李雯雯,蘇 喬,趙廣銀,李武國,付 強,李文英,黃浩機,徐耀基
(1.中山大學附屬第一醫院動物實驗中心,廣東 廣州 510080;2.佛山科學技術學院生命科學與工程學院,廣東 佛山 528231;3.廣州市寵物研究中心,廣東 廣州 510640)
近年來小型豬在醫學、教學及試驗研究中應用越來越廣泛,其中我國廣西巴馬小型豬屬于近交選育品種,具有體形矮小、個體整齊、性情溫順等優點,是較為理想的大型實驗動物,并且相關的品系資料較豐富。小型豬麻醉后手術前的血壓、血氣、血液生理、生化等指標的基礎值對圍術期的生理指標有對照作用,對圍術期的麻醉管理和液體管理有指導性意義,但有關小型豬麻醉狀態下的一些生理生化指標報道較少,且各地報道不盡一致。本試驗系統地測定巴馬小型豬麻醉狀態下心率、動脈血壓、動脈血氣、血清生化、血液生理學等多項生理生化指標,旨在為教學和相關研究提供參考。
1.1 主要儀器與試劑 7020型全自動生化分析儀,日本日立公司生產;i-STAT1便攜式血氣分析儀,美國雅培公司生產;麻醉呼吸機,美國馬特公司生產;動物血液細胞分析儀BC-5300Vet和心電監護儀IPM12Vet,深圳邁瑞公司生產;i-STAT EG7+ 血氣測試片,美國雅培公司生產;溶血素和稀釋液,深圳邁瑞公司生產。
1.2 實驗動物 質量合格的25~30 kg實驗用巴馬小型豬52只,雌雄不限,購自南方醫科大學實驗動物中心。試驗前禁食12 h,不禁水。
1.3 麻醉與保定 耳后肌肉注射阿托品0.05 mg/kg·bw、舒泰1.5~1.7 mg/kg·bw和鹽酸噻拉嗪2.2 mg/kg·bw(速眠新Ⅱ)進行麻醉誘導。備皮,行氣管內插管,并連接麻醉呼吸機。呼吸機設置潮氣量(Vt)10 mL/kg·bw,呼吸頻率15 bpm,氧流量1 L/min,異氟烷吸入濃度為1.5%維持麻醉。行仰臥保定,同時連接心電監護儀及呼吸傳感器。
1.4 頸總動脈插管 頸部氣管旁1 cm縱向切開皮膚3~5 cm,用組織鉗分離一側頸總動脈約3 cm長。取動脈插管,末端與三通相連,抽取25 IU肝素水充滿插管備用。結扎頸總動脈遠心端,用動脈夾夾閉近心端。在動脈夾和結扎處之間近結扎線處將頸總動脈剪一小斜口(45o角)。向近心端插入充有肝素的動脈插管并固定,連接監護儀有創壓力傳感器監測動脈血壓。
1.5 血樣采集和血氣、血液生理、生化指標測定 使用注射器經動脈插管抽取血樣。1 mL血液用于血氣檢測,使用前棄去注射器頭端2~3滴血后,按標準操作規程注入EG7+血氣測試片用血氣分析儀測定血氣指標,血液樣本測試前需輕輕混勻;5 mL血液注入促凝采血管,待血液充分凝固后離心分離血清,用于生化檢測;2 mL血液注入EDTA抗凝采血管,用于血常規檢測。



表1 心率95%參考值范圍計算表

表2 動脈收縮壓、動脈舒張壓、平均動脈壓95%參考值范圍計算表


表3 pH 值、HCO3-、BE、K+、TCO2、Ca2+、PaCO2 95%參考值范圍計算表

表4 PaO2 、Na+ 95%參考值范圍計算表


表5 WBC、RBC、HGB、HCT、MCV 、MCH 、MCHC 、MPV 95%參考值范圍計算表


表7 Urea、ALT、ALP、ALB、LDH 、Cr、AST、GGT 95%參考值范圍計算表

表8 TP、TBIL95%參考值范圍計算表
2.5 與其他文獻報道的比較 本試驗結果(平均數±標準差)與其他文獻報道的小型豬血壓、心率、血氣、血液生理、生化指標的比較分別見表9~表13。

表9 心率及動脈血壓的比較
A組:本試驗 ;B組:巴馬小型豬(黃國勇,2012)[1];C組:蕨麻小型豬(龔寶勇,2016)[2]

表10 動脈血氣分析的比較
A組:本試驗 ;B組:巴馬小型豬(黃國勇,2012)[1];C組:雜種長白豬(Wollborn J,2018)[3]

表11 血液離子含量的比較
A組:本試驗 ;B組:巴馬小型豬(黃國勇, 2012)[1];C組:大白豬( Canedo BF,2015)[4]

表12 血液生理指標的比較
A組:本試驗 ;B組:巴馬小型豬(王愛德, 2001)[5];C組:巴馬小型豬(楊述林, 2007)[6]

表13 血清生化指標的比較
A組:本試驗 ;B組:巴馬小型豬(王愛德,2001)[7];C組:巴馬小型豬(趙玉瓊,2017)[8]
在小型豬外科手術前進行常規生理生化指標的基礎值測定,對術中麻醉管理及補液管理有非常重要的指導意義。但小型豬麻醉狀態下與正常清醒狀態下測定的值可能有一定差別,特別在動脈血氣及心率、血壓等指標有可能差異較大,并且由于實驗豬品種不一樣,參考值也可能有差異。以往文獻中對各種小型豬的心率、血壓、血液生理生化指標報道較多,但多為小型豬在清醒時的正常值,在麻醉狀態下的基礎值鮮有報道,特別小型豬的動脈血氣資料最少。因此,本試驗有必要對巴馬小型豬術前的重要參考指標進行系統的測定,確定參考值范圍,彌補相關資料的不足。
經過對比研究發現,本試驗中小型豬術前HR、MAP都比文獻報道的其他小型豬正常值略低,但與人的正常參考值相符,而其他文獻報道的小型豬測定值均高于人的正常參考值。這可能與豬的年齡、體重,以及麻醉方法、麻醉深度、不同測量部位有關。

小型豬血液學常規生理生化指標的文獻資料相對較多,可供本試驗參照的數據也相對較多。本試驗所測血液學指標與其他文獻報道的測定值相比均普遍偏低,但本試驗與其他報道的試驗結果都顯示,巴馬小型豬的血液中RBC、WBC、PLT數量均明顯高于人類正常值范圍,但HGB與HCT又與人類正常值相似。術前血清ALT、AST含量比文獻報道的相對偏高,Urea、ALP明顯低于王愛德報道,綜合文獻與本試驗結果發現,AST、ALT、GGT在巴馬小型豬血清中的含量偏高于人類參考值范圍,LDH則明顯超出人類正常參考值范圍,TBIL低于人類正常參考值范圍,其余指標都與人類相當。表明了巴馬小型豬和人類生理、生化特性有一定的相似性,對實驗動物的手術教學與比較醫學研究有一定的參考意義。