40%阿維菌素干懸浮劑的HPLC分析

李 飛，韓沖沖，李保同

（江西農業大學農學院，南昌 330045）

阿維菌素（abamectin）是由日本北里大學和美國Merck公司開發的一類具有殺蟲、殺螨和殺線蟲活性的十六元大環內酯類化合物[1]，已廣泛用于水稻、煙草、果樹和蔬菜等作物上害蟲和螨類的防治[2-4]。目前國內已有阿維菌素水乳劑、微乳劑的HPLC分析方法報道[5-6]，但多采用甲醇＋水體系為流動相，分析時間往往較長。本文采用乙腈＋水為流動相，對綠色環保新制劑40%阿維菌素干懸浮劑中的有效成分進行HPLC分析，方法操作簡便，可以快速準確地對阿維菌素進行定量分析。

1 試驗部分

1.1 試劑

乙腈（色譜純）；96.0%阿維菌素標準品（農業農村部農藥檢定所提供）；40%阿維菌素干懸浮劑（江西納農新田科技有限公司）。

1.2 儀器

Agilent 1260高效液相色譜儀，帶DAD檢測器（美國Agilent科技有限公司）；色譜柱：Zorbax E-clipse XDB-C1（8150 mm×4.6 mm，5 μm）不銹鋼柱；0.22 μm有機濾膜；超聲波清洗器；紫外可見分光光度計。

1.3 色譜條件

流動相：V（乙腈）∶V（水）=80∶20；流速為1 mL/min；檢測波長為245 nm；柱溫為30℃；進樣量為20 μL。在此條件下，阿維菌素B1a保留時間為7.137 min，阿維菌素B1b保留時間為4.056 min。阿維菌素B1a和B1b標樣溶液液相色譜圖見圖1。

圖1阿維菌素標樣溶液液相色譜圖

1.4 測定步驟

1.4.1 標樣溶液的配制

準確稱取0.010 8 g阿維菌素標準品（精確至0.000 2 g），置于50 mL容量瓶中，適量乙腈溶解，超聲波水浴助溶15 min，冷卻至室溫，然后用乙腈定容，配制成200 mg/L母液，備用。

1.4.2 試樣溶液的配制

稱取0.025 0 g試樣（精確至0.000 2 g），置于50 mL容量瓶中，加入乙腈，超聲波水浴助溶，冷卻至室溫，然后用乙腈定容，過0.22 μm有機濾膜，備用。

1.4.3 測定

在上述液相色譜條件下，待儀器泵的壓力和基線穩定后，連續注入數針標樣溶液，待相鄰2針峰面積變化小于1.5%時，按標樣溶液、試樣溶液、試樣溶液、標樣溶液的順序進樣。

1.4.4 計算

根據標樣溶液和試樣溶液中阿維菌素（B1a＋B1b）的峰面積，按外標法定量計算試樣溶液中阿維菌素（B1a＋B1b）的質量分數w（%），計算公式如下。

式中：A1為標樣溶液中阿維菌素（B1a＋B1b）峰面積的平均值；A2為試樣溶液中阿維菌素（B1a＋B1b）峰面積的平均值；m1為阿維菌素（B1a＋B1b）標準品的質量（g）；m2為試樣的質量（g）；P為阿維菌素（B1a＋B1b）標準品的質量分數（%）。

2 結果與討論

2.1 色譜條件的選擇

通過DAD二極管陣列檢測器進行全波長掃描，獲得阿維菌素紫外吸收譜圖（圖2）。從圖中看出，阿維菌素在245 nm附近響應值最大。因此選擇245 nm為檢測波長。

阿維菌素可以使用甲醇＋水體系和乙腈＋水體系為流動相。試驗發現，以乙腈＋水體系為流動相，峰形尖銳，保留時間更短，且與雜質峰分離效果好，吸收峰在7.13min和4.06min附近。故選擇乙腈＋水體系為流動相，兩者體積比為80∶20，流速為1mL/min。

圖2 阿維菌素紫外吸收譜圖

2.2 方法線性關系測定

用流動相將200 mg/L標樣溶液母液逐級稀釋為質量濃度0.01、0.05、0.1、0.5、1、5、10、20 mg/L的標樣溶液，在上述色譜檢測條件下，用外標法（峰面積）進行定量分析。以待測阿維菌素的質量濃度為x軸，以色譜峰的峰面積為y軸，作標準曲線圖。方法的線性回歸方程y=34.942 0 x-0.021 2，R2=0.999 9（圖3）。結果表明：在質量濃度0.01～20 mg/L時，阿維菌素峰面積與質量濃度線性關系良好。該方法可用于阿維菌素的分析和檢測。

圖3 方法的線性關系圖

2.3 方法精密度測定

從同一阿維菌素制劑產品中稱取5份試樣，在上述色譜條件下測定阿維菌素的質量分數，得到標準偏差和變異系數，結果見表1。方法的標準偏差為0.43，變異系數為1.06%，變異系數滿足國際農藥分析協作委員會（CIPAC）的要求（＜1.71%）。

表1 40%阿維菌素干懸浮劑精密度測定結果

2.4 方法準確度測定

準確稱取5份已知含量的40%阿維菌素干懸浮劑試樣，分別置于50 mL容量瓶中，每份試樣中加入一定量的阿維菌素標準品，在上述色譜條件下測定。阿維菌素的回收率為99.39%～102.11%，平均回收率為100.37%（見表2）。

表2 40%阿維菌素干懸浮劑回收率測定結果

3 結論

本方法以C18反相色譜柱為分離柱，乙腈＋水（體積為80∶20）為流動相，245 nm為檢測波長，測定40%阿維菌素干懸浮劑中有效成分的質量分數。方法具有操作簡便，分離效果好，線性關系良好，準確度和精密度高等優點，適用于制劑中阿維菌素的定量分析。