朱宇嘉 ,辛年香 ,馮 豆 ,朱志東 ,蔡延渠 ,鄧劍壕 ,呂 莉 ,董碧蓮 ,朱盛山
(1.廣州市普精生物科技有限公司,廣東廣州,510663;2.廣東藥科大學,中藥開發研究所,廣東廣州,510006)
聯合國糧農組織(FAO)報告指出,弧菌病一直困擾著科學家、動物衛生主管部門和養殖者,很難采取有效的預防和治療措施[1]。弧菌病令養蝦風險性大幅增加,全球尚無有效防治弧菌病的藥物。文獻[3]介紹的KFJ復方包括半邊蓮花、土香薷、檵木葉等8種植物,其提取物制劑(弧菌專家)在實際養殖環境中對弧菌病治療效果,證實“弧菌專家”是能有效防治弧菌病的藥物。但是,二次感染卻令人難于控制。本研究從對蝦的肝胰腺及其包膜入手,比較使用弧菌專家前后肝胰腺及其包膜變化與對蝦病癥的關系,同時檢測肝胰腺弧菌培養情況,為擬訂預防二次弧菌病方案提供臨床試驗依據。
試驗地點:廣東省江門市新會區大鰲鎮百頃村馮某一口池塘和廣東省湛江市企水鎮企水灣鄧某一口高位池,兩地試驗分別記為案例一與案例二。
試驗時間:案例一于2018年1月13日至2018年1月15日間進行,案例二于2018年1月26日至2018年2月5日間進行。

表1 試驗蝦塘基本數據
兩蝦塘基本數據統計如表1所示。表1中蝦塘水質數據(鹽度、pH值、氨氮、亞硝酸鹽、溶解氧)為病情診斷當天所測數據。
案例一:1月9日,蝦塘開始出現對蝦吃食減少情況,到1月13吃料量由一餐25 kg下降至一餐20 kg,每日三餐。蝦塘水面下風口處有白(浮)便4條/m2,長度3~12 cm。拋網觀察病蝦:腸道紅腫,肝胰腺萎縮,白膜覆蓋不完整等病癥,用TCBS培養皿檢測肝胰腺有大量弧菌。
案例二:2018年1月26日,病蝦活動能力減弱,蝦身瘦弱,斷腸、空腸,肝胰腺萎縮、糜爛、白膜消失,拖便、浮便、食欲減退,慢料、減料,白便、偷死。吃料量由一餐25 kg下降至一餐15 kg,每日三餐。
兩案例均采用“弧菌專家”按標示量進行治療。治療需連續用藥2 d,早晚各1次。根據“弧菌專家”用法用量表和注意事項計算用藥量,按藥料比1:3的比例拌料后于蝦塘均勻投喂。
每次用藥前從蝦塘撈取對蝦10尾,觀察對蝦癥狀,觀察分體表癥狀觀察和解剖觀察。其中體表癥狀觀察記錄蝦體各種癥狀,解剖觀察即剝殼后記錄對蝦肝胰腺癥狀。用藥后半小時記錄對蝦吃料情況。用藥2 d后每天于早晨第1次喂料前撈取對蝦10尾,進行體表癥狀觀察與解剖觀察。
案例一:1次用“弧菌專家”后,對蝦癥狀出現好轉,吃料蝦肝胰腺增大趨于正常,棕色,白膜覆蓋面積加大(覆蓋率約80%)。肝胰腺弧菌TCBS檢測發現,弧菌數量明顯減少。
案例二:蝦的活力明顯增強,基本沒有趴邊、拖便、斷腸,白便減少,肝臟白膜比較完整,蝦體色比較通透,偷死減少,吃料加快,TCBS弧菌培養檢測肝胰腺弧菌量較少。
案例一:用藥2 d,病蝦體表癥狀完全消失,體色通透,腸道飽滿。解剖發現肝胰腺正常充滿血色,白膜覆蓋基本完整,肝胰腺弧菌TCBS培養弧菌量少。
案例二:2 d用4次藥后,吃料基本恢復正常。觀察并剖取吃料蝦肝胰腺和腸道,可見肝胰腺白膜覆蓋基本完整,腸道呈棕黑色飽滿狀態。取肝胰腺搗碎后涂抹TCBS培養皿,24 h后觀察培養弧菌結果正常。
案例一:停藥2 d后,對蝦未發現病癥,對蝦腸道飽滿。解剖觀察發現白膜覆蓋完整。
案例二:停藥2 d后,對蝦體表未發現癥狀。解剖觀察發現白膜覆蓋率約為80%。TCBS培養檢測發現肝胰腺有少量弧菌。
案例一:腸道飽滿度較兩天前有所下降,肝胰腺白膜覆蓋率下降(覆蓋率約50%),TCBS培養發現肝胰腺弧菌量回升。蝦塘吃料速度放緩。
案例二:肝胰腺白膜基本消失,蝦體出現發紅癥狀,TCBS培養檢測肝胰腺含大量弧菌。蝦塘出現偷死癥狀(每日排除死蝦約30尾)。
在2個試驗案例中,“弧菌專家”用藥期間對蝦白膜覆蓋率逐漸擴大。用藥2 d后,2個案例中對蝦白膜基本恢復完整。于此同時,蝦塘中弧菌病癥狀逐步好轉,TCBS培養檢測發現對蝦肝胰腺弧菌數量不斷下降。到停藥第2天,案例一中對蝦沒有2次感染跡象,案例二中,白膜覆蓋率下降,肝胰腺出現少量弧菌,體表沒有觀察到癥狀。停藥后第4天,對蝦肝胰腺白膜覆蓋率均出現下降現象,其中,案例一中的對蝦肝胰腺白膜覆蓋率約為50%,此時,對蝦出現減料等早期病癥。案例二中的對蝦肝胰腺白膜基本消失,對蝦病癥嚴重,出現偷死的現象。
由2個試驗案例可見,對蝦肝胰腺白膜覆蓋率與弧菌病病情嚴重程度呈反相關關系。筆者推論肝胰腺白膜具有防御弧菌感染的功能。白膜覆蓋不完整將導致弧菌入侵肝胰腺,繼而出現各種弧菌病病癥。
在案例二試驗塘中,筆者自停藥后第5天起開始使用“弧菌專家”進行預防。2次用藥(1 d 1次,連用2 d)后,對蝦吃料速度恢復正常,預防開始后第3天取蝦解剖觀察發現,對蝦肝胰腺白膜基本覆蓋完整,肝胰腺無任何病癥。
病蝦用藥2 d后,肝胰腺好轉,但其保護肝胰腺免遭弧菌等入侵的屏障白膜覆蓋仍不完整,無法防止弧菌入侵肝胰腺。蝦塘和塘中死蝦體內弧菌含量高,活蝦好吃死蝦,導致弧菌入侵二次感染。尚處于康復期的病蝦,要及時預防(先間隔2~3 d,后慢慢延長)。當出現活力下降,拖便,慢料,斷腸,肝臟和腸道發紅等情況應及時用藥,最好是提前用藥,或加大用藥。
該文通過2個案例研究對蝦弧菌病發病與肝胰腺白膜覆蓋率之間的關系。試驗發現,對蝦肝胰腺白膜能夠抵御弧菌入侵對蝦肝胰腺。正常對蝦肝胰腺白膜覆蓋完整,肝胰腺無弧菌,病蝦往往肝胰腺白膜覆蓋不完整甚至消失,肝胰腺檢測出大量弧菌。應對弧菌病應當以預防為主,定期使用弧菌專家預防,有助于保護對蝦肝胰臟。如對蝦出現病癥或白膜覆蓋不完整,應及時采用“弧菌專家”進行治療。治療后由于白膜處于恢復階段,弧菌仍有可能入侵肝胰臟,為防止二次感染,應采用“弧菌專家”進行預防。