幾種新型殺菌劑對菜豆炭疽病菌的室內毒力測定

戴啟星 祝忠有 張樹武 徐秉良

（甘肅農業大學植物保護學院，甘肅省農作物病蟲害生物防治工程實驗室，甘肅蘭州 730070）

菜豆炭疽病是發生在菜豆豆莢和植株上的一種較為普遍的病害，在世界各地菜豆種植區內均有發生，不僅為害菜豆，還為害豇豆等，造成不同程度的減產和經濟損失（Shao & Teri，1985）。菜豆炭疽病菌侵染豆莢后，豆莢表面產生大量紅褐色凹陷病斑，從而導致籽粒干癟產生畸形，嚴重影響菜豆的產量、商品價值以及食用價值，一般可減產20%～30%，重者絕產（許志剛，2000；董偉和張立平，2013）。目前防治菜豆炭疽病的方法主要為藥劑防治，包括種子處理和田間噴施農藥。種子處理是通過藥劑拌種進行防治，拌種前先通過人工選種淘汰和剔除染病種子，以提高藥劑拌種的防治效果；田間噴施化學農藥更傾向于對病情的緩解，從而對癥下藥。Issa等（1983）、Gillard等（2012）使用福美雙、多菌靈、甲基硫菌靈和嘧菌酯對菜豆炭疽病進行田間防治，效果顯著；李永鎬等（1995，1996）在原有的單劑防治病害的基礎上，將多菌靈、百菌清、甲基硫菌靈、福美雙按照不同的濃度比例制成10種混合制劑，也取得了很好的防治效果。我國的菜豆品種資源缺乏對炭疽病的抗性，且在許多菜豆種植區都不同程度地出現病原菌對殺菌劑產生抗藥性的現象，在生產上急需高效低毒的新型藥劑防治措施（劉曉云 等，1995）。本試驗以咪鮮胺錳鹽、福·福鋅、苯醚·溴菌腈、二氫蒽醌、苯醚甲環唑、多福·溴菌腈為供試藥劑，對菜豆炭疽病防治藥劑進行了室內藥效篩選，為有效防治菜豆炭疽病提供科學依據。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

試驗于2017年在甘肅農業大學植物病原學實驗室進行。

供試菌種：菜豆炭疽病菌由甘肅農業大學植物病原學實驗室分離保存。將4 ℃低溫保存于斜面的菜豆炭疽病菌接種于 PDA培養基進行活化，并置于25 ℃恒溫培養箱中培養。培養6 d后選擇生長較好的1皿利用滅菌打孔器制取菌餅，接種于PDA培養基。

供試藥劑：50%咪鮮胺錳鹽可濕性粉劑（德國拜耳）、80%福·福鋅可濕性粉劑（天津施普樂農藥技術發展有限公司）、25%苯醚·溴菌腈水分散粒劑（江蘇托球農化有限公司）、66%二氫蒽醌水分散粒劑（江西禾益化工有限公司）、10%苯醚甲環唑水分散粒劑（天津施普樂農藥技術發展有限公司）、20%多福·溴菌腈可濕性粉劑（中國農業科學院植物保護研究所廊坊農藥中試廠）。

1.2 試驗方法

1.2.1 供試藥劑配制 將不同質量的6種藥劑加入60 mL PDA培養基中充分搖勻，分別配制成50%咪鮮胺錳鹽可濕性粉劑、25%苯醚·溴菌腈水分散粒劑濃度為 250、500、1 000、2 000、3 000 mg·L-1；80%福·福鋅可濕性粉劑、66%二氫蒽醌水分散粒劑、10%苯醚甲環唑水分散粒劑、20%多福·溴菌腈可濕性粉劑濃度為250、500、1 000、1 500、2 000 mg·L-1。

1.2.2 室內毒力測定 采用生長速率法進行室內毒力測定。將不同質量濃度藥劑分別制成含藥培養基平板，在無菌條件下從菜豆炭疽病菌菌落邊緣打取菌餅（Ф=0.5 cm），接種于含藥PDA培養基上。以含有無菌水的PDA培養基作為對照，接菌后置于25 ℃和16 h光照的人工氣候箱中，培養3 d后測量每個菌落的直徑，并計算菌落生長抑制率。每個處理和對照均設3次重復。

菌落生長抑制率= 〔（對照菌落直徑-處理菌落直徑）/（對照菌落直徑-0.5）〕× 100%

將藥劑對菌落的抑制率轉換成機率值（y），藥劑各濃度（mg·L-1）轉換成數值（x），然后求得毒力回歸方程（y=a+bx）和相關系數r，最后計算出供試藥劑抑制中濃度（EC50），比較各藥劑的相對抑制效果。

1.3 數據統計與分析

采用Excel 2003和DPS軟件進行數據處理、圖表繪制和方差分析，采用Duncan氏新復極差法進行數據差異顯著性檢驗（P＜0.05）。

2 結果與分析

2.1 3種可濕性粉劑對菜豆炭疽病菌菌落生長的影響

從圖1～3可以看出，3種可濕性粉劑對菜豆炭疽病菌菌落生長均有一定的抑制作用，福·福鋅的抑菌效果最好，濃度為1 000 mg·L-1時抑菌率就達到了77.68%，平均菌落直徑1.02 cm；多福·溴菌腈次之，濃度為1 000 mg·L-1時抑菌率為59.65%，平均菌落直徑1.44 cm；而1 000 mg·L-1咪鮮胺錳鹽的抑菌率為57.94%，平均菌落直徑1.48 cm。3種可濕性粉劑的濃度與抑菌率呈正相關關系，濃度越大，抑菌效果也隨之增強，菜豆炭疽病菌的生長量逐漸變小。從表1中毒力回歸方程和EC50也可以看出，3種殺菌劑對菜豆炭疽病菌的毒力大小為：福·福鋅＞多福·溴菌腈＞咪鮮胺錳鹽。

圖1 50%咪鮮胺錳鹽可濕性粉劑對菜豆炭疽病菌菌落生長的影響

圖2 80%福·福鋅可濕性粉劑對菜豆炭疽病菌菌落生長的影響

圖3 20%多福·溴菌腈可濕性粉劑對菜豆炭疽病菌菌落生長的影響

表1 不同濃度可濕性粉劑對菜豆炭疽病菌菌落生長的影響

2.2 3種水分散粒劑對菜豆炭疽病菌菌落生長的影響

從圖4～6和表2可以看出，3種水分散粒劑對菜豆炭疽病菌菌落生長均有一定的抑制作用，苯醚甲環唑的抑菌效果最好，在濃度為1 000 mg·L-1時，抑菌率就達到了72.96%，平均菌落直徑1.13 cm；苯醚·溴菌腈次之，在濃度為1 000 mg·L-1時，抑菌率為63.52%，平均菌落直徑1.35 cm；而1 000 mg·L-1二氫蒽醌的抑菌率為57.94%，平均菌落直徑為1.48 cm。3種水分散粒劑的濃度也與抑菌率呈正相關關系；濃度增大時，抑菌效果也隨之增強，菜豆炭疽病菌的生長量逐漸變小。從表2中毒力回歸方程和EC50可以看出，以上3種殺菌劑對菜豆炭疽病菌的毒力大小次序為：苯醚甲環唑＞苯醚·溴菌腈＞二氫蒽醌。

圖4 66%二氫蒽醌水分散粒劑對菜豆炭疽病菌菌落生長的影響

圖5 10%苯醚甲環唑水分散粒劑對菜豆炭疽病菌菌落生長的影響

圖6 25%苯醚·溴菌腈水分散粒劑對菜豆炭疽病菌菌落生長的影響

表2 不同濃度水分散粒劑對菜豆炭疽病菌菌落生長的影響

3 結論與討論

目前，使用化學藥劑防治菜豆炭疽病已有一些報道，Tu（1996）使用二嗦農、克菌丹、甲基硫菌靈對菜豆進行種子處理，以達到防治炭疽病的目的；李永鎬等（1995，1996）將多菌靈、百菌清、甲基硫菌靈、福美雙按照不同比例制成10種混合制劑也取得了很好的防治效果。由于近年來菜豆種植區不同程度地出現病原菌對傳統殺菌劑產生抗藥性的現象，本試驗選用6種新型化學農藥對菜豆炭疽病的防治進行了研究，在提高作物產量、解決生產過程中存在的抗藥性問題等方面具有一定的實踐意義。

前人對苯醚甲環唑、苯醚·溴菌腈、咪鮮胺錳鹽等農藥的研究主要集中在蘋果、芒果、柑橘等果樹炭疽病的防治上（許文耀和林成輝，2002；蔡美蘭，2008；彭埃天 等，2008；宋曉兵 等，2009；許克權 等，2013；胡曉涵，2017），在菜豆炭疽病防治方面未見相關報道。本試驗選用6種新型化學農藥對菜豆炭疽病進行室內藥效篩選和毒力測定，試驗結果表明，6種供試殺菌劑對菜豆炭疽菌均有一定的抑制效果，并且隨著藥劑濃度的增加，對菜豆炭疽病菌菌落生長的抑制作用也逐漸增強。其中防效較好的兩種藥劑為80%福·福鋅可濕性粉劑、10%苯醚甲環唑水分散粒劑，濃度為1 000 mg·L-1時的抑菌率分別達到了77.68%、72.96%。采用生長速率法進行殺菌劑室內藥效篩選，僅代表藥劑直接接觸病原菌菌絲時的抑制作用，而藥劑的田間防治效果不僅與藥劑對病原菌菌絲的抑制有關，還與病原菌孢子產生、孢子萌發、施藥技術、施藥時間等因素有關。在后續研究中，還需與田間藥效試驗相結合，為有效防治菜豆炭疽病提供科學依據。