部分豬場豬瘟和藍耳病抗體檢測與分析

劉保紅

（河南省鄭州市中牟縣畜牧中心451450）

豬瘟和藍耳病是我國豬場多發的傳染性疫病，嚴重阻礙我國養豬業的健康發展[1，2]。隨著我國養豬業不斷向集約化、規模化方向發展，豬的養殖密度越來越高，豬群的購入或外調頻率逐漸頻繁，導致疫病發生概率也相應提高，目前對于豬瘟、藍耳病等傳染性疫病的防控措施主要以預防為主。對豬群的豬瘟和藍耳病抗體進行監測，有利于了解豬場豬瘟和藍耳病疫苗免疫效果和及時調整免疫程序，對相應疾病防控措施的制定有重要的指導意義[3]。基于此，于2017年4～8月應用ELISA檢測技術對中牟縣部分豬場的629份豬血清樣品進行豬瘟和藍耳病抗體水平監測，旨在初步了解當地豬場對豬瘟和藍耳病的防控效果。

1 材料與方法

1.1 相關定義

豬瘟抗體陽性豬：用豬瘟阻斷ELISA試劑盒檢測為豬瘟抗體陽性的血清對應的豬只。

豬藍耳病抗體陽性豬：用藍耳病抗體檢測試劑盒檢測為豬藍耳病抗體陽性的血清對應的豬只。

豬瘟抗體合格場：豬瘟抗體陽性率大于等于70%的豬場。豬藍耳病抗體合格場：豬藍耳病抗體合格率大于等于70%的豬場。

1.2 抽樣方案設計

采用兩階段隨機抽樣結合便利抽樣方法進行抽樣方案設計。

第一階段選擇規模豬場采用便利抽樣方式選擇6個規模化豬場為研究對象。

第二階段分別計算每個規模豬場的抽樣數量。規模場內豬只數量計算按估計流行率的方法[4]計算，按95%置信水平，預期陽性率90%（豬瘟和藍耳病采用同樣的預期陽性性），7%的可接受誤差，群體數量均按無窮大，計算公式為，則場群內需抽取不少于70只豬的全血。所有豬場按照配額方法隨機選擇仔豬（1～3周齡）、保育豬（4～10周齡）、育肥豬（11～20周齡）和繁殖母豬（＞20周齡）。

1.3 血清樣品

根據1.2設計的抽樣方案，最終本次研究獲得來自上述6個規模豬場的629份豬血清豬場編號分別為A、B、C、D、E和F，各豬場血清樣品數量分別為80、92、94、76、121和166份，從前腔靜脈采集血液5ml/頭，實驗室常規方法分離血清，保存于-20℃，待檢。

1.4 主要試劑盒

本次研究所用的豬瘟阻斷ELISA試劑盒 （批號：20161207）和藍耳病抗體檢測試劑盒（批號：20170123）分別購于武漢科前生物科技有限公司和荷蘭Biochek公司。

1.5 檢測方法及判定標準

試驗檢測方法和判定標準均參考試劑盒說明書進行操作和判定。

1.6 數據分析

用Excel整理采集到的數據，用SPSS23進行統計學卡方檢驗。

2 結果與分析

2.1 中牟縣部分豬場豬瘟抗體檢測結果

本次研究共對中牟縣6個豬場的629份血清樣品進行豬瘟抗體檢測，結果顯示，517份血清樣品檢測為豬瘟抗體陽性，平均陽性率為82.19%，達到了農業農村部高于70.0%的要求，說明受免疫得豬群得到較好保護，但不同豬場豬瘟抗體陽性率絕對值存在一些差異，為66.25%～91.56%，群合格率為83.3%（1/6），從總體統計學檢驗來看差異也不顯著（經卡方檢驗，p≥0.05），但A豬場豬瘟抗體陽性率稍低于70.0%，為66.25%；通過分析不同發育階段豬群豬瘟免疫效果發現，仔豬、保育豬、育肥豬和繁殖母豬豬瘟抗體陽性率分別為86.55%、69.44%、83.22%和87.0%，總體而言，各階段豬瘟抗體陽性率之間差異不顯著（經卡方檢驗，p≥0.05），但從保育豬和育肥豬豬瘟抗體檢測情況看，A場、B場和D場存在一些合格率低于70.0%的情況。

2.2 中牟縣部分豬場藍耳病抗體檢測結果

通過對中牟縣6個豬場的629份血清樣品進行藍耳病抗體檢測，結果顯示，584份血清樣品檢測為藍耳病抗體陽性，其平均陽性率為92.85%，說明當地豬群藍耳病免疫情況較好，豬群能得到較好的保護；不同豬場藍耳病抗體陽性率存在一定差異，但均在85.0%以上，且群合格率為100%，從總體統計學檢驗來看差異也不顯著（經卡方檢驗，p≥0.05）；通過分析不同發育階段豬群藍耳病抗體陽性率差異，與豬瘟抗體陽性率類似，保育豬群抗體陽性率相對較低，為82.63%，而仔豬和育肥豬群抗體陽性率相對較高，分別為89.92%和91.61%，繁殖母豬抗體陽性率最高，為97.30%。但總體來說，各階段豬之間豬瘟抗體陽性率之間差異不顯著（經卡方檢驗，p≥0.05）。

3 討論

本次于2017年4～8月對中牟縣部分豬場進行豬瘟和藍耳病抗體水平檢測，旨在通過檢測了解當地豬場豬瘟和藍耳病的免疫效果，為疫病防控措施的制定提供參考。檢測結果顯示，被檢測的629份豬血清樣品中分別有519份和584份樣品檢測為豬瘟和藍耳病抗體陽性，平均陽性率分別為82.19%和92.85%，豬瘟和藍耳病抗體合格率均高于國家制定標準（＞70.0%），而通過調查也發現，這些規模化豬場場長們對豬瘟和豬藍耳病的免疫比較重視，雖然檢測場數不是太多，但從側面也反映出該地區受免疫豬群維持較高的免疫保護水平。通過分析不同豬場這2種傳染病抗體檢測差異發現，6個不同豬場豬瘟抗體陽性率分別為66.25%、82.60%、82.98%、72.36%、85.12%和91.56%；藍耳病抗體陽性率分別為85.0%、95.65%、89.36%、88.15%、93.39%和92.77%，只有A豬場豬瘟抗體合格率低于國家制定標準，且該豬場藍耳病抗體合格率也稍低于其他被檢豬場，其原因可能與該豬場飼養水平較低或疫苗免疫程序不規范有關；通過分析不同生長發育階段豬群這2種傳染病血清抗體陽性率發現均為保育豬階段豬群抗體陽性率較低，分別為69.44%（豬瘟）和82.63%（藍耳病），甚至部分豬場保育豬豬瘟血清抗體陽性率不足50.0%，說明此階段豬群可能容易感染豬瘟，應加強免疫。值得注意的是，此次研究僅對血清樣品進行抗體檢測，無法區分是野毒感染或疫苗接種所產生的抗體，需要進一步試驗以確定是否為野毒感染。