫pcD-VP1提前2周，直腸免疫處理中也呈現如此效果，經口服和生殖道途徑的免疫，均沒有呈現比pcD-VP1免疫組更好的抗體水平。但殼聚糖/pcD-VP1在生殖道和直腸免疫途徑里均比pcD-VP1免疫組腸道集合淋巴結的T細胞增殖水平高。

4.9 豬流感防控

豬流感病毒（SIV）一般通過呼吸道黏膜感染豬，因此，如果能提高黏膜局部免疫力，可更有效阻止SIV感染。師小瀟等[21]選擇SIV血凝素（HA）的T、B抗原表位，將多個表位片段串聯，克隆到原核表達載體pET-30a（+）中，對串聯表達的重組SIV蛋白SIV-ep1、SW-ep2、SIV-el2，經灌胃途徑免疫6周齡昆明小鼠，檢測免疫小鼠抗體及細胞免疫水平。結果發現，3免后各免疫組血清IgG抗體與PBS對照組差異極顯著（P ＜ 0.01），所有免疫蛋白組與PBS組黏膜sIgA抗體差異均極顯著（P ＜ 0.01），細胞免疫檢測顯示：所有免疫組小鼠外周血T淋巴細胞增殖明顯，SIV血凝抗體檢測結果顯示，SIV-ep1免疫組、SIV-ep2免疫組、SIV-ep1與LT蛋白免疫組抗SIV H1N1亞型HI效價達1∶1024，SIV-el2蛋白免疫組HI效價達1∶512。

5 小結與展望

黏膜免疫尤其對于一些經黏膜途徑侵入動物機體的病原防控效果更好，與傳統的免疫方式相比，黏膜免疫具有很多優點，對動物應激小，安全性好，既能產生局部黏膜免疫，形成黏膜抗體防護網，又能產生全身免疫應答反應，操作簡便，省時省力，可發揮占位效應，適合規模化養殖場應用，是未來豬用疫苗研究的方向。但在黏膜疫苗的研制過程中也存在一些問題，如在免疫佐劑的選擇、免疫途徑的確定及如何保持抗原的活性且發揮最佳的免疫效果等方面還有很多工作需要研究。目前已有專家從豬體內分離出腸道定植的益生菌作為疫苗的載體，制備成可口服的疫苗，能使疫苗的效力達到最佳。黏膜佐劑的研制也取得了一定的進展，開發安全性、有效性、穩定性好的新型黏膜疫苗仍然是生物技術領域及生命科學工作者的重大挑戰。相信隨著分子生物學和免疫學理論與技術的發展，黏膜免疫將在今后豬病的防控中發揮越來越重要的作用。