小麥春化作用研究進展

陳滿霞，蔣玉蓉，於金生

（浙江農林大學農業與食品科學學院/浙江省農作物品質改良重點實驗室，浙江臨安 311300）

小麥（Triticum aestivum L.）是主要的糧食作物之一，它提供的熱量和蛋白質占到人類營養成分的20%以上。小麥在發育前期需要通過適宜的低溫處理來促使其加速開花，一般把由低溫引起的春化稱為低溫春化。按照原產地及春化特點的差異，可將小麥種類劃分為強冬性、冬性、半冬性和春性4種類型［1-2］，不同的類型在春化過程中對溫度和光照的需求不同，各種生理和生化代謝也存在一定差異。小麥的春化作用主要由Vrn-1、Vrn-2、Vrn-3和Vrn-4等4類基因調控，這4類基因位點的顯隱性組成調控著小麥的冬性或者春性［3-6］。

目前人們在分子水平上對小麥春化作用的調控機制及作用方式有了一定的認識，已分離并克隆了春化基因Vrn-1、Vrn-2及Vrn-3，發現了基因Vrn-4［3-6］，并對這些基因位點的等位變異、不同變異類型組合與麥區適應性的關系進行了研究［7］。但仍有一些問題亟需解決，如對正處于春化過程中的小麥植株細胞內的生理生化過程還未能有較清晰的認識；Vrn-4基因的調控機制及與其他春化基因的互作方式尚需進一步探究。研究分析小麥春化作用的分子機制及響應機制，可為培育高產、優質、高抗的小麥品種提供理論基礎，具有極大的現實意義。本文將從春化理論、春化條件及春化特性、春化過程中的生理變化和春化基因等4個方面闡述小麥春化研究的現狀。

1 小麥春化理論

19世紀中期，Allen等在圖書中記載了催芽后的麥類作物種子經低溫處理，春播能夠抽穗的現象［8］。20世紀初期，蘇聯李森科（Lysenko）提出“春化”一詞［9］，即小麥經過人工低溫處理后，能夠加速抽穗的現象。一些學者認為，春化作用是指小麥必須進行連續的低溫處理，才能正常開花，進而完成營養生長向生殖生長的過渡，它是小麥發育過程中一個重要的質變過程［10］。簡而言之，春化就是通過適當的低溫處理促進小麥開花，使其具備正常生長的能力。

2 小麥春化條件及春化特性

2.1 春化條件

2.1.1 溫度 根據起源和春化特征的不同，可將小麥種類劃分為強冬性、冬性、半冬性和春性4種類型［1-2］，不同類型在低溫環境下對具體溫度和時間的需求不同。相對來說，小麥的產地由北到南，植株所需春化溫度逐漸升高，所需春化時間變短［11］。崔繼林等在1953—1954年對華東地區104個小麥品種的春化特征進行了研究，認為將春化溫度在0～3℃（或2～4℃）、春化時間為30～40 d的品種歸為冬性小麥，如果春化溫度是10～12℃，則無論春化時間多久都不能使其抽穗；將春化溫度在0～12℃、春化時間不超越10 d的歸為春性小麥品種［1］。金善寶認為，春性和過渡性品種對春化溫度要求不嚴格（8～15℃），冬小麥特別是強冬小麥，在生育早期完成春化反應需要比較嚴格的春化條件［10］。趙大中等曾報道，在冷處理條件相同的情況下，冬性越強的小麥品種，完成春化反應所需的時間越長［12］；曹廣才等在研究中發現，超強冬性小麥品種在未經過低溫處理的條件下，植株維持在營養生長階段，表現為抽穗延遲、無效分蘗變多等，但也能夠抽穗開花［13］。苗果園等研究表明，未經過低溫春化的小麥，不管冬性強弱，只要給予植株足夠的生長時間，它們最終均能抽穗且灌漿良好［14］。

由此可見，低溫處理是影響小麥穗部發育的重要因素，不同的小麥品種對溫度的需求并沒有明顯的界限，而是一個緩慢的量變積累過程［10］。在低溫誘導條件得不到滿足時，春化過程必須經過漫長的溫度積累，從而使抽穗期延遲。

2.1.2 光照 光照是植物生長發育的必要條件，是影響植物開花的重要環境因子，日照長度則關系到植株的花芽分化、抽穗和結實。小麥屬于長日照植物，不同的小麥品種對日照時間的響應不同。早在1935年，Mckinney等就初次發現了“短日春化”現象，即把未春化的小麥植株在其發育早期置于短日照下，然后放到長日照下，能夠加速幼穗分化，也就是說短日照處理可以代替低溫春化的需要［15］。隨后有研究表明，某些小麥品種只有在短日照下生長受到抑制時，短日春化才能代替低溫春化［16］；一些秋季播種的小麥品種需在短日照下生長，這種特性就是短日春化性［17］。苗果園等研究表明，一般強冬性小麥品種在一定溫度的積累下，會對光照長度表現敏感且具備短日春化性；冬性品種對低溫和光長都較敏感，不存在短日春化效應；而有些春性品種對光照長度敏感，但對低溫基本沒有任何反應［14］。曹廣才等認為，在冬小麥的生育早期以短日照條件為宜［18］，溫度與光照雖不可相互替代，但在一定范圍內，它們的生態效應具有互相抵償的作用。

2.1.3 其他環境條件 小麥的生長發育還受其他外界環境因素的影響，其春化過程除了要有低溫和短日照外，還需要有足夠的氧氣、適宜的水分以及糖類等不可或缺的營養物質。研究表明，如果發芽的小麥種子經過干燥脫水后，當水分含量低于40%時，即使給予足夠的氧氣和水分，種子也不能通過春化［19］。小麥的離體胚在有氧氣、水分和糖類的前提下，才能發生春化響應［20-21］。

總之，小麥的春化受許多環境因素的影響，不同環境因子的協同作用影響小麥的春化和開花誘導過程，因此，研究小麥春化時所需的條件，對于小麥正常生長具有重要的意義。

2.2 春化特性

春化是小麥的主要特征之一，是影響小麥區域分布和生態適應性的重要因素［22］，是引種、用種的重要依據，直接影響到小麥的發育過程，如幼穗發育早晚、抽穗期等［23-24］。春化特性被認為是一種連續的數量性狀，主要以小麥花原基的分化及成花進程為基本標記［25］。不同小麥品種在春化階段對低溫的不同需求使其具有不同的發育特性，通常以葉片數、分蘗數、株高、小穗數等來判斷小麥品種的春化特性。

研究表明，春化作用會使小麥的最終葉片數減少［26-27］。張錦熙等認為，可將小麥開花前劃分為3個生育階段，即基本營養生長階段、可變營養生長階段和可變生殖生長階段，其中可變營養生長階段的長短用該階段主莖上長出的葉片數表示，它的多少是鑒定小麥品種冬、春性的指標之一，隨著小麥品種冬性的增強，在不同播期下這一階段的葉片數變異幅度會變大［28］。王士英認為，某些小麥品種在生育早期會因低溫春化，導致出葉數減少，從而使主莖的總葉片數相應減少，這是小麥對于生態環境的一種適應方式［29］。Flood等認為，隨著小麥冬性程度的增加，小穗數一般呈增長趨勢［30］，還有學者認為小麥的小穗數可能由其他基因調控［31］。穗分化進程與葉片生長對溫度的響應不同，低溫春化效應主要誘導的是小穗原基（二棱）的分化［28］，而葉片數的多少則與積溫有一定的關系。

當春化溫度適宜時，春化作用能夠促進小麥的花芽分化，但目前還沒有某種生理標記被普遍用來評判小麥的春化反應過程。探究小麥的春化特性，可為人們在分子水平上認識春化作用的分子機制、遺傳規律提供重要的理論基礎。

3 小麥春化過程中的物質變化

通過春化反應過程，小麥生理生化代謝會發生很大的變化，包括碳水化合物及蛋白質代謝、核酸代謝、酶和激素的變化及相關基因的表達等。譚克輝等對小麥春化過程中的生理和生化物質變化作了大量的研究，認為小麥春化是多種代謝過程相互交替的綜合過程，至少有3個子過程，即糖的氧化、蛋白質代謝和核酸代謝［32］。這3種代謝過程并非完全獨立，而是按照一定的先后順序相互交替進行。

3.1 碳水化合物變化

研究表明，植物的春化作用與莖尖中的碳水化合物代謝具有緊密的聯系［33］，其中糖類不僅作為植物細胞代謝中的碳源，用以合成其他含碳物質，還直接參與花器官的發生過程，并在植物開花中起重要作用［34-36］。糖類對小麥春化反應速度的影響在低溫處理的初期（0～14 d）［37］，該時期植物的呼吸速率明顯增強，生長點會進行充分的有氧呼吸和代謝［38］。劉麗杰等認為，低溫會使冬小麥胚中的蔗糖含量明顯升高，而在同樣低溫條件下，春小麥中蔗糖的含量變化不大［39］。研究發現，只有當植株莖尖中的蔗糖、還原糖和可溶性糖等碳水化合物的含量達到一定水平時，生長點方能受低溫刺激進行春化，且當它們的含量增加時，春化時間會相應變短［37，40］。

3.2 蛋白質變化

蛋白質的代謝過程是小麥能否順利通過低溫春化的重要一步［32］。研究表明，冬小麥經低溫處理后，蛋白質合成速度加快［41］，且該現象與花芽分化的特異蛋白表達有關，特異蛋白的表達是基于某些特定基因在轉錄水平上表達存在差異產生的［42-43］。此外，這些特異蛋白質僅存在于春化植株中，在脫春化和未春化的植株中不存在［42］，且低溫誘導開花與相關mRNA的出現具有一定的次序性［44］。對春化過程中植物蛋白質代謝的進一步研究表明，在低溫處理過程中，可溶性蛋白質含量隨著葉齡的增大先增加后降低［45］；不同冬小麥品種的可溶性蛋白質含量不同，強冬性品種的含量通常較低［46］。小麥春化過程中的功能性蛋白質，如過氧化氫酶（CAT）、超氧化物歧化酶（SOD）、過氧化物酶（POD）、酯酶（EST）等可溶性蛋白同工酶，在春化過程中也發生了相應的代謝變化［47］。楊肇馴等認為，冬小麥在春化過程中，POD含量在不同時期變化是不均一的，春化中期，POD的變化較為顯著，春化處理21 d后，可溶性蛋白的含量迅速增加，逐漸接近未春化處理的春小麥［48］。

3.3 核酸變化

20世紀50年代，李淑俊等以冬小麥北系3號及小紅芒2個品種為試材，探究了小麥春化反應過程中胚內核酸含量的變化，結果表明，在春化處理期間，隨著春化時間的延長，胚中各種核酸含量均增加［49］。有研究表明，核酸代謝主要在小麥低溫處理的中后期進行［32，50］。此外，Sarhan等認為，小麥春化后核糖體RNA和可溶性RNA的含量增加，有利于植株感受低溫刺激通過春化，在處理30～50 d的過程中，發現了新的mRNA［51］。目前，運用mRNA差異顯示技術及減法雜交等技術，已獲得了與春化作用相關的DNA序列［52-54］。趙大中等曾以冬小麥品種燕大1817為試材，利用mRNA差異顯示技術，設置不同的春化處理來檢測胚芽內mRNA的變化，發現并克隆了1個春化特異表達基因，該基因僅在春化20 d這一關鍵期表達，而在未春化、春化4 d、脫春化期不表達［12］。

小麥春化反應中的各個代謝過程相互交替且反應復雜，目前，對于正處于春化過程中的植株細胞內的各個生理生化代謝過程還未能有較清晰的認識。對小麥春化過程中的各種物質變化進行分析，可為認識春化作用提供資料和信息，為理解低溫誘導開花提供切入點，同時在分子水平上，為春化基因的克隆奠定基礎。

4 小麥春化基因

目前，小麥的春化作用主要由4類基因調控，分別是Vrn-1、Vrn-2、Vrn-3和Vrn-4，其中Vrn-1、Vrn-3和Vrn-4使小麥表現為春性生長習性，而Vrn-2能夠抑制開花，使小麥表現為冬性生長習性［3-6］。Vrn-1基因包括3個直系同源基因：Vrn-A1、Vrn-B1和Vrn-D1，分別位于5A、5B和5D染色體上，與Vrn-B1和Vrn-D1相比，Vrn-A1對春化作用表現最不敏感［55-57］。Vrn-2基因包含Vrn-A2、Vrn-B2和Vrn-D2 3個基因位點，它們分別被定位在5A、4B和4D染色體上［5］。Vrn-3基因位于染色體7A、7B、7D上，由Vrn-A3、Vrn-B3、Vrn-D3組成［6，58］。Vrn-4基因被定位在六倍體春小麥的5D染色體上，被命名為Vrn-D4［3，59-60］。這些基因位點之間互相作用，共同影響小麥的春化特性。

4.1 Vrn-1基因

Vrn-1基因，也稱為TaVRT-1，在低溫誘導下促進小麥開花，它可以編碼與擬南芥AP1/FRUITFULL家族同源的MADS-box轉錄因子［61-62］，一系列MADS-box調節分生組織的特異性［63］，控制頂端分生組織從營養生長向生殖生長轉變［4，61，64］。六倍體小麥包含A、B、D 3個染色體組，各染色體組中Vrn-1基因的表達量有所差異，Vrn-A1基因對Vrn-B1和Vrn-D1具有上位性效應［56］。Vrn-1基因的顯性等位性主要表現為該基因啟動子區堿基的插入、缺失或突變［4，65］；在二倍體小麥中，Vrn-1基因的缺失能夠使植株長久不開花［66］。

普通小麥Vrn-1基因的等位變異類型較多，目前已在Vrn-A1位點發現了Vrn-A1a、Vrn-A1b及Vrn-A1c等多種顯性等位基因變異類型，它們使小麥的生長習性表現為春性，Vrn-A1a、Vrn-A1b是啟動子區域的變異類型，而Vrn-A1c為第一內含子的變異類型［4，56-67］。Vrn-A1a由于發生了折疊回文結構元件的插入和啟動子序列的復制，在啟動子區域有131 bp與43 bp或222 bp的堿基插入［7，64］。Vrn-A1b的突變是由于在Maquis等品種的啟動子區域，具有多個單核苷酸多態位點（SNP），以及在啟動子的5′端非翻譯區（5′UTR）區缺失了20 bp的堿基［4，64］。Vrn-A1c表現為顯性，它的基因序列與野生型隱性等位基因vrn-A1一致，但在vrn-A1第一內含子區有一個5 504 bp堿基片段的缺失［56］。Vrn-B1包括Vrn-B1和vrn-B1 2種等位基因位點的變異，與隱性等位基因vrn-B1相比，Vrn-B1可以使小麥的生長習性表現為春性，其原因是在第一內含子區域缺失了1個6 850 bp的堿基片段［7，56-57，68］。Vrn-D1基因位點的等位變異是由于內含子的大片段缺失，包括Vrn-D1和vrn-D1 2種類型，隱性基因vrn-D1的第一內含子缺失了4 235 bp的堿基片段［56-57］。

在不同國家和地區的小麥種植區，Vrn-1基因的等位基因變異類型不同，出現的基因頻率也有所差別［69］。Goncharov等對世界各國小麥品種的研究發現，Vrn-A1在西伯利亞和歐洲小麥品種中出現的頻率較高，Vrn-D1在亞洲品種中出現的頻率較高，而在中國和印度地區特定的品種內出現頻率較高的為顯性基因Vrn-B3［70］。姜瑩等認為，在我國小麥十大生態栽培區，Vrn-D1均表現為顯性，而Vrn-Ala和Vrn-B1在冬小麥區沒有分布［71］。Zhang等對我國的小麥品種進行研究發現，冬麥區的春性品種主要攜帶Vrn-D1基因，而所有春小麥區的春性早熟品種主要攜帶Vrn-A1a基因，且春化位點顯性頻率的順序依次為Vrn-D1、Vrn-A1、Vrn-B1、Vrn-B3［7］。劉興舟對山東地區的小麥品種進行研究表明，該地區的春化基因vrnA1、vrnB1和vrnD1均為隱性基因，決定了該地區冬小麥種植的主導地位［72］。此外，有研究發現，未進行春化時，冬小麥隱性基因vrn-1的表達量較低，春小麥顯性基因Vrn-1的表達量最高；經過春化后，冬小麥隱性基因vrn-1的表達量明顯有所增加［73］。由此可知，春小麥的Vrn-1基因無需春化就能表達，而冬小麥的vrn-1基因需要經過低溫刺激才得以表達。

4.2 Vrn-2基因

目前，關于Vrn-2基因分子機制的研究很多，Vrn-2基因是一個開花抑制因子，Vrn-2的表達受到低溫春化和短日照的影響。Yan等以二倍體小麥為材料，對Vrn-2基因進行定位克隆發現，Vrn-2基因編碼一個ZCCT基因，該基因包括1個鋅指結構域和1個CCT功能域，ZCCT-1和ZCCT-2基因串聯組成ZCCT，二者的基因序列有76%的相似性［4-5］。在六倍體小麥中，ZCCT-1又包含了3種等位變異：ZCCTA1、ZCCT-B1和ZCCT-D1［36］。Yan等研究發現，Vrn-2基因ZCCT-2編碼區序列沒有差異，但在CCT功能區存在突變，使得這一編碼區的第35個密碼子編碼的色氨酸取代了精氨酸［5］，取代的原因可能是突變破壞了甲基化位點，從而使CCT功能區蛋白質間的相互作用受到一定的影響［4］。假如第35個密碼子處的精氨酸/色氨酸發生突變或ZCCT-1/ZCCT-2中的基因缺失，則小麥品種的生長特性均表現為春性，相反時則表現為冬性特性。Szücs等認為，二倍體冬小麥品種中至少存在1個功能性的ZCCT-1基因，隱性vrn-2基因的所有ZCCT基因都缺失或CCT區域的保守氨基酸發生突變，就會使小麥品種表現為春性，進一步證明了ZCCT-1是Vrn-2的候選基因［74］。

Takahashi等認為，Vrn-2基因與Vrn-1的上位性互作效應較為明顯，二者共同參與一個開花調控途徑［75］。有研究表明，春化處理前，Vrn-2的表達量相對較高，Vrn-1基因則較低［5，76］；在短日照下，Vrn-1的表達量并沒有隨著Vrn-2表達量的降低而升高，只有在長日照條件下才出現逐漸上升的趨勢［77］。由此可以說明，短日照條件下可能還有其他的基因抑制了Vrn-1的表達；長日照條件下，如果Vrn-2基因缺失，即使沒有進行春化，花芽也能分化。

4.3 Vrn-3基因

研究表明，Vrn-3基因與大麥的HvFT基因、擬南芥的FLOWER LOCUS T（FT）基因同源，它們完全連鎖［6，78］，且FT基因能夠促進植物開花［79-81］。Vrn-3基因受長日照和低溫誘導促進開花，它與Vrn-1、Vrn-2、其他春化基因及光周期基因共同參與植株的開花途徑［78］。參照大麥的HvFT基因序列，Yan等設計并開發了小麥春化基因Vrn-3的分子標記，通過對小麥早花品種和晚花品種Vrn-3基因位點的差異分析發現，Vrn-B3存在Vrn-B3和vrn-B3 2種類型的等位變異類型，其編碼區序列并沒有出現差異，小麥早花和晚花可能是由于在vrn3起始密碼子上游區域約591 bp處有1個5 295 bp堿基的反轉錄轉座子插入［6］，這一差異可能會導致Vrn-2與Vrn-3之間的相互作用受阻［82］。此外，Chen等在我國地方小麥品種中發現，Vrn-B3基因上存在2個新的等位變異類型，分別是Vrn-B3b和Vrn-B3c，其中Vrn-B3b在5′端非翻譯區有一個890 bp堿基片段的插入，使植株延遲開花，而Vrn-B3c在5′端非翻譯區除了有一個5 300 bp堿基片段的插入外，還有2個小片段的缺失，但啟動子的活性并沒有受到明顯的影響［83］。在擬南芥中，長日照條件下，FT基因在葉片中的表達量升高［79］，隨后FT蛋白轉移到莖尖分生組織促進開花［84］。在小麥中也發現了這種FT蛋白由葉片轉移到莖尖的現象，說明Vrn-3基因能夠促進小麥開花，可能與這一現象有關。研究發現，在小麥中，FT蛋白與轉錄因子TaFDL2結合，共同促進Vrn-1基因的表達，從而使植株能夠正常開花［85］。Vrn-3基因通過調控Vrn-1來影響花期［55］，Vrn-3編碼的蛋白可與TaFDL2轉錄因子相互作用，而TaFDL2與Vrn-1的啟動子區域結合以促進開花［86］。

4.4 Vrn-4基因

1971年，Pugsley發現了春化基因Vrn-4，并在創制基因系TDD、TDE、TDC和TBD后，創制了近等基因系TDF［55］。之后，Yoshida等將Vrn-4定位在5D染色體短臂上靠近著絲粒區域，距離長臂上已定位到的Vrn-D1基因至少50 cM的距離［59］，且Vrn-4基因與Vrn-A1具有較高的序列同源性［87］。有研究認為，Vrn-D4基因可能位于由Vrn-1、Vrn-2、Vrn-3基因組成的反饋調節網絡的上游，也可能是其中的組成部分之一［88］。研究表明，Vrn-D4調控開花的分子機制與Vrn-B1、Vrn-D1類似，但春化效應不如Vrn-A1［26，89］。若春化時間相對較短，則帶有Vrn-B1、Vrn-D1基因的植株花期早于帶有純合Vrn-D4基因的植株［59］。有關Vrn-D4基因的調節機制、等位變異及其作用方式尚需進一步研究。

4.5 春化基因間的互作

小麥需經過足夠時間的低溫處理和光照才能開花，各個春化基因位點之間的聯系較為復雜，它們協同作用，構成了一個反饋調節網絡。春化基因Vrn-1、Vrn-2、Vrn-3都存在多種等位基因變異類型，這些等位基因位點顯隱性的組成調控著小麥的春性或冬性，而在不同國家或地區的小麥中，等位基因的分布是不同的［7］。

在普通小麥中，顯性基因Vrn-l的表達時間較早，隱性基因vrn-l較晚［76］。在發育前期，顯性基因Vrn-Al的表達會抑制Vrn-2的表達，而在發育后期，Vrn-Al對Vrn-2的抑制作用使得vrn-B1和vrn-D1得以表達［57］。Li等以冬小麥為材料進行研究發現，若植株帶有顯性基因Vrn-3，那么在Vrn-1表達量上升的情況下，可以促使小麥提前開花［85］，原因可能是Vrn-3基因促進Vrn-1的表達，而Vrn-1的表達可間接抑制Vrn-2的表達。研究表明，在長日照條件下Vrn-2基因的表達量上升，而短日照抑制了Vrn-2基因的表達［76，90］。Distelfeld等認為，小麥的Vrn-3基因與其他春化基因及環境因子相互作用，共同調控小麥的花期；在長日照條件下，Vrn-2基因的表達水平上升，Vrn-3受到抑制不表達，從而使得Vrn-3無法誘導Vrn-1的表達，進而導致Vrn-1在葉片及根尖中的表達量非常低，植株停留在營養生長階段［91］。進入冬季后，溫度降低，日照時間縮短，植物進行春化作用，Vrn-1表達量上調，Vrn-2的表達受到抑制，Vrn-3則開始發揮作用；春季日照時間變長，Vrn-3受光照的刺激，表達量開始升高，進而促進了Vrn-1的表達，最終促進小麥植株開花［91-92］。

5 展望

對春化作用的研究有利于揭示小麥發育轉變的機制及遺傳規律，對小麥的生產具有極為重要的意義。在小麥育種中，只有充分了解小麥品種的春化發育特點、春化模式和反應機制，才能了解小麥春化發育理論與育種的關系，從而提高小麥品種的利用效率、擴大品種的利用范圍。目前，在分子水平上，前人已對小麥春化作用的調控機制及作用方式進行了許多研究，并取得了一定的成果，但尚有一些問題亟需解決，如小麥春化過程中的生理生化代謝還需進一步探究，Vrn-4基因的調控機制尚不明確或者還存在其他未發現的春化基因，這些春化基因間的互作關系還缺乏深入研究。

小麥的春化作用是極其復雜的過程，在已有的生理生化基礎上，結合生物信息學、基因組學、蛋白質組學、遺傳學及計算機模擬等學科知識對其進行研究，將推進對小麥的春化特性、物質代謝及分子機制等的完整認識。此外，傳統的小麥雜交育種具有選擇效率低、周期長等缺點，而通過構建植物表達載體獲得轉基因小麥植株，能夠快捷有效地將小麥春化特性進行特異性遺傳改良，同時可為進一步研究春化基因的分子機制、加快育種進程奠定基礎，對小麥的引種、育種具有重大的意義。

相信隨著多組學的不斷發展、春化試驗體系的完善以及小麥春化作用研究的不斷深入和全面，人們對小麥春化作用的調控機制和分子機制的認識也會更加清晰。