湖北主要藥用植物石斛組培育苗技術規程

陳慧玲 劉宗坤 楊彥玲 張新葉 劉正言 龐宏東 李振芳 劉濤 陳華超 馬林江 彭嬋

中圖分類號：S792.99?文獻標識碼：A?文章編號：1004-3020（2019）06-0089-02

1?范圍

本標準規定了湖北主要藥用植物石斛組培育苗的術語與定義、種類選擇、種苗繁育、煉苗與健化、病蟲害防治及種苗出圃。本標準適用于湖北省范圍內主要藥用植物石斛的組培育苗生產。

2?規范性引用文件

農藥合理使用應符合國家、行業發布的標準。詳情見表1注。

3?術語和定義

下列術語和定義適用于本標準。

（1）石斛菌根共生菌。一種或幾種侵染石斛屬植物根部，與之共生的內生真菌，石斛屬植物種子萌發、幼苗生長的碳源、水源以及成年植株部分營養均依賴這些真菌來獲取。

（2）石斛菌根共生菌液。藥用植物石斛進行組織培養時，在其培養基中添加的由石斛菌根共生菌經無菌分離培養后得到的液體菌劑。

（3）煉苗。采取通風、降溫、適當控水等措施對設施培育的幼苗進行強迫鍛煉，提高抗性，使其定植后能夠迅速適應陸地的自然環境條件的過程。

4?種類選擇

霍山石斛Dendrobium?huoshanense、鐵皮石斛D.officinale、細莖石斛D.monilifolme為主要栽培種。注：石斛屬植物約1?500種，中國有75種2個變種，湖北有8種，以上3種在湖北栽培表現好。

5?種苗繁育

（1）蒴果采收。對現有種子園中多糖含量高、高產的2～3?a生健康植株進行人工授粉后精心管理，于9月～11月采收無病蟲害、無機械損傷的成熟蒴果，以果皮綠黃色未開裂為宜。

（2）消毒播種：①消毒。在超凈工作臺上將蒴果表面用70%酒精棉球擦拭干凈后，浸泡于70%酒精中30?s，再用0.1%升汞消毒15?min，無菌水沖洗5次后用無菌濾紙吸干表面水分。②播種。在超凈工作臺上用滅菌手術刀沿中縫線縱向切開消毒好的蒴果，刮出種子于適量的無菌水中分別制成懸浮液，搖勻懸浮液后，吸取適量懸浮液加入裝有1/2?MS+1%石斛菌根共生菌液培養基的培養瓶中，并使之均勻分布，用封口膜封口。③培養條件。將已播種的培養瓶放入溫度為（25±1）?℃，光照10～12?h、光照強度1?500～2?000?1x組培室培養。

（3）增殖培養。30?d后將培養基上萌生的原球莖轉接到MS?+?2.0?mg/L?6-BA?+?0.2?mg/L?NAA?+?10%香蕉汁+1%石斛菌根共生菌液的增殖培養上培養，培養條件參照本標準5.2.3執行。

（4）分化培養。60?d后將增殖的原球莖轉接到MS+0.6?mg/L?6-BA+1.2?mg/L?NAA+10%香蕉汁的分化培養基上培養，培養條件參照本標準5.2.3執行。

（5）生根培養。60?d后將分化的叢生芽轉接到1/2?MS+1.0?mg/L?NAA+15%馬鈴薯+2%石斛菌根共生菌液的生根培養基上培養，培養條件參照本標準5.2.3執行。

6?煉苗與健化

（1）搭建蔭棚。選擇地勢平坦處搭建長40～50?m、寬8?m、高3.3?m的鋼架大棚，覆蓋避雨薄膜和遮光度75%～80%的遮陽網，棚內安裝微噴霧設備。

（2）煉苗。組培苗生根培養60?d后即可開瓶煉苗移栽。將苗高3～4?cm、長小葉5片～8片，根4～5條的試管苗帶培養瓶一起移至蔭棚內，進行常溫閉瓶煉苗，7?d后再開瓶煉苗3～7?d。煉苗溫度宜15～30?℃，光照小于7?000?lx。

（3）健化。①健化基質準備。采用樹皮+花崗巖瓜米石的雙層基質作為健化基質，上層為厚度2?cm發酵過的1?cm大小碎松樹樹皮，下層為厚度2?cm的粒徑0.5～1.0?cm花崗巖瓜米石，基質在組培苗健化前用高溫蒸汽消毒后裝入育苗盤。②組培苗健化前預處理。將已進行煉苗處理的生根組培苗從培養瓶中取出，先用清水將根系上的瓊脂沖洗干凈，再用5%甲基托布津1000倍液浸根3～5?min，放在陰涼通風處晾至根系呈白色后即可進行組培苗健化。③健化方法。用42?cm×42?cm×5?cm的育苗盤，按10?cm×10?cm密度進行健化，每個育苗盤栽種16蔸，每蔸5～6株叢植，移栽時基質含水量控制在30%～40%。④健化管理。健化種苗需噴霧保持幼苗相對濕潤，10～15?d后，開始用自制石斛營養液和磷酸二氫鉀1000～2000倍液交替噴施，每隔15?d噴1次。

7?病蟲害防治

（1）防治原則。病蟲害防治遵循“預防為主，科學防控，依法治理，促進健康”的16字方針，實行生物、物理、化學防治相結合的綜合防治措施。

（2）主要病蟲害及防治方法。藥用植物石斛主要病害有石斛黑斑病Dendrobium?alternaria、石斛炭疽病D.anthracnose?disease和石斛煤污病D.sooty?blotch。預防病害發生應保持生長環境衛生，增強環境通風透光，及時清除有病植株、雜草及殘枝落葉。藥用植物石斛主要蟲害有蛞蝓Agriolimax?agrestis、蝸牛Fruticicolidae和石斛菲盾蚧Phenacaspis?dendrobii。預防蟲害發生應及時捕捉害蟲，同時利用生物農藥防蟲，及時清除有蟲植株、雜草及殘枝落葉，改善環境條件。主要的防治方法見表1。

8?種苗出圃

（1）出圃時間。種苗在蔭棚內健化1～2?a后才能出圃上山定植，以春季3～5月為宜。

（2）種苗規格。單株苗高4～5?cm，葉片濃綠，葉數5～8?片，根數4～5?條，根長2.5～3.5?cm，每蔸8～10?株。

（3）出圃要求。起苗前2～3?d應噴水保證基質濕潤，減少起苗傷根。種苗要求生長健壯、無感染、無黃化，無檢疫性病蟲，無病蟲害。根系發達，分布均勻，無機械損傷。

（責任編輯：鄭京津）