H型高血壓患者M(jìn)THFR基因型分布及與血管性癡呆的關(guān)系

王凌玲 雷夢覺 胡 杰 龔愛斌

(江西省人民醫(yī)院二部心血管內(nèi)科，江西 南昌 330006)

高血壓是臨床常見心血管疾病之一，在高血壓人群中伴隨同型半胱氨酸(Hcy)升高的原發(fā)性高血壓稱為H型高血壓〔1〕，占我國成年人高血壓的75%〔2〕。目前已知高血壓和高Hcy血癥(HHcy)均為心腦血管病的獨立危險因素〔3〕。如高血壓、HHcy等血管性危險因素都能促進(jìn)癡呆的發(fā)生〔4～6〕。血管性癡呆(VD)是繼阿爾茨海默病后的第2大癡呆性疾病〔7〕，是由腦血管疾病引發(fā)的一種具有癡呆表現(xiàn)的臨床綜合征，是迄今為止唯一可以防治的癡呆〔8〕。Hcy代謝的限速酶亞甲基四氫葉酸還原酶(MTHFR)基因的C677T堿基突變會減弱其自身活性，導(dǎo)致HHcy。VD確切的發(fā)病原因至今尚無統(tǒng)一定論。本研究探討H型高血壓患者M(jìn)THFR基因型分布與Hcy及VD的關(guān)系。

1 資料與方法

1.1一般資料 2015年2月至2017年1月在江西省人民醫(yī)院心內(nèi)科就診的患者576例，男296例，女280例，平均年齡(61.23±8.67)歲。患方知情同意，自愿參加。排除標(biāo)準(zhǔn)：(1)近1個月內(nèi)服用影響Hcy水平的藥物(如避孕藥、抗癲癇藥、多巴胺、葉酸和VitB12)；(2)存在營養(yǎng)及代謝性疾病，如甲狀腺疾病、嚴(yán)重貧血、營養(yǎng)不良、葉酸和VitB12缺乏、嚴(yán)重肝腎和其他臟器疾病。高血壓的診斷標(biāo)準(zhǔn)依據(jù)《中國高血壓防治指南2010》制定的標(biāo)準(zhǔn)〔3〕：收縮壓≥140 mmHg和(或)舒張壓≥90 mmHg，既往有高血壓史，目前正使用降壓藥物，血壓雖未達(dá)到上述水平，也診斷為高血壓。HHcy診斷標(biāo)準(zhǔn)：按照美國心臟病協(xié)會(AHA)和腦卒中聯(lián)合委員會(CAA)2006 年一并推出的《關(guān)于缺血性腦卒中和腦缺血發(fā)作的預(yù)防指南》診斷標(biāo)準(zhǔn)〔9〕，當(dāng)Hcy濃度>10 μmol/L者即可診斷為 HHcy。

按Hcy水平及血壓情況分為H型高血壓組188例(高血壓及HHcy)，男98例，女90例，年齡50～73〔平均(61.36±7.13)〕歲；非H型高血壓組109例(高血壓，非HHcy)，男55例，女54例，年齡50～73〔平均(62.17±6.85)〕歲；高Hcy非高血壓組165例(HHcy，非高血壓)，男84例，女81例，年齡50～73〔平均(62.75±7.24)〕歲；正常對照組114例(非高血壓、非HHcy)，男59例，女55例，年齡50～73〔平均(60.96±6.10)〕歲。4組性別、年齡等一般資料差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。

1.2一般臨床資料及實驗室生化指標(biāo)測定 收集一般臨床資料：性別、年齡、吸煙、飲酒、糖尿病史、體重指數(shù)(BMI)、心率；實驗室生化指標(biāo)測定：本研究所有標(biāo)本在我院同一臺日本日立7600全自動生化分析儀檢測，采集禁食12 h后靜脈血，測定血三酰甘油(TG)、總膽固醇(TC)、高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)、空腹血糖、肌酐、尿酸，采用酶聯(lián)免疫吸附試劑盒(上海研域生物科技公司)檢測血漿Hcy水平。

1.3VD的篩選 依據(jù)世界衛(wèi)生組織國際疾病分類第10版(ICD-10)中VD的診斷標(biāo)準(zhǔn)，同時符合下列條件：(1)簡易智能狀態(tài)量表(MMSE)評分<23分；(2)改良Hachinski缺血量表評分>4分；(3)符合美國精神病學(xué)DSM-Ⅳ制訂的VD標(biāo)準(zhǔn)〔10〕；(4)既往有腦血管疾病史。

1.4MTHFR基因多態(tài)性分析 抽取患者靜脈血2 ml，置于乙二胺四乙酸(EDTA)抗凝管中，采用天根生化科技有限公司提供的DNA提取試劑盒提取樣本基因組DNA，-20℃保存送檢。用杭州安杰思醫(yī)學(xué)科技有限公司的核酸擴(kuò)增實時熒光檢測系統(tǒng)，采用多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)-熒光定量法檢測MTHFR基因677C/T多態(tài)性分布，試劑盒由江西諾德醫(yī)療器械有限公司提供。所有操作按試劑盒操作說明進(jìn)行。

1.5統(tǒng)計學(xué)方法 采用SPSS19.0軟件進(jìn)行單因素方差分析、LSD-t檢驗、χ2檢驗、直線相關(guān)分析及多元Logistic回歸分析。

2 結(jié) 果

2.14組臨床資料比較 4組煙酒比例、心率、BMI、肌酐、尿酸、空腹血糖、TG、TC、LDL-C、HDL-C等指標(biāo)差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。H型高血壓組與非H型高血壓組收縮壓和舒張壓顯著高于高Hcy非高血壓組與正常對照組(P<0.05)；H型高血壓組Hcy水平顯著高于其他3組(P<0.05)，4組VD發(fā)生比例H型高血壓組>非H型高血壓組>高Hcy非高血壓組>正常對照組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。見表1。

表1 4組臨床資料比較

1)與H型高血壓組比較、2)與非H 型高血壓組、3)與高Hcy非高血壓組比較：均P<0.05

2.2血漿Hcy水平與收縮壓、舒張壓的相關(guān)性 血漿Hcy水平與收縮壓、舒張壓呈正相關(guān)(r=0.763、0.817，均P<0.05)。

2.3Logistic回歸分析 以VD為因變量，以HHcy為自變量，當(dāng)未加入?yún)f(xié)變量時，HHcy是VD的危險因素(OR=8.853，P<0.05)；當(dāng)校正年齡、性別、BMI、吸煙、飲酒史、心率、肌酐、尿酸、血糖、TC、LDL-C、HDL-C、TG后，HHcy仍是VD的危險因素(OR=8.461，P<0.05)；進(jìn)一步引入高血壓作為協(xié)變量，HHcy還是VD的危險因素(OR=4.211，P<0.05)，提示HHcy與高血壓對VD有協(xié)同作用。

2.44組MTHFR基因多態(tài)性比較 4組MTHFR C677T基因分布符合Hardy-Weinberg平衡定律〔11〕，可以認(rèn)為本研究選擇的人群基因頻率分布可以代表群體基因分布。H型高血壓組T/T型基因及T等位基因頻率顯著高于非H型高血壓組及高Hcy非高血壓組(P<0.05)；非H型高血壓組及高Hcy非高血壓組T/T型基因及T等位基因頻率顯著高于正常對照組(P<0.05)。見表2。

表2 4組基因頻率分布比較〔n(%)〕

1)與H型高血壓組、2)與正常對照組比較：均P<0.05

2.5MTHFR基因多態(tài)性與Hcy水平、VD發(fā)生率的關(guān)系 基因型C/C、C/T及T/T患者Hcy水平〔(14.53±6.83)、(19.76±3.48)、(33.08±9.43)μmol/L 呈遞增趨勢，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)；發(fā)生VD比例(10.96%、21.49%、38.98%)呈遞增趨勢，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。

2.6MTHFR基因多態(tài)性與VD的Logistic 分析 校正性別、年齡、BMI、Hcy、收縮壓、舒張壓時，以C/C基因型為參照，C/T基因及T/T基因型VD的風(fēng)險均增加(P<0.05)，見表3。

表3 基因多態(tài)性與VD的Logistic分析

3 討 論

隨著我國人口逐漸進(jìn)入老齡化，高血壓的發(fā)病率及患病率越來越高〔12〕。Hcy是在甲硫氨酸循環(huán)代謝過程中產(chǎn)生的一類含硫氨基酸，是非必需氨基酸的一種，具有重要的生理意義。有報道顯示，Hcy可以直接或通過其他途徑間接對血管內(nèi)皮細(xì)胞造成損傷，加強(qiáng)血小板功能，促進(jìn)血栓形成，導(dǎo)致血壓上升〔13〕。還有研究認(rèn)為血漿Hcy與高血壓發(fā)生的其他危險因素如吸煙、男性也有一定相關(guān)性〔14〕，但與高膽固醇血癥、糖尿病無明顯相關(guān)性，且在促進(jìn)高血壓方面呈獨立相關(guān)性〔15〕。Hou等〔16〕研究發(fā)現(xiàn)，血清Hcy水平隨著血壓上升也不斷升高。本研究也證明了血漿Hcy能夠促進(jìn)高血壓的發(fā)生及發(fā)展，收縮壓和舒張壓會隨著體內(nèi)血漿Hcy濃度的升高而升高。

MTHFR是導(dǎo)致血漿Hcy代謝發(fā)生改變最常見的關(guān)鍵酶。MTHFR基因位于1號染色體的1p36.3。正常的MTHFR活性是脂肪酸和蛋氨酸代謝的關(guān)鍵，MTHFR以維生素B為輔助因子在蛋氨酸合成酶的作用下，由N5亞甲基四氫葉酸為甲基供體，將Hcy再甲基化形成蛋氨酸〔17〕。C677T位點是研究較多的突變位點，該突變位于MTHFR基因的N端，并是維持酶活性功能及結(jié)構(gòu)域中的一個重要位點。其突變是堿基C被T替代，致使酶的活性下降，影響Hcy復(fù)甲基化，從而使血中Hcy水平升高〔18〕。本研究提示MTHFR基因中C677T的C→T突變與HHcy有關(guān)，與以往相關(guān)研究〔19〕類似。還有研究也證實〔20〕，MTHFR基因常見的C677T多態(tài)性在677位發(fā)生突變，攜帶T等位基因患者的血漿Hcy水平明顯升高，葉酸水平低，高血壓發(fā)病率也明顯升高。本研究也說明MTHFR基因中C677T的C→T突變與高血壓、HHcy相關(guān)。

高血壓作為腦血管病重要危險因素之一，與認(rèn)知功能障礙密切相關(guān)〔21～23〕，但其機(jī)制尚不清楚。有研究證明〔24〕HHcy是導(dǎo)致心腦血管事件，尤其是腦卒中的重要危險因素之一。而腦卒中又是VD的危險因素之一，因此Hcy也可能是VD的危險因素。還有研究顯示血漿Hcy水平的升高與癡呆的發(fā)生有明顯相關(guān)性，且血漿Hcy濃度升高可以作為癡呆發(fā)生的一個強(qiáng)有力及獨立的危險因素〔25〕。Nilsson等〔26〕研究發(fā)現(xiàn)，和其他老年精神性疾病相比，VD患者血漿Hcy水平明顯較高。本研究結(jié)果表明高血壓及HHcy二者對VD的發(fā)生具有協(xié)同作用。本研究還發(fā)現(xiàn)，T/T基因發(fā)生VD的比例要高于C/C及C/T基因，T等位基因為VD的易感基因。

綜上，MTHFR基因C677T突變及HHcy與VD的發(fā)生有關(guān)，可以通過MTHFR基因型的分析來預(yù)測VD。在降壓、降低Hcy水平的同時，尋找MTHFR基因C677T突變的原因并予以防治，從而為防治VD提供一些新的手段。