丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（ALT）檢測在血液篩查中的價值研究

李結(jié)敏 陳志忠 陳尚良 廖揚勛 余文潮 盧少芬 梁劍鋒 李勛偉

[摘要]目的 研究丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（ALT）與甲型肝炎病毒（HAV）、庚型肝炎病毒（HGV）的關(guān)系，評估其在血液篩查中的價值。方法 隨機收集2017年1～12月肇慶地區(qū)無償獻血者血液標本進行考察，檢測輸血五項[乙型肝炎病毒表面抗原（HBsAg）、丙型肝炎病毒抗體（Anti-HCV）、人類免疫缺陷病毒抗體（Anti-HIV）、梅毒螺旋體（TP）、人類T淋巴細胞白血病病毒（Anti-HTLV）]均為陰性。將ALT正常（ALT≤50 U/L）的874份標本作為對照組（其中393份標本作為對照組1，481份標本作為對照組2），ALT異常（ALT>50 U/L）的135份標本作為研究組。采用核酸檢測技術(shù)（NAT）、酶聯(lián)免疫吸附實驗（ELISA）檢測輸血感染五項，采用速率法檢測ALT，采用ELISA方法檢測HAV-IgG、HGV-IgG。回顧性分析2003～2017年肇慶市無償獻血者血液標本，考察HBsAg陽性獻血者（2216例）、Anti-HCV陽性獻血者（664例）中的ALT異常率。結(jié)果 對照組1和研究組標本分別檢測HAV-IgG，對照組檢出352例（89.6%）陽性，研究組檢出110例（81.5%）陽性，研究組的HAV-IgG檢測陽性率低于對照組1，差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。對照組2和研究組標本的HGV-IgG陽性率均為0.0%。Anti-HCV陽性獻血者標本中的ALT異常率為109例（4.9%），高于HBsAg組的161例（24.2%），差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。2216例HBsAg陽性者中，ALT異常109例（4.9%），664例Anti-HCV陽性者中，ALT異常161例（24.2%），HBsAg陽性者中，ALT異常率低于Anti-HCV陽性者，差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。結(jié)論 ALT與HCV有關(guān)聯(lián)，但經(jīng)特異性的ELISA和NAT檢測HCV后，ALT檢測再無益于改善HCV殘余風險。研究組的HAV-IgG陽性率低于對照組，但HAV為非經(jīng)血液傳播疾病，也無助于改善血液安全殘余風險。

[關(guān)鍵詞]丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶；獻血者；血液篩查；殘余風險

[中圖分類號] R457.12 [文獻標識碼] A [文章編號] 1674-4721（2018）9（b）-0158-04

[Abstract] Objective To study the relationship between alanine aminotransferase （ALT） and hepatitis A virus （HAV） and hepatitis G virus （HGV） and to evaluate its value in blood screening. Methods Blood samples from unpaid blood donors in Zhaoqing area from January to December 2017 were randomly collected， and five bloods transfusion tests （hepatitis B virus surface antigen [HBsAg]， hepatitis C virus antibody [Anti-HCV]， human immunodeficiency virus antibody [Anti-HIV]， syphilitic spirulina [TP]， human T lymphocytic leukemia virus [Anti-HTLV]） were negative. Altogether 874 specimens with normal ALT （ALT≤50 U/L） were used as control group （393 specimens were used as the control group 1， and 481 specimens were used as the control group 2）， and 135 specimens with abnormal ALT （ALT>50 U/L） were used as study group. Five blood transfusion infections were detected by nucleic acid detection technology （NAT） and enzyme-linked immunosorbent assay （ELISA）. ALT was detected by rate method， and HAV-IgG and HGV-IgG were detected by ELISA. The blood samples from unpaid blood donors in Zhaoqing City from 2003 to 2017 were retrospectively analyzed. The abnormal rate of ALT in HbsAg positive blood donors （2216 cases） and Anti-HCV positive blood donors （664 cases） was investigated. Results HAV-IgG was detected both in the control group 1 and in the study group， 352 cases （89.6%） were positive in the control group， and 110 cases （81.5%） were positive in the study group. The positive rate of HAV-IgG in the study group was lower than that in the control group 1， and the difference was statistically significant （P<0.05）. The positive rate of HGV-IgG in the control group 2 and in the study group was 0.0%. There were 109 cases （4.9%） of ALT abnormalities in 2216 HBsAg-positive cases and 161 cases （24.2%） of ALT abnormalities in 664 Anti-HCV-positive cases. The abnormal rate of ALT in HBsAg-positive cases was lower than that in Anti-HCV-positive cases， and the difference was statistically significant （P<0.05）. Conclusion ALT is related to HCV， but after the specific test of ELISA and NAT， ALT test is no longer helpful to improve the residual risk of HCV. The positive rate of HAV-IgG in the study group is lower than that in the control group， but HAV is a non-blood-borne disease and did not help to improve the residual risk of blood safety.

[Key words] Alanine aminotransferase； Blood donors； Blood screening； Residual risk

2012版《血站技術(shù)操作規(guī)程》規(guī)定，對獻血者進行丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（ALT）檢測。然而，隨著酶聯(lián)免疫吸附實驗（ELISA）以及核酸檢測技術(shù)（NAT）的逐步完善，近年來有關(guān)ALT在血液篩查中的作用，逐漸成為學術(shù)界爭論的焦點。ALT異常與肝炎性疾病特別是丙型肝炎存在顯著的相關(guān)性，是指示肝功能的指標之一，在肝炎的診斷和治療方面有重要作用。但另一方面，不少學者研究后指出，隨著肝炎特異性診斷試劑技術(shù)的完善以及核酸檢測技術(shù)在血站全面開展的情況下，繼續(xù)開展ALT檢測對保障血液安全顯得意義不大。因此，本研究擬對單純ALT升高的無償獻血者進行血清學研究分析，旨在探討ALT與丙肝、乙肝等肝炎性疾病的關(guān)系，重新評估ALT檢測在血液篩查安全中的作用，為血液安全管理部門以及決策者提供基礎(chǔ)數(shù)據(jù)。

1資料與方法

1.1標本

選取2017年1～12月肇慶地區(qū)無償獻血者的標本進行考察。納入標準：①輸血五項[乙型肝炎病毒表面抗原（HBsAg）、丙型肝炎病毒抗體（Anti-HCV）、人類免疫缺陷病毒抗體（Anti-HIV）、梅毒螺旋體（TP）、人類T淋巴細胞白血病病毒（Anti-HTLV）]檢測陰性，HBV DNA、HCV RNA、HIV RNA的核酸檢測陰性；②對照組及研究組標本均無溶血或嚴重脂血，采用NAT檢測后血漿量應(yīng)>2 ml。排除標準：①輸血五項（HBsAg、Anti-HCV、Anti-HIV、TP、Anti-HTLV）或HBV DNA、HCV RNA、HIV RNA的核酸檢測任一項陽性的標本；②溶血、嚴重脂血或血漿量<2 ml的標本。將ALT正常（ALT≤50 U/L）的874份標本作為對照組（其中393份標本作為對照組1，481份標本作為對照組2），ALT異常（ALT>50 U/L）的135份標本作為研究組。回顧性分析2003～2017年肇慶市的2880份無償獻血者血液標本，考察HBsAg陽性獻血者（2216份）、Anti-HCV陽性獻血者（664份）中的ALT異常率。本研究經(jīng)肇慶市中心血站醫(yī)學倫理委員會審核批準。

1.2試劑與儀器

1.2.1檢測試劑 乙型肝炎病毒/丙型肝炎病毒/人類免疫缺陷病毒（Ⅰ型）核酸檢測試劑盒（PCR-熒光法）（中山大學達安基因股份有限公司）；HBsAg檢測試劑盒（北京萬泰生物藥業(yè)股份有限公司、法國伯樂公司）；抗-HCV檢測試劑盒[英科新創(chuàng)（廈門）科技有限公司、北京萬泰生物藥業(yè)股份有限公司]；抗-HIV檢測試劑盒（北京萬泰生物藥業(yè)股份有限公司）；HIV-Ab/Ag檢測試劑盒（法國伯樂公司）；梅毒抗體檢測試劑盒[英科新創(chuàng)（廈門）科技有限公司、北京萬泰生物藥業(yè)股份有限公司]；HTLV檢測試劑盒（北京萬泰生物藥業(yè)股份有限公司）；ALT檢測試劑盒（深圳邁瑞生物醫(yī)療電子股份有限公司）；HAV-IgG檢測試劑盒（北京貝爾生物工程有限公司）；HGV-IgG檢測試劑盒（北京貝爾生物工程有限公司）。

1.2.2儀器 Freedom evo全自動加樣器處理分析系統(tǒng)（瑞士Tecan公司）；BEPⅢ全自動酶免分析系統(tǒng)（德國西門子公司）；TECAN. SUNRISE酶標儀（瑞士Tecan公司）；ABI7500型實時熒光定量PCR儀（美國應(yīng)用生物系統(tǒng)公司）；Chemagic STAR核酸提取儀（瑞士Hamilton公司）；HH.W21.600型電熱恒溫水溫箱（上海予卓儀器有限公司）；BS-800型全自動生化儀（深圳邁瑞生物醫(yī)療電子股份有限公司）。

1.3方法

采用NAT、ELISA檢測輸血感染五項（HBsAg、TP、Anti-HCV、Anti-HIV，Anti-HTLV）和HAV-IgG、HGV-IgG，采用速率法檢測ALT，采用PCR-熒光法檢測乙型肝炎病毒/丙型肝炎病毒/人類免疫缺陷病毒（Ⅰ型）核酸。

1.4統(tǒng)計學方法

采用IBM SPSS 17.0統(tǒng)計學軟件進行數(shù)據(jù)分析，計數(shù)資料采用率表示，組間比較采用χ2檢驗，以P<0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2結(jié)果

2.1兩組標本HAV-IgG檢出陽性率的比較

研究組的HAV-IgG檢出陽性率低于對照組1，差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05）（表1）。

2.2兩組標本HGV-IgG檢出陽性率的比較

對照組2標本共481份，研究組標本共135份，兩組均未檢出HGV-IgG陽性標本，對照組2和研究組標本的HGV-IgG陽性率比較，差異無統(tǒng)計學意義（P>0.05）。

2.3 HBsAg、HCV陽性獻血者中ALT異常率的比較

Anti-HCV陽性獻血者標本中的ALT異常率高于HBsAg組，差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05）（表2）。

3討論

近年來有關(guān)ALT在血液篩查中的作用逐漸成為學術(shù)界爭論的焦點。以往由于檢測技術(shù)的限制，非甲、非乙型肝炎缺乏特異性檢測方法，而ALT檢測則成為了這類肝炎的替代試驗[1-2]。隨著檢測技術(shù)的不斷發(fā)展，特別是在篩查試劑技術(shù)的不斷完善以及核酸檢測技術(shù)全面開展的情況下，繼續(xù)開展ALT檢測對保障血液安全顯得意義不大[3-6]。2012年國家衛(wèi)生健康委員會提出全面開展獻血前篩查ALT，ALT異常單項報廢的血液已位居首位，甚至報廢率高達4.8%[7]，全面開展獻血前篩查ALT后仍有約0.7%單項ALT異常的報廢。在血液資源日趨緊張的情況下，不少學者建議取消ALT檢測，從而避免血液的不必要報廢[8]。因此，本研究重點分析了ALT檢測對血液殘余風險的影響。

本研究結(jié)果提示，研究組的HAV-IgG陽性率低于對照組1，差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05），但HAV為非經(jīng)血液傳播疾病，故無助于改善血液安全殘余風險。HGV病毒是可經(jīng)血液傳播疾病，目前又尚未納入常規(guī)血液篩查項目。但研究結(jié)果提示，對照組2和研究組標本的HGV-IgG陽性率均為0%，尚未發(fā)現(xiàn)存在差異，故此認為ALT檢測也無助于通過檢出HGV-IgG來改善血液安全殘余風險。

為進一步探討ALT在血液安全檢測中的價值，筆者回顧性分析2003～2017年肇慶市無償獻血者血液標本，進一步分析HBsAg陽性獻血者（2216份）、Anti-HCV陽性獻血者（664份）中的ALT異常率。結(jié)果提示，Anti-HCV陽性獻血者標本中的ALT異常率高于HBsAg組，差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05），提示ALT與HCV存在顯著相關(guān)性。但后續(xù)的結(jié)果提示，135例ALT異常的標本，NAT檢測HBV、HCV結(jié)果均為陰性，提示進行特異性的HCV抗體篩查和HCV RNA檢測后，ALT作為HCV非特異性的篩查手段，對降低輸血傳播風險的意義不大。劉仁強等[9]研究中ALT水平為40～60 U/L的肝炎標志物陰性獻血者的NAT結(jié)果均為陰性，謝月娜等[10]研究中ALT異常率與HCV RNA檢測結(jié)果無相關(guān)性，證實ALT異常的主要因素并非HBV和HCV感染。國內(nèi)外不少專家學者研究認為，由于ALT升高絕大部分為非病理性因素引起，過度運動、飲酒、服用特殊藥物、肥胖、疲勞等因素也可導致ALT的升高[11-13]，ALT水平的升高并不能準確反映獻血者是否患有病毒性肝炎[14-15]，ALT的檢測已經(jīng)失去了其保障血液安全的意義。但我國始終將ALT作為血液篩查項目之一，隨著核酸檢測技術(shù)在全國血站實驗室全覆蓋，其試劑的高靈敏度能大大縮短HBV、HCV感染檢測的“窗口期”[16-17]，能更早發(fā)現(xiàn)肝炎窗口期及隱匿性肝炎，在常規(guī)開展HBV、HCV、和HIV的NAT血液篩查以后，ALT檢測再無益于改善HCV殘余風險。

綜上所述，在篩查試劑技術(shù)不斷完善以及核酸檢測技術(shù)全面開展的情況下，繼續(xù)開展ALT檢測對保障血液安全顯得意義不大。

[參考文獻]

[1]Spurling CL，Saxena S.Controvwesies in transfusion medicine ALT screening of blood donors：con[J].Transfuion，1990，30（4）：368-373.

[2]Blajichman MA.Post-transfusion hepatitis：impast of NANB surrogate tests[J].Lancet，1995，345（1）：21.

[3]劉麗，李大瑋，安潤，等.血液篩查取消丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶檢測的可行性分析[J].中國基層醫(yī)藥，2015，（6）：906-908.

[4]陳錦艷，黃伯全，黎世杰，等.開展HBV和HCV核酸檢測條件下獻血者ALT篩查的意義探討[J].中國輸血雜志，2015， 28（6）：669-671.

[5]劉李棟，孫瑛，朱慧君，等.血站實驗室開展丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶篩查意義的再次探討[J].臨床輸血與檢驗，2016，18（3）：224-229.

[6]王瑞，黃力勤，張婧，等.實施核酸檢測后重新評估獻血者ALT的檢測功效[J].中國輸血雜志，2017，30（9）：1034-1038.

[7]韋水興.2010～2011年河池市無償獻血者ALT快速篩查前后對比分析[J].內(nèi)科，2012，7（6）：629-630.

[8]任本春，卓孝福，周曉真，等.獻血者ALT與HBV、HCV標志物檢測結(jié)果的關(guān)系研究[J].中國輸血雜志，2018，31（2）：144-147.

[9]劉仁強，王德文，劉赴平，等.結(jié)合核酸檢測探討東莞市獻血者ALT的參考范圍[J].中國輸血雜志，2010，23（1）：14-15.

[10]謝月娜，潘彤，李鳳園，等.天津地區(qū)無償獻血者HCV RNA與抗-HCV、ALT檢測結(jié)果相關(guān)性分析[J].中國輸血雜志，2015，28（2）：171-174.

[11]董勤敏，王靜，胡媛，等.獻血中非病理性ALT增高的原因分析[J].中國衛(wèi)生標準管理，2015，6（21）：144-145.

[12]梁浩堅，鄭優(yōu)榮，許結(jié)儀，等.廣州地區(qū)無償獻血者丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶與HBV、HCV的相關(guān)性[J].中國醫(yī)學工程，2015，23（5）：168，171.

[13]楊茹，李剛，姚立.武漢地區(qū)獻血人群轉(zhuǎn)氨酶異常升高原因探討[J].中國輸血雜志，2016，29（6）：635-637.

[14]熊姣梅，鄭欣，楊愛蓮，等.獻血者血液篩查檢測中丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶與病毒性肝炎的相關(guān)性研究[J].國際檢驗醫(yī)學雜志，2015，36（7）：867-869.

[15]田也，李仲平，劉旭映，等.獻血者血液篩查檢測中丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶與病毒性肝炎的相關(guān)性分析[J].中醫(yī)臨床研究，2017，9（6）：68-69.

[16]Stramer SL，Krysztof DE，Brodsky JP，et al.Comparative analysis of triplex nucleic acid test assays in United States blood donors[J].Transfusion，2013，53（S3）：2525-2537.

[17]吳丹霄，吳亞玲，呂杭軍.核酸檢測在獻血篩查中的應(yīng)用[J].浙江預(yù)防醫(yī)學，2015，27（5）：501-503.