茶葉中茶多酚的檢測方法研究

朱 虹

（河北化工醫藥職業技術學院，河北石家莊 050026）

1 引言

茶多酚(Tea Polyphenols)又叫茶鞣質、茶單寧，是茶葉中酚類物質的總稱。是決定茶湯滋味、顏色的主體成分，也是決定茶葉品質的關鍵物質[1]。茶多酚主要包括兒茶素類、黃酮苷類、酮類以及青花素等。研究結果表明，茶多酚具有抗氧化[2]、抗腫瘤[3]、抗動脈粥樣硬化[4]、抗炎抑菌[5]、抗輻射[6]、降血脂等作用。茶多酚除了廣泛應用于藥品中，還可作為保鮮劑應用于食品工業中，由于具有抗衰老、防輻射的特點，被添加在護膚霜、防曬霜等化妝品中。

由于茶多酚廣泛的應用前景，目前對茶葉中茶多酚的研究受到國內外的關注，因此準確、高效、簡便的檢測方法對于茶多酚的研究具有重要意義。

2 檢測方法

2.1 滴定法

滴定法的測定原理是：茶多酚本身具有還原性，能被具有氧化性的高錳酸鉀溶液所氧化，以靛紅為指示劑，通過滴定終點的顏色變化，對茶多酚總量進行測定。此方法的缺點是：第一，由于茶葉中含有的其他物質也易被氧化，造成結果準確度不高。第二，終點不易判斷。不同的檢驗人員滴定時會對終點的讀取有差異，造成結果誤差偏大。雖然此法對茶多酚含量的測定有一定的誤差，但是由于實驗儀器經濟、方法簡便易行，目前仍有一些茶飲行業在應用。

2.2 分光光度法

分光光度法的測定原理是：在適當濃度的稀溶液中，被測物質的吸光度與濃度之間具有一定的線性關系，通過在特定的波長處測定被測物質的吸光度，或者在一定波長范圍內測定被測物質的吸收光譜，來對被測物質進行定量和定性的分析方法。包括可見分光光度法、紫外分光光度法、原子吸收分光光度法等。

2.2.1 可見分光光度法

可見分光光度法是傳統的茶多酚總量的測定方法，主要有酒石酸亞鐵比色法和福林酚比色法。酒石酸亞鐵比色法的測定原理是在一定pH條件下，茶多酚與酒石酸亞鐵絡合反應生成紫色絡合物，在540nm處測定吸光度。此方法簡便、快速、重現性好。但是也有缺點：測定結果易受pH值的影響；不同的多酚物質對酒石酸亞鐵的顯色有差異，不同廠家、不同品質、不同工藝、不同原料生產的多酚組成往往不一樣,故用此法很難找到一種比較理想的對照品[7]。福林酚比色法是目前的國標法，其測定原理是鎢鉬酸與多酚類物質進行氧化還原反應生成藍色化合物，在765nm處測定吸光度。此方法簡便、快速、重現性好、試劑用量少，并且有研究表示此方法與酒石酸亞鐵比色法相比，測定結果更接近真實值[8]。

2.2.2 紫外分光光度法

紫外分光光度法的原理是基于茶多酚具有不飽和結構，分別在320～380 nm(吸收帶I)和200～270 nm(吸收帶Ⅱ)有深度吸收峰。根據大多數酚類最大吸收峰波長的確定，一般選擇在205 nm和375 nm波長處進行測定。

2.2.3 原子吸收分光光度法

原子吸收分光光度法測定茶多酚一般用間接測定法，即利用茶多酚與金屬離子絡合生成沉淀，通過測定沉淀中的金屬離子或上清液中剩余的金屬離子，來間接測定茶多酚的含量。有文獻報道，利用醋酸銅與多酚物質進行反應測定茶多酚的含量，實驗結果發現茶葉中的氨基酸成分對實驗有干擾，造成實驗結果誤差很大。廖曉玲等[9]調節實驗條件，使多酚與堿式乙酸鉛絡合反應生成難溶的沉淀，通過測定上清液中的鉛離子的含量，間接測定茶葉中的多酚含量，研究結果表明該法具有簡便快速、實際用量少等優點，可用于微量茶多酚含量的測定。

2.3 色譜法

色譜法具有較高的靈敏度和較強的專屬性，因此可用于茶多酚組分的定性和定量測定。

2.3.1 高效液相色譜法

高效液相色譜法具有準確度高和分離度好的特點，是目前檢測茶葉中多酚類物質應用最廣泛的方法。目前國標中對茶葉中兒茶素類的檢測就是高效液相色譜法。

目前大多數的文獻的樣品前處理方法是采用溶劑提取法，一般選用沸水浸提，還有模擬飲茶習慣按一定茶水比浸泡一定時間。儀器條件使用較多的檢測器是紫外檢測器和二極管陣列檢測器。色譜柱多采用反相色譜柱C18。流動相一般采用含酸(如甲酸、乙酸、磷酸)的甲醇或乙腈的水溶液，研究表明酸的存在有助于改善某些化合物的峰型。

2.3.2 氣相色譜法

氣相色譜法對于測定茶多酚中的易揮發性成分有很好的效果，但是對于大部分多酚物質需要進行衍生化才能進行測定，步驟相對較繁瑣，實際應用不如高效液相色譜法廣泛。

2.4 其他檢測方法

除了以上介紹的一些方法，文獻研究中還有其他一些方法，如電化學分析法、紅外光譜法、色譜聯用技術、毛細管電泳法、核磁共振法、流動注射法和色度分析法等，但由于分析方法或儀器設備的局限性，目前為止實際應用較少。

3 研究展望

隨著茶多酚應用范圍的不斷擴大，檢測要求和儀器性能的不斷提高，茶多酚的檢測方法仍需不斷改進與優化，例如，提高茶多酚檢測結果的準確度和精密度；研究快速有效的樣品前處理方法；研究高通量快速檢測茶多酚的方法；發展新型現代化綠色環保檢測技術等。