超聲波提取甘薯葉多糖抗氧化性研究

周 宏

（內蒙古民族大學 化學化工學院 內蒙古 通遼 028043）

超聲波提取甘薯葉多糖抗氧化性研究

周 宏

（內蒙古民族大學 化學化工學院 內蒙古 通遼 028043）

目的：研究甘薯葉多糖清除氧自由基的能力。方法：采用比色法研究甘薯葉多糖清除氧自由基的能力。結果：甘薯葉多糖對?OH和O2-自由基有較強的清除作用，甘薯葉多糖對?OH清除率達到50%所需濃度為0.61mg/mL，同樣條件下甘露醇?OH清除率達到50%所需濃度為0.72mg/mL；甘薯葉多糖對O2-清除率達到50%所需濃度為0.46mg/mL，同樣條件下抗壞血酸O2-清除率達到50%所需濃度0.56mg/mL。結論：甘薯葉多糖清除?OH自由基能力較對照品甘露醇強，清除O2-自由基能力較對照品抗壞血酸弱，并且濃度與清除率呈正相關。

抗氧化活性；甘薯葉；超聲波提取

1 引言

甘薯又名甜薯、紅薯、地瓜，旋花科一年生草質藤本。原產地是美州熱帶地區，16世紀末傳入我國，目前我國已經成為世界最大甘薯生產國。甘薯營養豐富，富含淀粉、糖類、蛋白質、維生素以及各種氨基酸。甘薯可以入藥，性味甘平、無毒，可補脾胃、養心神、益氣力、除宿瘀臟毒[1]。近年來，甘薯葉在一些地區成為一種新型蔬菜。有研究表明甘薯葉具有增強免疫力、促進新陳代謝、抗氧化等醫療保健功效。

本文通過超聲波輔助提取甘薯葉中的多糖成分，用分光光度法對其抗氧化活性做了初步的分析。旨分析其抗氧化性能力，并尋求新的處理、應用方法，提高甘薯葉的應用價值。

2 實驗部分

2.1 儀器和試藥

TU-1810紫外可見分光光度計(北京普析通用儀器有限公司)；Millipak-20 Express過濾器（密理博）；JP300G型超聲波提取儀；DHG-9070型電熱恒溫干燥箱（上海精宏實驗設備有限公司）。

番紅花紅T（生化試劑），無水乙醇，NBT(生化試劑)，EDTA-2Na，硫酸亞鐵銨，Tris，亞硝酸鈉，檸檬酸鈉，鄰苯三酚，鹽酸，抗壞血酸，甘露醇，超純水，甘薯葉（通遼本地產）。

2.2 實驗方法

2.2.1 甘薯葉多糖類物質的提取 取烘干粉碎后的甘薯葉粉末，按液料比1:40用超純水充分浸濕，設定頻率20KHZ、功率選擇500W、溫度60℃條件下提取40min，浸取三次后合并、蒸發、濃縮濾液。冷卻后用無水乙醇稀釋靜置24h，濾出沉淀，干燥后得多糖粗產品。將粗多糖溶解后透析，用無水乙醇重新沉淀，過濾干燥得待測多糖樣品，配制成標準多糖溶液待測。

2.2.2 清除羥自由基(?OH)能力測定 取PBS緩沖溶液1.50mL，依次加入2.0mmol/L的EDTA-Na-Fe(Ⅱ)溶液0.70mL，520μg/mL的番紅花紅T溶液0.20mL，加入不同濃度的多糖試樣1.00mL。6%的H2O2溶液0.40mL，用超純水定容至5.00mL。混合均勻后在37℃水浴中保溫30min。在波長520nm處，用分光光度計測其吸光度A。

清除率E%=（A樣品-A空白）/（A對照-A空白）×100%

2.2.3 清除超氧陰離子(O2-)能力測定 比色管中加入50mmol/L的Tris-HCl（pH=8.2）溶液2.5mL，在25℃水浴20min后，加入不同濃度的多糖溶液2.0mL，0.2%NBT溶液0.50mL，10.0mmol/L的鄰苯三酚0.50mL。加入超純水定容至10.0mL在25℃水浴5min后，立刻用1D濃鹽酸終止反應。選定波長為530nm，測量其吸光度A。

3 實驗結果

3.1 羥自由基(?OH)的清除率

用1.00mL超純水代替多糖溶液做空白，用1.70mL超純水代替多糖溶液和EDTA-Na-Fe(Ⅱ)溶液做對照。同時以甘露醇代替多糖重復上述實驗，具體結果見表1。

3.2 超氧陰離子(O2-)的清除率

用2.00ml超純水代替多糖溶液做空白，同時以抗壞血酸代替多糖重復上述實驗，具體結果見表2。

表1 甘薯葉多糖及甘露醇對?OH的清除作用

表2 甘薯葉多糖及抗壞血酸對O2-?的清除作用

4 討論

通過表1、表2可知甘薯葉多糖對?OH清除率達到50%的濃度IC50為0.61mg/mL，相同條件下對照品甘露醇的清除率達到50%時所需濃度IC50為0.72mg/mL。甘薯葉多糖對O2-清除率達到50%的濃度IC50為0.46mg/mL，同樣條件下對照品抗壞血酸清除率達到50%所需濃度IC50為0.56mg/mL。說明甘薯葉多糖的清除?OH和O2-的能力均較對照品甘露醇和抗壞血酸強。

甘薯葉多糖的濃度對?OH和O2-自由基的清除率呈正相關。

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TS255.1 【文獻標識碼】A 【文章編號】1009-5624（2018）01-0195-02

周宏（1980-），男，漢族，遼寧省綏中縣人，碩士研究生，內蒙古民族大學，化學化工學院，講師，研究方向：材料制備合成或有機物提取。