角膜緣干細胞移植聯(lián)合絲裂霉素C及羊膜移植治療復發(fā)性翼狀胬肉的美學效果

岳章顯 劉漢珍

[摘要]目的：觀察角膜緣干細胞移植聯(lián)合絲裂霉素C及羊膜移植治療復發(fā)性翼狀胬肉的美容效果。方法：選擇復發(fā)性翼狀胬肉患者46例53眼，在顯微鏡下行復發(fā)性翼狀胬肉切除、角膜緣干細胞移植聯(lián)合絲裂霉素C及羊膜移植，術后觀察3～24個月。結果：本組共46例53眼，51眼術后舒適，角膜、結膜面光滑平整，表面無充血，無新生血管及翼狀胬肉組織再復發(fā)，眼部美觀改善，復發(fā)2眼，復發(fā)率為3.77%。結論：角膜緣干細胞移植聯(lián)合絲裂霉素C及羊膜移植治療復發(fā)性翼狀胬肉再復發(fā)率低，創(chuàng)面修復好，安全可靠，眼部美容效果好。

[關鍵詞]角膜緣干細胞移植；絲裂霉素C；羊膜移植；復發(fā)性胬肉

[中圖分類號]R622 [文獻標志碼]A [文章編號]1008-6455（2018）09-0077-03

The Aesthetic Effect of Limbal Stem Cell Transplantation Combined with Mitomycin C （MMC） and Amniotic Membrane Transplantation for Recurrent Pterygium

YUE Zhang-xian1，LIU Han-zhen2

（1.Department of Ophthalmology；2.Department of Stomatology，Central Hospital of Xiaogan，Xiaogan 432000，Hubei，China）

Abstract： Objective To observe the cosmetic effect of limbal stem cell transplantation with mitomycin C（MMC） and amniotic membrane transplantation for recurrent pterygium. Methods Forty-six cases with recurrent pterygium were collected. The recurrent pterygium was dissected under the microscope. The dissected area was applied with limbal stem cell transplantation and mitomycin C and amniotic membrane transplantation. We had postoperative follow-up from three months to two years. Results There were 46 cases（53 eyes）. Postoperative comfort，smooth and smooth corneal and conjunctival surfaces， no congestion， no recurrence of neovascularization and pterygium， and improvement of eye aesthetics were observed in 51 eyes. The recurrence rate was 3.77%（2/53）. Conclusion Limbal stem cell transplantation with mitomycin C（MMC） and amniotic membrane transplantation had good result for recurrent pterygium.Wound recovery was good.Recurrence rate was low. The method was reliable.

Key words： limbal stem cell transplantation； mitomycin C； amniotic membrane transplantation； recurrent pterygium

翼狀胬肉切除術后復發(fā)在臨床非常多見，如果病情發(fā)展到一定程度可誘發(fā)散光、視力下降、瞼球粘連、干眼癥、眼球刺激征等一系列臨床癥狀[1-2]，嚴重影響到患者的視功能和眼部外觀，而且，復發(fā)翼狀胬肉下的角膜和鞏膜部容易形成更多的瘢痕[3]，改進手術方法達到翼狀胬肉組織切除干凈，角膜面平滑及防止復發(fā)的目的，一直是眼科同仁較為關注的問題[4-5]。為了獲得良好視力和美容效果，而且要降低術后復發(fā)率，筆者科室自2010年開始采取復發(fā)性翼狀胬肉切除聯(lián)合角膜緣干細胞移植、絲裂霉素應用及羊膜移植，獲得了滿意療效，現(xiàn)報道如下。

1 資料和方法

1.1 一般資料：選取2010年1月-2015年12月在筆者醫(yī)院治療的復發(fā)性翼狀胬肉患者46例53眼，其中男22例26眼，女24例27眼；年齡38～65歲，平均50.5歲；均為復發(fā)性翼狀胬肉患者，術后復發(fā)時間為3個月～5年，翼狀胬肉頭部伸入角膜緣2～6mm。術前排除眼表活動性炎癥，排除嚴重全身性疾病不能手術者，合并高血壓、糖尿病者，將血壓、血糖控制在手術范圍。

1.2 手術方法

1.2.1 術前準備：術前常規(guī)使用左氧氟沙星、氟米龍滴眼液（均為參天制藥株式會社）1～3d，沖洗淚道無膿性分泌物反流。取出生物羊膜（江西瑞濟生物工程技術股份有限公司），用生理鹽水浸泡備用。

1.2.2 麻醉：愛爾凱因滴眼液滴術眼3次，間隔3min，手術在顯微鏡下進行，20g/L利多卡因針劑4號皮試針頭于胬肉頸部結膜下一邊推注一邊進針，達胬肉體部和根部。

1.2.3 復發(fā)性翼狀胬肉切除：于復發(fā)性翼狀胬肉頭部前0.5mm，用刀片切開角膜上皮層，采取推、刮法分離角膜面翼狀胬肉組織，盡量在同一角膜平面進行，使剝離的角膜面平整；提起胬肉頭部，鈍性分離頸部和體部，有瞼球粘連者，完全松解瞼球粘連，分離結膜瘢痕組織，直到眼球運動不受限；于半月皺襞處減除胬肉組織，包括周圍增厚的筋膜、變性的球結膜；避免損傷內直肌及其筋膜囊；鞏膜面墊熱濕紗布熱灼出血點，徹底止血。

1.2.4 絲裂霉素C（Mitomycin C， MMC）應用：用0.02%的MMC濕紗布置于裸露的鞏膜面及周圍球結膜下3min，取走棉片，生理鹽水200ml徹底沖洗手術區(qū)。

1.2.5 角膜緣干細胞移植：顳上方結膜下注射20g/L利多卡因針劑約0.2ml，取帶角膜緣上皮組織的球結膜植片，不含有結膜下筋膜組織，大小約3～5mm×4mm，此處傷口不需要縫合，要越過角膜緣約1～2mm，深度不傷及基質層，將植片移至鞏膜裸露區(qū)植床上，上皮面朝上，植片角膜緣與植床角膜緣對位吻合，10-0尼龍線上、下淺層角膜緣各固定1針。

1.2.6 羊膜移植：取羊膜覆蓋于角膜緣干細胞移植片后結膜缺損處，羊膜上皮面朝上，基底膜緊貼鞏膜，10-0尼龍線將結膜瓣與其后羊膜間斷縫合，固定于淺層鞏膜面，余結膜切口與其對位連續(xù)交鎖縫合，將羊膜固定于鞏膜表層，剪除多余羊膜。

1.2.7 術后處理：術畢結膜囊內涂氧氟沙星眼膏加壓包扎，每日于裂隙顯微鏡下檢查，典必殊眼藥水滴術眼，每日4～6次，睡前涂氧氟沙星眼膏，每日觀察角膜上皮修復、植片愈合、羊膜存活等情況，1周后典必殊眼藥水減量，2周后拆除縫線。

1.3 美容效果評定標準：治愈：結膜無充血、瘢痕增生，角膜透明或殘留薄翳，角膜面光滑；顯效：結膜輕度充血、瘢痕形成，角膜創(chuàng)面基本修復，無新生血管；復發(fā)：結膜充血、增生，纖維血管組織形成，角膜面胬肉組織，角膜創(chuàng)面出現(xiàn)新生血管。

2 結果

所有病例術后1～3d出現(xiàn)不同程度的刺激癥狀，術后24h癥狀逐漸減輕；3～4d角膜上皮基本修復。術后1周內，結膜充血、組織水腫，未發(fā)現(xiàn)排斥現(xiàn)象，術后10d，羊膜表面球結膜上皮化，刺激癥狀明顯減輕，1眼出現(xiàn)羊膜溶解。本組病例46例53眼，治愈45眼，顯效6眼，復發(fā)2例，復發(fā)率為3.77%。

3 討論

Das等發(fā)現(xiàn)翼狀胬肉術后使角膜緣干細胞破壞，正常的角膜上皮表型不能重建，是翼狀胬肉復發(fā)的關鍵[6]；竇裕平在自體角膜緣干細胞的移植治療復發(fā)性翼狀胬肉中獲得了滿意的美容效果[7]。這些都說明了角膜緣干細胞的重要性。再次手術的復發(fā)性翼狀胬肉在角膜緣局部形成了角膜緣缺失和局部干細胞缺乏，采取角膜緣干細胞移植，通過干細胞的增生分化達到了修復生長的作用[8-9]，使角膜恢復透明。角膜緣的Vogt柵狀皺紋區(qū)是干細胞所在處，有阻止結膜上皮、血管向角膜內生長的欄柵作用，防止翼狀胬肉復發(fā)[10]。劉輝等[11]證實，角膜緣干細胞移植能安全有效地減少復發(fā)性翼狀胬肉的術后復發(fā)。絲裂霉素C是從頭狀鏈霉素培養(yǎng)液中分離提取的一種廣譜腫瘤抗生素，為抗代謝藥，其作用原理是使細胞的DNA解聚，同時阻礙DNA的復制，可抑制纖維細胞的增生，臨床上常用的防治翼狀胬肉復發(fā)的藥物中，絲裂霉素C作用更為顯著[12]。類似腫瘤發(fā)生前性質[13]。0.02%的絲裂霉素C能抑制這種異常的增生，阻滯手術區(qū)血管再生。纖維組織增生和瘢痕，達到降低再復發(fā)的幾率，這與張春排等[14]的研究結果一致。智淑平等[15]也認為，0.02%的絲裂霉素C的應用對復發(fā)性翼狀胬肉更具有意義，無毒副反應產(chǎn)生。高琳等[16]等用低濃度的絲裂霉素C，同樣可降低復發(fā)性翼狀胬肉再復發(fā)率，而且并發(fā)癥更低。這也是我們使用0.02%的絲裂霉素C的原因之一。本次結合復發(fā)性翼狀胬肉的特點，用0.02%的絲裂霉素對癥處理，未見上皮延遲愈合、鞏膜溶解、壞死，未見角膜潰瘍、穿孔及手術植片壞死、脫離等并發(fā)癥。羊膜由較厚的基底膜和無血管的基質組成，不表達HLA-A、B、C及抗原?？乖缘?，移植后不發(fā)生排斥反應，富含結膜、角膜上皮細胞生長所必需的營養(yǎng)物質，在有健康的結膜上皮的支持情況下，可以獲得重建結膜表面的鞏膜。而且在重建角膜表面上，能夠修復角膜緣基質微環(huán)境。羊膜含有蛋白酶抑制因子，能夠通過抑制蛋白酶而發(fā)揮抗炎作用；同時還具有抑制纖維血管組織增生、減少眼表瘢痕組織形成，還可以促進杯狀細胞增生[17]。復發(fā)性翼狀胬肉有一些特點，結膜瘢痕化后需切除范圍較大，羊膜可促進結膜缺損修復，從而建立眼表面良好的生物學微環(huán)境，使創(chuàng)面修復更快。新鮮羊膜優(yōu)點很多，微生物羊膜可在常溫下運輸儲存，其制備從取材到保存都是按標準化流程，使用更加方便安全，武勁圓等[18]發(fā)現(xiàn)新鮮羊膜與生物羊膜均可有效治療復發(fā)性翼狀胬肉，兩者之間差異無統(tǒng)計學意義。

術中注意事項：①分離胬肉頭部時，復發(fā)的翼狀胬肉頭部和角膜粘連緊密，采取推、刮法，可保持角膜面的光滑；②取角膜緣植片時，結膜瓣要盡量薄，不帶筋膜組織，避免損傷結膜瓣；③切除胬肉組織時，采取擴大切除，可降低復發(fā)率[19]；④使用絲裂霉素時，不要接觸角膜，術中用200ml生理鹽水沖洗干凈，特別是穹窿部結膜，同時將血痂清除干凈，防止絲裂霉素C的殘留；⑤羊膜移植時，鞏膜裸露區(qū)徹底止血，緊貼創(chuàng)面不移位，防止羊膜植片積血及植片縫合不牢固而導致羊膜植片溶解。

本研究取得了良好的效果，術后復發(fā)率為3.77%，低于楊良的復發(fā)率5.7%，這可能與術中使用羊膜移植有關。術中將羊膜面胬肉組織切除干凈，使角膜面平整、光滑，且無胬肉組織殘留；將鞏膜面的變性結膜、增厚的筋膜切除，進一步減少了翼狀胬肉殘留的可能；自體角膜緣干細胞移植，恢復了結膜和角膜之間的屏障作用，阻止新生血管及纖維阻止長入；更易于角膜創(chuàng)面愈合、鞏膜面愈合；絲裂霉素的抗增值作用，抑制了創(chuàng)面肉芽形成和血管新生[20]；再結合羊膜的特性，使創(chuàng)面愈合時間更短，創(chuàng)面愈合更好，美容效果肯定，再復發(fā)率低，安全性高。

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[收稿日期]2018-04-28 [修回日期]2018-05-23

編輯/朱婉蓉