白術化學成分的檢測方法及其研究進展

曾星星 ，鹿愛娟 ，高曉慧 ，馬 寧 ，王建芬

（1.長沙醫學院，湖南長沙 410219；2.新型藥物制劑研發湖南省重點實驗室培育基地，湖南長沙 410219）

白術味苦、甘，性溫[1]，對人體的消化道、神經系統、子宮平滑肌等作用顯著，此外，還能夠有效調節人體免疫功能，可食用，被許多養生家當作養生佳品[2-3]，民間通常以之代茶飲、泡酒、烹調佳肴等，是一種良好的功能保健食品原料。

1 化學成分及提取方法

1.1 揮發油

白術中的揮發油成分含量為1.4%～2.4%[4]，且當土壤、產地、收獲期、采收期、炮制工藝等條件發生變化時也會引起組成與含量的差異，其功能成分包括蒼術醇、蒼術酮、蒼術內酯、白術內酯[5]等物質，李孟璇等人[6]對不同年限的白術揮發油含量進行分析比較后得知，一年生白術中的揮發油含量明顯低于2年生白術，且其揮發油成分大致相似。

關于揮發油的提取方式多種多樣，其中主要的方法有煎煮、滲漉、水蒸氣蒸、超臨界萃取、溶劑萃取、超臨界萃取-分子蒸餾等[7]。臨床研究[8]表明，采用滲漉方式對揮發油進行提取時得到的成分較為完全；采取傳統水煎方法提取造成的揮發量較多；采取水蒸氣蒸提取時的效果往往不是十分理想，究其原因可能與揮發油的組成成分相關，進行蒸餾時的溫度較高，造成揮發油的某些成分分解或者聚合等，該提取方法較適用于新鮮樣品的提取；溶劑提取方式的提取效率較高，其萃取率可達到2.019%，而采用常規水蒸氣蒸法提取的概率僅為0.885%左右；進行超臨界萃取時的萃取回收率與萃取時間息息相關，萃取時間越長，萃取回收率就越低；將分子蒸餾與超臨界萃取2種提取方法相互聯合使用，可明顯提高揮發油的提取效果，且相比分子質量較小的成分提取量也明顯提高，與傳統的水蒸氣蒸提取方法相比較，該提取方式具有高效、低溫、無污染等優勢。

揮發油的主要檢測方法包括紫外分光光度法、薄層色譜法、HPLC法、液相色譜/質譜聯用技術等。其中薄層色譜法通常用于石油醚、乙醚、正己烷等有機試劑的提取，陳琴華等人[9]采取正己烷索氏提取法對白術精油進行提取后再采取薄層掃描法對蒼術酮含量進行有效測定，得知其含量占據揮發油的32.44%，占生藥的0.66%。

1.2 白術多糖

其組成成分與土壤、產地、收獲期、采收期、炮制工藝等因素息息相關，臨床上主要采取煎煮法進行提取，而其檢測方法一般采納苯酚-硫酸法與蒽酮-硫酸法。

劉洪波[10]采用上述檢測方法對白術炮制品的還原糖與水溶性糖進行測定，結果表明其還原糖含量明顯增加，當炮制程度越高時，其含量就越高；其中采用焦白術炮制方法的水溶性多糖含量明顯高于其他種類的炮制方式；清炒白術的水溶性多糖含量要高于白術；其中焦白術與生白術的多糖含量分別為31.31%，41.74%。這與鄭芳、盧燕平等人[11-12]的研究結論差異較大，由此可證明白術多糖的含量與白術的提取方式、品種等息息相關。

1.3 無機元素

潘利文等人[13]對白術的相關微量元素進行了系統的分析探討，并對沸水與氯仿進行含量提取，比較不同微量元素的檢出率與乙醇溶液溶度的相關性。結果顯示，與氯仿提取液的含量相比，其水煎液中的微量元素含量較低，進一步驗證了微量元素以有機結合形態存在的情況居多。其中Ca的溶出率僅為13.9%，但其檢測含量較高；K的溶出率較高，為88.5%；Fe與Mn的溶出率均在30%～35%。此外，研究還發現，當乙醇溶液濃度降低時，上述各元素的提取概率逐漸上升，且無水乙醇中的提取率非常低，最低僅為1.4%[14]。

1.4 蛋白質

李清初等人[15]對白術中的蛋白質成分進行分析，并采取微量雙縮脲法進行測定，結果顯示其含量為11.5%。

2 生理活性研究

臨床研究顯示，白術揮發油的作用顯著，主要包括促進胃腸分泌、抑制子宮平滑肌、增強胃腸血液循環、抑制腫瘤生長、降血糖、保護肝臟等。前期研究多集中于白術揮發油，近幾年來隨著臨床研究的深入，對白術多糖的生理活性研究取得了一定的進展，現將研究成果進行歸納總結，主要包括以下幾點。

2.1 促進腸胃運動

白術水煎后可有效促進小鼠腸胃運動，主要與α受體相關[16-17]。當給予小劑量的水煎劑時，其對小鼠的回腸平滑肌收縮抑制作用較輕微，當加大藥物劑量后，進一步加強了平滑肌的收縮功能，二者之間呈正相關。

2.2 免疫調節

臨床研究顯示，白術多糖PAM對小鼠具有良好的免疫增強效用。當白術多糖劑量相當時，將在一定程度上增加免疫器官的總量，使得其巨噬細胞的吞噬功能進一步增加，同時還可使得白細胞數量增加；當小鼠體內的溶血素水平增加時，將進一步刺激B細胞的分化增殖能力，使得機體內的抗體水平增加，從而有效提高免疫功能。

2.3 抗腫瘤、調節淋巴細胞

白術多糖PAM可以有效促進淋巴細胞的轉化功能，使得其進一步向成熟T淋巴細胞進行轉化，從而加強外周血T淋巴細胞的染色率，有效抑制腫瘤的發生，究其原因與β-腎上腺素受體激動劑相關。此外，白術還可使得瘤細胞增殖率有效降低，使得瘤組織侵襲性減低，提高抗腫瘤反應能力等。其對腫瘤產生的抑制效果可能與白術多糖對免疫機能的增進效用相關。

2.4 延遲衰老

白術具有良好的抗氧化效用，可以有效抑制有害物質對組織結構功能的破壞，此外還具有提高SOD活性的征象，使得機體對自由基的清除能力增強，減少機體的損傷。李姿慧等人[18]研究表明，采用白術煎劑用于試驗檢測中發現，該類物質可使得丙二醛含量有效降低，提高小鼠GSH-Px活力，延緩衰老作用顯著。

2.5 調節植物神經系統

研究表明，白術可有效調節植物神經系統，在此基礎上將其用于消化道功能紊亂患者的臨床治療中，可達到補脾的效用。其中β-桉葉油醇可有效降低骨骼肌乙酰膽堿受體的敏感性，其中白術中蒼術醇的抗膽堿效用顯著，具有良好的Ca2+拮抗效果[19]，多種成分共同作用使得白術的鎮痛作用顯著。

2.6 降血糖

白術用于降血糖的作用顯著，可加速葡萄糖代謝。其中白術內酯A對于高血糖小鼠具有良好的降血糖效果。β-桉葉油醇可使得神經肌肉接頭被阻斷，并有效降低糖尿病并發癥的發生率；給予適量的白術煎劑可有效保護肝臟；白術中的酸性多糖成分可有效減少糖尿病小鼠的耗食量與飲水量，使得血糖水平明顯降低等。

2.7 白術多糖對人外周血來源的樹突狀細胞（dendritic cells，DC）表型與功能的影響

（1） 白術多糖對DC表型的影響。DC分別經過不同質量濃度的白術多糖連續作用24 h后，分別收集于流式管內，并注入 20 μL的 PE-HLA-DR，PE-CD83，FITC-CD86，再給予5×105的細胞懸液100 μL，將其充分搖勻，在常溫下保存0.5 h，并采用流式細胞儀進行檢測。結果得知，顯示白術多糖均可上調CD83，CD80，CD86，HLA-DR表達，可有效促進DC表型的成熟。對于不同質量濃度的白術多糖顯示為劑量依賴性，經過臨床檢測后得知，其最適宜的白術多糖劑量為100 μg/mL[20]。

（2） 對DC吞噬功能的作用效果。DC在不同質量濃度的白術多糖溶液內連續作用24 h后兌入FITC-dextran 1 mg/mL，于37℃條件下保存60 min，然后連續沖洗2次（采用PBS），并采用流式細胞儀進行檢驗。結果表明，成熟的DC其吞噬功能較弱，反之則較強。收集細胞檢測后顯示DC吞噬FITC-dextran的能力逐漸降低，呈現為劑量依賴性。

（3） 對DC分泌IL-12與TNF-α的影響。收集細胞后采集總蛋白，并進行電泳試驗，連續電泳30 min，濃縮膠80 V，分離膠120 V電泳1 h，給予聚偏氟乙烯進行轉膜處理，連續轉膜1 h，給予脫脂奶粉封閉，給予抗TLR4于4℃條件中進行孵育，后加入二抗于常溫下連續孵育2 h，采用化學發光顯影法分析其參數條帶灰度值、目標條帶灰度值等。結果表明，采集細胞上清液后對IL-12與TNF-α進行ELISA檢測，結果得知白術多糖可使得上述參數值的分泌量增加，顯示為劑量依賴性。

3 結語

白術作為臨床上較為常用的一種中藥材，應用范圍十分廣闊，常規用藥范圍包括燥濕利水、健脾益氣、安胎、止汗等，此外，還可用于抗氧化、抗腫瘤、抗炎、防止老年癡呆等方面。其中，許多藥理成分并不十分明確，如燥濕利水、安胎等的活性成分。今后臨床研究中將進一步加強白術中活性成分的探討，包括其發揮作用的具體活性成分、作用方式、作用機制等，以便為白術的臨床應用提供更加可靠的依據。

近年來，許多專家學者均對白術進行了相關的研究分析，研究內容包括揮發油、白術多糖、白術內酯類等化學成分的提取與藥理作用等方面，且取得了一定的研究進展。目前已明確，白術揮發油具有良好的抗腫瘤效果，白術多糖可有效提高免疫力，是提高免疫力的有效成分之一，白術內酯Ⅰ是白術健脾運脾的有效成分等。白術在我國各地均有分布，歷史上對白術的炮制方式多種多樣，這在一定程度上使得白術的活性成分與含量、種類等遭受一定的破壞，導致用藥效果受到影響[21-22]，且《中國藥典》（2015年版）對白術的質量研究中缺乏具體的量化指標，提示今后應加大力度建立更加完善可靠的質量評價體系，促進白術用藥的安全穩定性。